选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。使用超滤离心管时应注意避免振动或震动造成样品混乱并影响分离效果。嘉兴再生纤维素离心管公司
玻璃离心管:使用玻璃管时离心力不宜过大,需要垫橡胶垫,防止管子破碎,高速离心机一般不选用玻璃管。离心管盖子封闭性不够好,液体就不能加满(针对高速离心机且使用角转子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染转子和离心腔,影响感应器正常工作。超速离心时,液体一定要加满离心管,因为超离需要抽高真空,只有加满才能避免离心管变形。塑料离心管:塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出样本。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC (聚碳酸酯),PE (聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观的看到样品离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。广东小型超滤离心管制造厂超滤离心管通常需要冷藏保存,以保持其性能和寿命。
超滤离心管,备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用。 使用注意事项 (1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。 (2)新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。 (3)平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。
离心管主要有塑料、不锈钢制成,塑料离心管常用资料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能较好,塑料离心管的优点是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,运用寿命短;不锈钢离心管强度大,不变形,能抗冻,抗热,抗化学腐蚀,但用时要防止接触强腐蚀性的化学药品、如强酸、强碱等化学试剂。这里主要介绍塑料离心管:塑料离心管都有管盖,离心前管盖必需盖严,倒置不漏液。管盖有三种作用:①避免样品外泄,用于有放射性或强腐蚀性的样品时②避免样品挥发③支持离心管,避免离心管变形。使用前应先对超滤膜进行湿润化处理,以免损坏其结构并保证较佳效果。
根据其大小,又分为1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,国产的离心管一般就是这几个规格,用的较多的也就是10ml和50ml的。如果您的离心机是配30ml或者其他规格的离心管时,就要考虑进口的了。另外,离心管还有圆底和尖底,以及螺旋盖和插盖之分。螺旋盖的离心管带有较精细的刻度,插盖的只有一个总体的容量标示。实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观的看到样品离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。超滤离心管在临床诊断中也具有重要作用,如肾功能检测、脑脊液分析等领域。浙江浓缩超滤离心管定制
使用超滤离心管时,应注意控制转速,以避免过度旋转导致超滤膜损坏或溢出样品。嘉兴再生纤维素离心管公司
以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用设备头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml。离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。嘉兴再生纤维素离心管公司
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