江苏3K超滤离心管使用方法

蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管，微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积，还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如，当靶蛋白的分子量为35kDa时，可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd，则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上，冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后，可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。使用超滤离心管时应注意避免过度旋转或操作不当导致样品失效或污染，并及时更换膜和其他配件。江苏3K超滤离心管使用方法

超滤离心管，备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用。 使用注意事项 （1）选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。 （2）新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。 （3）平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至较低档，减小对膜的压力。江苏3K超滤离心管使用方法超滤离心管还可用于分析食品样品中的营养成分和添加剂，以保障公众健康和安全。

使用后用0.1M NaOH泡24h，然后20%乙醇浸泡保存。这个我是听老板们说的，的确乙醇泡完后孔径会增大，基本就是5-10KD较大，也就是说如果你的蛋白在21KD以上，应该没问题。或者可以不用乙醇泡，用NaOH洗之后直接用无菌水保存，每周换一下液体，应该没有问题。看看说明书不就结了！我原来在CRO的时候一直是重复用的，也没见什么不好啊！短期会用的话，用20%的乙醇泡着，回头拼命用millipore的水充干净，然后在用样品缓冲液平衡一下就好，至于有些人说的改变孔径，也没那么大影响的，你至少跟目的蛋白分子量差别3倍的截留分子量才安全的不是吗?1个月以内不用的话，建议用100mM的NaOH保存！更长时间的话加0.02%的叠氮钠，但那个东西强致疾病物，不建议使用。理论上截留目标物，孔径应选1/3~1/5的膜；透过目标物，孔径应选5-10倍的膜。

以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用设备头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml。离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。超滤离心管的使用需要配合其他实验步骤，如样品制备、pH调整等。

离心过滤器具有快速超过滤功能，能够达到较高的浓缩系数，易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液)，并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至60分钟，这取决于标称分子量限值(NMWL)。竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低，过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集，而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。该装置可在摆桶或定角转子中旋转。装置未经消毒，只供—次使用。超滤离心管可以用于分离各种细胞类型，并进行进一步的培养、检测和研究。江苏3K超滤离心管使用方法

超滤离心管还可用于制备DNA文库或RNA文库，以进行基因克隆和功能研究。江苏3K超滤离心管使用方法

超滤离心管的常见问题与解答，一：超滤离心管的膜材质是什么？超滤离心管的膜材质为特有的Ultracel再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而，蛋白吸附损失较小。二：如果要用超滤离心管的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少？按照经验，建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级（10倍）。不保证超滤离心管不包含RNA酶，建议用0.1%DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶；残留的DEPC可以用Milli-Q超纯水洗涤除去。去污剂因其独特的性质，当浓度大于临界微团浓度（Critical Micelle Concentration、CMC）时，去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象，这有可能会影响去污剂的去除效果，具体的操作步骤请垂询我们。江苏3K超滤离心管使用方法