超滤离心管关于回收率的疑问?一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收,回收率在90%以上。通常,样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率,所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜,其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏,在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此,截留孔径越小,流速越慢,但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀,如何处理?如果蛋白质浓缩过快或过多,都可能造成蛋白质沉淀,浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高;对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质,建议改进方法如下:1)降低离心速度,2)使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管,然后离心。超滤离心管可以用于分离各种生物样品,如血浆、细胞培养液、酶溶液等。安徽超滤离心管
玻璃离心管:使用玻璃管时离心力不宜过大,需要垫橡胶垫,防止管子破碎,高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好,液体就不能加满(针对高速离心机且使用角转子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染转子和离心腔,影响感应器正常工作。超速离心时,液体一定要加满离心管,因为超离需要抽高真空,只有加满才能避免离心管变形。塑料离心管:塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出样本。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC (聚碳酸酯),PE (聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观的看到样品离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。安徽超滤离心管超滤离心管通常被用于天然药物研究和制备中。
避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。离心管是一个简单的可以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。超滤离心管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),就是超滤的原理.常用于浓缩样品。 超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。
蛋白和多肽超滤离心管,垂直设计和有效的膜表面积提供了快速的样品处理,较高的样品回收率(> 90% 的样品回收率),以及 80~100 倍浓缩的能力。浓缩物使用吸液器从过滤装置中收集,而超滤液则在提供的离心管中收集。超滤离心管是一种可以为蛋白质样本的浓缩和缓冲交换提供可靠准确结果的一次性超滤离心式过滤装置,与层析、透析等方法相比,超滤对被处理的分子更加温和,不需要有机萃取,不会导致蛋白变性,且简单高效。规格超滤浓缩器可处理体积4mL 以内的样本,离心管内包含一个内置竖直的聚醚砜(PES)膜过滤装置,聚醚砜膜具备低蛋白附着、高通量的特点,可应用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD 六种不同的截留分子量中。截留分子量标识和体积刻度蚀刻在浓缩器的侧面便于识别。超滤离心管可以有效地去除溶液中的杂质,使样品更纯净。
超滤离心管应用:除盐、渗滤或更换缓冲液;浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株 DNA/RNA 样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本;净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合液中去除引物、连接或分子标记,在 HPLC 之前去除蛋白质。产品组成:超滤离心管包括一个盖子、一个过滤器和一个离心管。产品特点:较高的样品回收率 (> 90% 的样品回收率 );垂直膜的设计减少浓缩所用时间(10-15分钟);经过严格的泄漏测试;无 DNase、RNase,无热原、无内元素。使用这个超滤管,厂家强调一定是一次性的,这个超滤管必须只能使用一次,不能重复使用!超滤离心管通常需要在低温条件下进行操作,以避免目标分子被破坏或失活。安徽超滤离心管
超滤离心管可以有效地去除混合物中的低分子量化合物,从而提高目标化合物的纯度。安徽超滤离心管
我们面对上面客户反映的问题使用2次以上出现问题是很正常的,但是我们也不能保证客户使用5次,8次,还是更多次就一定会出现穿孔不能用,我们必须再一次强调提醒做实验的各位老师,这个超滤管必须严格按照说明书规定,一次性使用,不要重复使用,重复使用虽然有的人可以用几次,但是过滤效果已经严重影响了,效果肯定一次次的下降!你说这样过滤的样品做后续实验,那你的后续实验还可信吗?所以厂家也一再强调较好不要重复使用!另外,有的客户说自己的超滤管使用一次就碎了,这是什么原因呢?超滤管的质量问题还是离心机转速的问题呢?说到这里,我们也再一次提醒大家超滤管使用如果转速太高,离心力肯定会更大!这样不断用力磨损,很容易一次就碎了,也可能使用几次碎了!安徽超滤离心管