鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用:在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞悬液的制备:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下皮肤后.以消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液.用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平皿.(3)鼠尾胶原凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中30rain,散尽剩余氨气。4°C沉淀10小时,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀。深圳鼠尾胶原价格

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用:胶原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2诱导。24h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果与结论:两组培养皿中,随着过氧化氢浓度的增高,均可见细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降,细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高,Bcl-2/Bax比值明显降低,呈剂量依赖性。南昌鼠尾胶原价格将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。

胶原蛋白的适用征状:1、由于工作劳累,睡眠不足形成的皮肤晦暗无光、发黄、皮肤弹性差等皮肤衰老的不良症状。2、由于年龄、太阳辐射因素引起的皮肤松弛、下垂、皱纹、干燥等皮肤衰老现象。3、由于体内异常黑色素分泌旺盛,大量沉积皮肤表面,肌肤不能及时代谢出异常黑色素,形成各种色斑。4、由于长期户外活动及皮肤保养不当使肤质受到损伤,过早出现细纹,皮肤干燥、脱皮、、毛孔粗大等不良症状。5、由于内分泌功能紊乱,皮肤肤质差、皮肤发油、发暗,易长青春痘留下的色印、色素沉着等。6、由于生活无规律,吸烟等因素,造成的黑眼圈,眼袋等问题。7.长期电脑旁工作,电脑辐射造成脱发,内分泌紊乱问题。
鼠尾胶原蛋白的提取方法:1.一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱,真空冷冻干燥备用;(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200〜400目;(3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀,鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL〜I克:120mL,期间不断搅拌,防止冻结成块,得到胶原溶胀液;(4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中,鼠尾腱与蛋白酶质量比为50:I〜100:1,在4°C,48〜74小时酶解,期间间歇性搅拌。制备鼠尾胶原:将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡。

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I型胶原蛋白(Collagen, Type I)结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体。深圳鼠尾胶原价格
鼠尾胶原醋酸溶解:1.将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。在接种细胞前用无菌的水漂洗。深圳鼠尾胶原价格
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鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于培养瓶内。实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容:1、制备鼠尾胶原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。胶原的立体结构与一般的球状蛋白...