然后5％的nds。含有％triton)封闭通透2h，孵育一抗，4℃过夜。第二天，pbs清洗三次后，孵育相应的荧光二抗，然后再用pbs清洗三次，封片，观察。结果见图8，在小鼠4月龄时，通过视网膜冰冻组织切片染色外节抗体rhodopsin以及内节抗体nak-atpase后发现，相较于野生型小鼠，gm20541基因敲除纯合子小鼠(图中sixko)视网膜外节明显缩短，表现出了明显退化表征。综上，可以看出，本发明实施例以小鼠为例，通过cre-loxp基因敲除技术，在小鼠视网膜前体细胞中特异性敲除gm20541基因，小鼠表现出了视力受损，视细胞外节变短退化以及视细胞丢失等视网膜色素变性疾病典型表征。由此充分说明，在视网膜前体细胞敲除gm20541基因，可以使目标动物表现出视网膜色素变性疾病。视网膜前体细胞敲除gm20541基因的动物，可以作为视网膜色素变性疾病模型。该疾病模型可以用于视网膜色素变性疾病研究等领域中，为该疾病的研究例如发病过程、机制以及相关药物的筛选提供一种新的模型。虽然本发明实施例展示了在小鼠的视网膜前体细胞敲除gm20541基因后的表型，但本领域技术人员容易理解到，小鼠作为哺乳动物的代表性动物，在其他的哺乳类动物中敲除gm20541基因或其同源基因也应当具有相似的表型。小鼠卵巢早衰POF模型。湖南乳鼠动物模型建模
脂多糖致脓毒血症肝损伤小鼠模型【方法】1、小鼠称重，按体重计算药物用量。2、脂多糖（LPS）药物配制，生理盐水溶解，根据小鼠体重配制终浓度为10mg/kg，200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠，捏紧小鼠颈背部皮肤，小拇指无名指叠加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的头部向下，这样腹腔中的就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤肠道。进针的动作要轻乘，防止刺伤腹部。5、注射器吸取准备好的药物，腹腔左下部与身体呈45度角左右斜角进针注射LPS，注射完药物后，轻微旋转针头退针，防止漏液。6、造模18h后处死小鼠解剖取组织进行组织病理学检查。【检测】肝组织有无：1、肝水肿；2、肝出血；3、炎性细胞浸润；4、肝组织肿大等病理改变。再观察肝损伤程度，各按程度积分为：0分为无该项病理改变；1分为病理变化轻且很局限；2分为病理变化中等且局限；3分为病变中等但或局部很；4分为非常的理改变。求出各动物的各项病理改变的总和，作为肝损伤程度积分。北京实验动物模型培养C57BL/6成年鼠肺部通过呼吸机过量通气损伤模型的建立；
常见的有组织病理染色、WesternBlot、PCR等），实验仪器是否需要预约使用。如果需要外送生物公司检测，需要提前联系好商家，以及了解清楚样本如何获取，如何运输。饲养动物及干预动物购买后需要将时间节点提前规划好，比如，周需要做什么？测量体重？观察饮食？测量需要的指标？中间有无特殊操作？比如灌胃、测量体重、做CT检测、取血？……第几周取材？取材需要哪些组织？预实验方案就要提前设计清楚以上内容。取材及样品准备取材需要提前到动物房禁食、称体重、取出动物、手术器械的消毒、组织固定所需要的试剂和EP管，WesternBlot和PCR所需要的样本储存条件。比如冻存管、EP管，是否需要冰块？是否需要液氮？取材当天需要多少人？是否需要请人帮忙？如果所需要取出的样本较多，建议大家请人一起帮忙，流水线作业，这样能节省时间，并且能保证样品的质量。如果请人，每个人需要负责哪一板块的工作，比如谁负责麻醉，谁负责取血液，谁负责取，谁负责拍照、谁负责储存，都需要提前规划交代清楚。实验指标检测如果是需要自己做的检测，比如常见的WesternBlot、PCR，建议提前可以看看教程（无论是视频还是贴吧，都要自己多方参考）。有了一定的理论基础后。
轻微的接触角膜的中心顶端。一通道正极接右眼，二通道正极接左眼。通过针管对双眼滴生理盐水，改善金环电极及角膜的接触效果。保证两个金环电极以相同的角度、方式接触两眼角膜中心正端的相同位置。5记录示波信号确认无误后，关闭暗红光。可以先尝试记录一下暗适应光强为·s/m2的erg检测，确认一下信号的质量：如果双眼的振幅出现了与预期不同的较大差异，建议再次检查金环电极的安装位置。然后依次记录暗适应光强为·s/m2的信号。需要注意的是，完成暗适应·s/m2光强检测后，系统将自动打开背景光。同样的，需要打开定时器，光适应10-15分钟，再记录。6经过光适应后，依次记录光适应·s/m2以及·s/m2光强下波形，记录·s/m2光强下闪烁视网膜诱发电位。结果发现在4个月时，与ctrl(对照)小鼠比较，cko(gm20541基因敲除纯合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗适应和光适应条件下均明显降低，表明gm20541敲除后导致视力受损(见图5和图6)。实施例4视网膜石蜡切片h&e染色：对4月龄小鼠的视网膜进行石蜡切片、苏木精-伊红染色法(h&e染色方法)染色，具体操作如下：1)快速取小鼠眼球组织，并置于固定液中固定24h；2)石蜡包埋，切片，厚度为4μm；3)切片常规用二甲苯脱蜡。由于大鼠面神经与人类相似,易于暴露.因此通过大鼠面神经损伤致瘫的模型制作方法为研究者提供更多的思路。
可在设定的压差标准内无极调控，以保障系统对海拔(3000m～7000m)的微负压进行模拟。并且，进排风风管装有高效空气过滤器，使进入饲养仓2的气体洁净。实施例3在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，所述高原低氧环境模拟装置包括惰性气源，所述惰性气源与进风系统13连接，所述惰性气源与进风系统13之间设置有比例式气阀，还包括设置在饲养仓2内的嵌入式氧测定仪。本实施例的工作原理：惰性气源可以是惰性气体储备罐或者是液态惰性气体储备罐。在模拟低氧环境时，外接惰性气体储备罐连接进风系统13。比例式气阀和嵌入式氧测定仪均与功能控制面板19连接，通过功能控制面板19上的氧浓度表显示浓度来调节比例式气阀，通过加惰性气体来来实现降低氧气浓度。当仓体内的氧气浓度较高时，手动打开惰性气体储备罐与进风系统之间的气阀，调节惰性气体进入量，使仓体内氧气浓度降低，观察控制面板上的氧浓度显示，调整气阀开度大小，达到需求的氧浓度，以此调节实现高原缺氧环境的模拟。本技术方案采用的惰性气体为对生命体无危害的惰性气体。实施例4在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统。面神经受损而致面部表情肌群的运动功能障碍,对患者的心理和日常生活造成很大的影响。云南小鼠动物模型饲养
通过截断大鼠面部神经致面瘫模型的建立。湖南乳鼠动物模型建模
糖尿病足大鼠模型【目的】构建糖尿病足大鼠模型；【材料】1、材料：STZ药物、注射器、柠檬酸、柠檬酸三钠；2、试剂配制：1）柠檬酸纳缓冲液配制：A液十B液=1:，PH=；A液:柠檬酸mL；B液:朽檬酸三纳2）STZ液配制:55mg/kg（避光，现配现用10min内注射)；3、糖尿病模型构建方法：1）大鼠术前禁食12h；2）按55ug/g注射.连续3天注射，对照组注射柠檬酸缓冲液，造模组注射STZ液，注射后不禁水、禁食2-4h；3）STZ注射结束5天后空腹测血糖，血糖值高于12mmol/L选入实验组；【方法】方法一：细菌悬浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周时，后足背侧注射l0ul金黄色葡萄球菌悬浮液，造成糖尿病肢端的动物模型；2、后续观察伤口情况；方法二：皮肤划伤造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手术剪做一个圆形皮肤创口，直径5mm；2、后续每日观察伤口情况，作好记录。湖南乳鼠动物模型建模
