企业商机
培养基基本参数
  • 品牌
  • CellHub
  • 保质期
  • 12个月,18个月
培养基企业商机

    发酵培养基为:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,cecl30-40mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;发酵工艺同实施例1,100l发酵罐中含有70l发酵培养基。设置cecl3的添加浓度为0,,如图1-2所示,随着cecl3添加量的增加,菌体浓度和谷氨酸含量均有所提升,当添加量为10mg/l时,菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值,然后出现下降趋势,但是整个过程中,糖酸转化率没有明显改变(附图未显示);说明cecl3稀土盐能够促进菌株增殖,提高谷氨酸相关合成酶的活力,提高谷氨酸的产量,但是过高的浓度会造成菌株增殖放缓和死亡,谷氨酸产量相应下降。二、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l,在此基础上,研究2-羟基乙胺对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。设置2-羟基乙胺的浓度为,5,10,20,40,80,160mg/l,如图3-4所示,随着2-羟基乙胺添加量的增加,菌体浓度随之增加,相应地,谷氨酸含量和糖酸转化率也有所提升,当添加量为40mg/l时,菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值,继续增加2-羟基乙胺的浓度,产生明显的抑菌效果,菌株密度下降明显;原因是,低浓度的2-羟基乙胺可能促进磷脂酰乙醇胺细胞壁组分的合成。无酚红培养基在敏感细胞系的培养中表现优越。广东Ham's F12培养基报价

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    **早开发的基础培养基(minimalessentialmedium,MEM),其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍,其特性及应用的范围见表1-2。表1-2常用合成培养基的特性及应用的范围培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后,可***用于多种细胞培养,并用于**学、*苗生产等。MEM细胞培养基MEM(MinimalEssentialMedium)培养基有含Earle's平衡盐的类型,也有含Hanks'平衡盐的类型;有高压**型的,也有过滤**型的;还有含非必需氨基酸的类型。是**基本、适用范围**广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿*细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交*的骨髓*细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基础上改良,增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交*细胞培养。江苏减血清培养基代理商RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。

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    又能使培养基的破坏降低至比较低的工艺条件。许多实验研究结果表明,培养基在高温**的过程中,其营养成分的破坏在很大程度上可以用一级反应来描述其反应速度:式中—表示营养成分破环的速率,C:表示营养成分的浓度K':为反应速度常数,1/s,应速度常数K'与温度的关系,可以使用阿累尼乌斯公式表示之:K'=A'exp-△E'/RT……(1)式中——:反应速度常数,1/S:反应的活化能(J/mol)R:气体常数,*J/mol*kT:反应的***温度,k同样,**过程中的反应速度常数也可以用下式表示出:K=A×exp[-E/RT]……(2)(1)、(2)式可以改写成下列形式:lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……(3)lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……(4)(3)(4)的意义是指:反应的温度从T1升高到T2,其反应的速度常数分别从k,1增加到k,2;k1增加到k2;培养基的**过程实际上是营养成分破坏、菌体死亡的两个平行性反应,对于平行性反应,反应温度的提高,其两个平行性反应的速度常数都增加,但增加的幅度(大小)却不同,其比值可以表示为:lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)实验证明:营养成分为破坏的反应的活化能E的值为E,=—*103J/mol;而菌体死亡的活化能E芽孢:E=418*103J/mol。

    维持15-20分钟,可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的**,如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。(二)下向主要介绍高压蒸气**器**效果的验证方法高压蒸气**器使物品**后达到无菌要求,这是**实验中的基本保证。高压**器**效果是否合格足实验成败的**基础**关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解,不需高压**外,大部分培养基均需121℃高压**15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基**不彻底,直接关系到对**的无菌试验结果。因此必须认真对高压**器进行**效果的验证。为此我们提供了进行**效果验证的一个简易可行的方法。1.试验材料(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌,含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃压力蒸气**化学指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压**20分钟后备用。(4)O—150℃留点温度计。2.方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片(以下简称菌片)用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压**器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如**器为二层,则需放10处。F12培养基常用于神经细胞和其他敏感细胞系。

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    三)、试验结果:初代培养:使用本发明的消毒方法,消毒成功率能达到80%,诱导培养基萌芽率能达到90%,可以成功建立无菌再生体系。继代培养:使用本发明的增殖培养基,绣球组培苗增殖倍率能够达到8~10倍,组培苗高度一致,生长健壮。生根培养:使用本发明的生根培养基,绣球组培苗生根率能够达到95%,根系发达,健壮,可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基,其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有:6-ba—6-苄氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例,并非依此限制本发明的保护范围,故:凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化,均应涵盖于本发明的保护范围之内。使用减血清培养基能减少实验中的血清干扰。广东Ham's F12培养基报价

无血清培养基确保了实验结果的纯净性。广东Ham's F12培养基报价

    无芽孢:E=209—250*103J/mol。显然,(5)式的比值〉1,说明提高温度对于第二个平行反应,即菌体死亡的反应是有利的。提高温度,虽然两个平行性反应的反应速度常数都提高了,但是,达到同样的**效果,所需要的时间却缩短了,由于***个反应也就是营养成分破坏的反应速度常速增加的少,因此,有利于减少培养基在**过程中营养成分的破坏。换言之,高温短时**对于培养基营养成分是有利的。通常所说的高温短时**可以提高生产效益,其理论根据就在于此。结论1:当**温度上升时,微生物杀死速率的提高要超过培养基成分的破坏速率的增加。要减少营养成分的破坏,可升高温度**。结论2:在**时选择较高的温度、较短的时间,这样便既可达到需要的**程度,同时又可减少营养物质的损失。(二)、影响**效果的因素(1)微生物种类:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不变的前提下,t与初始菌量N0的对数成正比。(3)培养基成份:油脂、蛋白质增加微生物的耐热性。(4)传热与混合状况:影响受热均匀度。(5)培养基中固体颗粒的存在影响热穿透。(6)蒸汽中空气的存在降低蒸汽分压和**温度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物热死速率三、培养基的工业**。广东Ham's F12培养基报价

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