小鼠尾尖用酒精擦拭尾巴，引起轻微的血管扩张；用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀，快速截断小鼠尾尖1-2毫米。如果需要多次采，之后每次需截除2-3毫米；从尾部像尾尖方向按摩，增加血流；用采集血液；结束后，按压伤口或使用止血剂来止血；每次量大约可达。小鼠眼球取血单手保定好小鼠；必要时剪掉小鼠胡须，防止污染血液；轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；用弯头镊夹取眼球并快速在摘取；同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠；大鼠眼眶取血先将小鼠进行麻醉，大鼠翻正反射消失时不在继续麻醉；抗凝处理过的玻璃毛细采样管，掰成2-3厘米长度；右手食指和拇指轻按眼眶两侧皮肤，使眼球突出，毛细管从内侧的眼球与眼睑的缝隙处进入，轻轻旋转毛细管，稍微深入眼球后上方，血液流速快的时候4-5滴即可，温柔的将毛细管取出；用棉签按压大鼠眼眶止血，每次可取血50-100微升，将血液放入冰盒中保存。小鼠心脏取血先将小鼠麻醉，稍靠右侧平躺在手术板上固定；左侧第三四根肋骨间触摸心脏，跳动明显，慢慢进针；针有回血停止进针，开始取血；一次可以300到500微升，小鼠存活，放到加热垫上待小鼠苏醒后放入笼中。四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠模型。云南实验动物模型技术
40mmnaoh，)，并在金属浴100℃加热1h；(3)取出离心管，冷却至室温后，加入100μl的中和液(40mmtris-hcl，)，10000g离心2min后，取上清用于小鼠基因型鉴定。(3)pcr扩增：按照如系配置pcr反应体系2×taqmix：10μl尾巴组织裂解液：2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward)：1μl(浓度：10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse)：1μl(浓度：10mm)ddh2o：6μl。引物序列如下：gm20541-loxp-forward序列：5’-attccccttcaagatagctac-3’；gm20541-loxp-reverse序列：5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’；six3-cre-forward序列：5’-gccgccgggatcactctcg-3’；six3-cre-reverse序列：5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。扩增程序：pcr反应体系配制完后，在pcr仪上于95℃预加热5分钟使模板dna充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于95℃保持30秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度58℃，保持30秒，使引物与模板充分退火；在72℃保持30秒，使引物在模板上延伸，合成dna，完成一个循环。重复这样的循环25次，使扩增的dn段大量累积。，在72℃保持5分钟，使产物延伸完整，4℃保存。(4)凝胶电泳称取1g琼脂糖放于100mltaebuffer中。云南实验动物模型技术骨质疏松症是以骨量减少及骨组织微观结构为特征的一种全身性骨骼疾病，伴有骨的脆性增加、易于发生骨折。
经多级乙醇至水洗：二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min；4)苏木素染色5分钟，自来水冲洗；5)盐酸乙醇分化30秒；6)自来水浸泡15分钟；7)置伊红液2分钟。8)常规脱水，透明，封片：95％乙醇(i)1min→95％乙醇(ⅱ)1min→100％乙醇(i)1min→100％乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3：1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性树脂封固。9)显微镜下拍照。结果发现在4个月时，与ctrl(对照)小鼠比较，sixko小鼠的视网膜外核层已经开始变薄，表明感光细胞死亡(图7)。实施例5视网膜冰冻切片免疫染色：取4月龄的由实施例2得到的gm20541基因敲除纯合子小鼠断颈处死后，快速取眼球，并放入4％的pfa中，冰上固定15min后，在角膜上剪口，然后继续冰上固定。2h后，pbs缓冲液冲洗3遍，然后将眼球置于30％蔗糖溶液中脱水2h，然后解剖镜下剪去角膜及晶体，oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷冻。大约10min后，取出oct包埋的眼球，置于冰冻切片机-25℃平衡约30min后即可切片。切片厚度为12μm。切片完成后，选取质量较高的片子于37℃烘箱放置30min，然后免疫组化笔在有视网膜组织的地方画圈，pbs洗三遍以去除oct。
痉挛型脑性瘫痪(SCP)大鼠模型【目的】痉挛型脑性瘫痪(SCP)大鼠模型建立【动物】SPF级SD大鼠，雄性，周龄6~8W，体重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，颅顶脱毛备皮；2、大鼠脑定位仪固定大鼠，颅顶正中切口，长度约2cm开口暴露前囟及矢状缝；3、缝线将皮肤左右分开固定，前囟后10mm、矢状缝左侧；4、微量注射器移至开孔处修正骨孔，注射器垂直向颅内插入，缓慢注射无水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球压迫止血；5、缝合创口后维持25°体温，等待苏醒，观察大鼠状态。【观察】术后3天模型大鼠摄食减少、右侧肢体跛行、右前肢不负重、右前肢及右前爪屈曲痉挛明显，顺时针绕圈前行，2周后症状减轻，大鼠于术后4周开始给予动物行为学观察【检测】HE检测对比观察脑组织是否出现细胞水肿,排列不规则,结构紊乱,核固缩,染色体分布不均匀,变性坏死,核糖体消失,白质软化灶和空囊形成,小胶质细胞浸润,星形胶质细胞肥大、增生等病理表现。旷场测试（OpenFieldTest）：实验用于评估大小鼠的活动性和探索性行为。动物被放置在一个较大的开放性场地内，然后记录它们的运动轨迹和停留时间。用来评估动物的活动性、焦虑程度、压力反应等。水迷宫测试。合理建立周围性面瘫动物模型对进一步深入研究具有重要意义。
其也是可以作为视网膜色素变性疾病模型的。以上所述为本发明的实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。sequencelisting四川省人民医院利用gm20541基因构建视网膜色素变性疾病模型的方法和应用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。IgA肾病小鼠模型IgA 肾病是常见的原发性肾小球疾病,约占原发性肾小球疾病的 1/3。云南实验动物模型技术
大鼠、小鼠动物疾病模型技术。云南实验动物模型技术
IgA肾病小鼠模型【目的】建立IgA肾病小鼠模型，并观察模型的生化及病理指标特点。【材料】1、酸化水：盐酸调灭菌水；2、蓖麻油+CCl4：5:1配制；3、LPS：；4、血清白蛋白BSA：800mg/kg用量，灭菌水配制；【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS诱导法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次，配制160mg/ml，灌胃100ul/只，持续8周；2、同时皮下注射蓖麻油和CCl4（5:1），1次/周，持续8周；3、分别于第6、8周以（）尾静脉注射LPS，1次/周；4、每两周取24h尿液一次观察尿蛋白及红细胞；5、每日观察精神、饮食、大小便，第9周处死，取血和肾、肝做相应检查；6、取尿液后2000r/min离心10min，取上清用全自动生化仪检测尿蛋白肌酐比值，镜下观察尿沉渣中有无红细胞。云南实验动物模型技术
