离心过滤器具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至60分钟,这取决于标称分子量限值(NMWL)。竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低,过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集,而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。该装置可在摆桶或定角转子中旋转。装置未经消毒,只供—次使用。超滤离心管可以用于制备疫苗、抗体等生物制品,以缓解某些疾病。辽宁超滤离心管咨询
离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中必备的实验耗材之一。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。青岛再生纤维素离心管公司离心机转速会影响到超滤效果,因此需要根据实验要求调整相应的转速。
我用的是3500g,4度离心,时间可以自己控制,取决于你之后的浓缩体积,我一般是200ul左右。千万别一下离心时间太长,不同的蛋白浓缩的速度不同,有的需要长时间离心,有的则一下子就好。当然也和你的蛋白是否比较纯,所用的是什么buffer,还有蛋白的浓度有关系。所以离心时要先短些时间观察一下你的浓缩速度,不要一下子浓缩过了,甚至形成沉淀就得不偿失了。另外其实他们的管子都设计的是一次性使用,所以如果想重复使用,不要离得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重复使用时要看看管壁上有没有裂纹,现在的管子好像不如从前的结实了。
脱盐、更换缓冲液或渗滤是从含有生物分子的溶液中去除盐分或溶剂的重要方法。盐分去除或缓冲液更换可通过超滤管来完成,具体过程是浓缩样本,弃去滤出液,然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂,恢复到样本原先的体积。"洗出"的过程可反复进行,直到杂质的浓度被充分降低。关于超滤管的常见问题与解答:Q:超滤管的膜材质是什么?A:超滤管的膜材质为默克密理博特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而准, 蛋白吸附损失小。Q:如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?A:按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差 一个数量级(10倍)。超滤离心管利用离心力和超滤膜将分子分离和过滤出来。
塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。超滤离心管通常需要在低温条件下进行操作,以避免目标分子被破坏或失活。重庆3K超滤离心管厂家直销
超滤离心管可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。辽宁超滤离心管咨询
超滤离心管使用注意事项:(1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。2)新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。(3)平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。辽宁超滤离心管咨询