加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。 4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。 5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。 6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。 * 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。超滤浓缩管的好处有很多。崇明区浓缩管参数
核苷酸截留分子量（NCO） 超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的，适合各种蛋白研究，但在核酸 和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏 过，相对于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以选择 滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。 浓差极化 浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞，产生除了膜本身截留分 子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时，会形成相当于第二层滤膜作 用的胶体层，干扰分子通过滤膜，同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分 也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。长宁区Merck离心浓缩管咨询报价超滤浓缩管的好处您了解多少呢？
脱盐/缓冲液置换并浓缩 5次低速离心，总耗时~35分钟 1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。 2. 优化选做：加入1.5 mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1 min。 3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。 4. 加入1.5 mL样品，4,000×g离心15 min进行浓缩。 5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15 min，换液的同时进行浓缩。 6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。 * 进行较大体积操作时，可以适当延长离心时间，也可参考Amicon® Pro完整操作说明书 查看详细信息。
膜的吸附损失 对于浓度很低及珍贵的样品，除了考虑截留效率和操作方便外，额外 要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损 失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel® 再 生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小，是 Amicon® Ultra 超滤管 等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的 吸附对样品收率会产生直接影响，所以如果希望尽可能提高得率，就 应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选 用膜面积小的装置，同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列 离心式或搅拌式装置，配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向 流系统，支持您获得理想的处理效果。超滤浓缩管的好处都有很多。
截留 截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近 的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强 度改变的情况下倾向于聚集或改变构象，因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多，从而导致排阻增加。比如，有些蛋白质在某些缓冲液条件下 会发生多聚化，而另一些则发生解聚（如血红素蛋白）成亚基。这使选择 合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验，我们通常推荐选择 为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先，再根据实际情况加以调整。益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。长宁区Merck离心浓缩管咨询报价
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浓度：当需要截留的样品浓度很低时，通量通常不受浓度影响。操作过 程中，随着溶质浓度的升高，增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度：粗体，作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。 污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。崇明区浓缩管参数
