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生化实验中加入缓冲液的目的和作用生物缓冲液是一种能够保持pH值不受酸碱度影响的溶液，多种细胞只能在很小的PH范围内活动，需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。尤其是在生化实验中，生物缓冲液极其受重视，因为实验中的各类物质非常容易使PH发生变化，而这就直接影响到整体工作进程。例如在酶活性实验中，有时因为PH的变化大，会使酶活性下降甚至失活，导致实验无法进行下去，所以在生化实验中加入缓冲液的主要目的就是维持PH的稳定。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞中是不同的.山东缓冲液供应商家

做ELISA确定抗原**佳包被浓度，做方阵滴定具体怎么做呢？选择好一份已知为阳性和阴性背景的标本，将你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8个条件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔，**优包被条件需进行试验选择）4度过夜取出后甩干，加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h热封，甩去后拍干即可。将你HRP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行稀释（倍比稀释4个梯度）即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定**佳P/N的包被搭配E的试验2．抗原和抗体**佳工作浓度的确定?抗原抗体反应要求在**适比例条件下进行，ELISA反应试剂多，其工作浓度不同对结果影响较大，因此必须对包被抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)进行**佳工作浓度的滴定和选择，以达到**佳的测定条件。?1）方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度用包被液将抗原作一系列稀释。山东缓冲液供应商家生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统。

    磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常***，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液，配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1-5；碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9-12；中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在。通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度，而不是钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度。正是因为如此，在配制中性缓冲液时，用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影响磷酸根离子的浓度，所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度，但是缓冲液中的钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度已经发生变化。

假设缓冲溶液里含有弱酸HA以及它的共轭碱。在溶液里发生的质子反应为：水合氢离子的浓度取决于弱酸与其共轭碱的浓度比。当加入少量强碱时，酸被中和，导致了氢氧根离子在溶液中很少累积，从而的浓度增加，的浓度减少。可以看到，虽然加入了强碱，但是溶液里的氢氧根离子变化很少，同时， 浓度较大，相对的变化小，两者比值几乎无变化，因此根据公式，水合氢离子的浓度变化很小。加入弱酸则是同样的道理。由于在 大浓度基数上的微小变化不会改变比值，也因此维持了体系内氢离子和氢氧根离子浓度的平衡。 [1]缓冲液（Buffer solution）通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液。

pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液，然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液（PhosphateBufferSaline），是生物学实验室**常用的缓冲液之一。其主要成分包括：氯化钠（NaCl）、氯化钾（KCl）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）和磷酸二氢钾（KH2PO4）。配制步骤：清洗干净所需烧杯、转子和量筒，向一个烧杯装少量去离子水（约100ml）并放入一个转子后放在称量天平旁备用；向另一个烧杯装约800ml去离子水并在微波炉或者水浴锅（65°以上均可）中加热。注意：由于实验室所购买的Na2HPO4常常带有二水、七水或者十二水，与之对应的重量分别为1.78g、2.68g、3.58g。向烧杯中加入预热的去离子水，烧杯放置在磁力搅拌器上搅拌溶解。用量筒定容到1L，保存备用。取100ml10X的PBS母液，加入900ml去离子水即可获得pH=7.4的PBS缓冲液（无需用pH计校准PH值）。在生化研究工作中,常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度.山东缓冲液供应商家

多种细胞只能在很小的PH范围内活动，需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。山东缓冲液供应商家

HBSS 与 EBSSHanks 的平衡盐溶液（HBSS）和 Earle 的平衡盐溶液（EBSS）都是等渗溶液，用于维持生物应用中的渗透压和 pH 值。虽然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氢钠，用于短期维持生长培养基以外的细胞，但 EBSS 在 5% CO2 下使用，而 HBSS 包含较少的碳酸氢钠，可以在没有 CO2 的情况下使用。从各种依应用而定的配方中进行选择。

Dulbecco 的磷酸盐缓冲液（DPBS）DPBS 与 PBS 的不同之处在于它还包括氯化钾，并且提供多种配方。它也用于生物应用，水基缓冲液，包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。 山东缓冲液供应商家