放入 PCR 仪：将配置好的反应管放入基因扩增仪 PCR 仪中，按照设定的程序进行扩增反应。设置扩增程序：一般包括预变性、变性、退火、延伸和终延伸等步骤。预变性步骤通常在 94℃-95℃下进行 5-10 分钟，使 DNA 双链充分解开；变性温度一般为 94℃-95℃，时间为 30-60 秒，使模板 DNA 双链解链；退火温度根据引物的 Tm 值确定，一般在 50℃-65℃之间，时间为 30-60 秒，使引物与模板 DNA 特异性结合；延伸温度通常为 72℃，时间根据扩增片段长度而定，一般为 1-2 分钟 /kb；终延伸步骤在 72℃下进行 5-10 分钟，确保所有扩增产物延伸完整。循环次数一般为 30-40 次。升温至 72℃左右，DNA 聚合酶（如 Taq 酶）以引物为起点，沿单链模板合成互补的 DNA 链。定量基因扩增仪PCR仪微量检测
启动反应与结果分析确认参数无误后，启动 qPCR 程序，仪器自动运行并实时显示荧光曲线。反应结束后，通过软件查看结果：定量结果：根据标准曲线计算未知样本的初始模板浓度（定量），或通过 ΔΔCt 法分析相对表达量（相对定量）。溶解曲线：若出现单一尖锐峰，说明扩增特异性良好；若有杂峰，需排查引物或反应条件问题。 污染防控（重点）核酸污染：严格分区操作：将试剂配制区、样本处理区、PCR 扩增区分开，避免交叉污染。使用滤芯吸头，每次加样后更换吸头，避免移液器接触样本或试剂瓶口。定期用 10% 次氯酸钠或 DNA 酶清洁实验台面、移液器和仪器样品槽，紫外灯照射消毒操作区（30 分钟以上）。试剂污染：试剂分装保存（避免反复冻融），阴性对照（无模板）和空白对照（无菌水）必须设置，以监测是否污染。基因扩增仪PCR仪型号双槽基因扩增仪 PCR 仪支持双样本并行扩增，大幅提升检测效率，适配中等批量基因检测需求。
微量检测：PCR 仪具有强大的信号放大能力，能够将样本中极其微量的转基因 DNA 模板进行大量扩增。即使样本中*含有少量的转基因成分，经过多轮的 PCR 循环，也能使目标基因片段的数量呈指数级增长，达到可检测的水平。通常可以检测到样本中低至 pg 级甚至 fg 级的转基因 DNA，能够满足对各种复杂基质中微量转基因成分的检测需求。早期监测：这种高灵敏度使得 PCR 仪能够在转基因成分含量极低的早期阶段就进行有效检测，对于及时发现和监控转基因生物的扩散、污染等情况具有重要意义，有助于采取相应的措施进行防控和管理。
温度与反应体系控制温度准确性：定期校准仪器（由专业人员进行），确保变性、退火温度精细（偏差超过 ±0.5℃会影响结果）。体系一致性：加样时确保各孔反应体积一致（误差≤1μL），避免因体积差异导致 Ct 值偏差。避免气泡：加样后若有气泡，需轻轻敲击板壁或离心去除，否则气泡会干扰荧光信号采集。3. 试剂与样本处理酶的保存：qPCR Mix 需 - 20℃冷冻保存，使用时冰上融化，轻轻混匀（勿震荡，防止酶变性）。模板质量：避免模板中含 EDTA、SDS 等抑制剂，若样本浓度过低，可适当增加模板量（但需注意体积占比，避免影响反应体系）。传统 PCR 仪结构相对简单，价格较低，适合基础实验室的常规扩增需求。
梯度 PCR 仪是一种具备多温度梯度功能的聚合酶链式反应仪器，其**优势在于可在同一反应板上设置不同的温度梯度（如横向或纵向温度梯度），允许用户同时优化多个退火温度或其他循环参数，***提升实验效率。这类仪器广泛应用于引物优化、条件摸索和复杂扩增反应，是科研与方法开发的关键工具。. 温度梯度功能实现方式：通过半导体加热模块或金属导热板的分区控温，在反应板的不同孔位间形成线性温度梯度（如 30℃~70℃，梯度范围可达 40℃）。例：横向梯度模式下，第 1 列孔为 50℃，第 12 列孔为 60℃，中间列按 0.5℃/ 列递增，一次性测试 12 个不同退火温度。优势：无需重复实验即可筛选比较好温度，减少试剂消耗和时间成本。单通道支持一种荧光染料检测，多通道（如 4 通道、5 通道）可同时检测多种荧光标记，适用于多重定量分析。基因扩增仪PCR仪型号
传统 PCR 仪：主要用于定性 PCR 反应，通过设定变性、退火、延伸三个温度步骤的循环，实现 DNA 扩增。定量基因扩增仪PCR仪微量检测
PCR 仪的维护与注意事项：日常维护：定期清洁反应模块，去除残留试剂（如矿物油、PCR 产物），避免污染。校准温度：使用标准温度计验证控温精度，每年至少 1 次。操作注意：配置反应体系时需在冰上进行，防止引物或酶提前活化。避免频繁开关仪器，减少温控模块损耗。实验后及时进行模块消毒（如用 75% 乙醇擦拭），防止交叉污染。PCR 仪的发展趋势：便携化与集成化：微流控芯片 PCR 仪将反应体系微型化，可实现 “样本进 - 结果出” 的即时检测（如 POCT 设备）。高通量与自动化：结合机器人工作站，实现从样本提取到 PCR 扩增的全流程自动化，适用于大规模筛查。多功能整合：如与测序仪联用，实现 “扩增 - 测序” 一体化，缩短基因分析周期。定量基因扩增仪PCR仪微量检测
