EndoS糖苷内切酶S在抗体药物偶联物(ADCs)研究中的应用主要体现在糖链定点偶联技术上。通过上海药物所的研究,开发了一种新颖的糖链定点ADC制备策略,利用EndoS2这种糖苷内切酶,可以将小分子细胞毒药物“一步”定点连接到抗体的糖基化位点,实现了糖链定点ADC化合物的制备。定点偶联技术相比传统的随机偶联具有更好的方法指数,能够提高ADC的均一性和稳定性,是当前ADC领域的研究热点之一。在抗体的Fc结构域N297位,这是一个保守的糖基化位点,通过在该位点引入细胞物质,可以形成具有优势的糖链定点ADC化合物(glycosite-specificADCs,gsADCs)。此外,EndoS2对多样化的LacNAc修饰显示出良好的兼容性,能够高效获得功能修饰的糖工程抗体,并且可以用于抗体的内吞成像研究及糖链延伸等功能化研究。研究人员通过这种“一步”制备策略得到的糖链定点ADC化合物,在结构均一性、亲水性、体外稳定性以及体外活性方面表现良好,并且在体内瘤抑制活性方面,相比阳性对照ADC化合物,在低载药量的情况下具有更强的抑制效果。EndoS酶的这些应用,不仅展示了其在简化ADC制备流程中的潜力,还有助于推动定点ADC药物的深入发展,为未来的生物药物开发提供了新的思路和方法。牛痘DNA拓扑异构酶I是TOPO克隆技术的关键组分,该技术允许快速、简便地将PCR产物克隆到质粒载体中。Recombinant Mouse CLEC7A Protein,hFc Tag
EndoS糖苷内切酶在ADCs制备中的具体应用步骤,根据上海药物研究所的研究,可以概括为以下几个关键环节:1.**筛选糖底物和糖苷内切酶**:研究人员筛选了一系列糖底物和糖苷内切酶,发现Endo-S2酶能够将二糖底物LacNAc转移至去糖抗体N297位糖基化位点,且LacNAc半乳糖6号位唾液酸化修饰不影响Endo-S2的转糖基化活性。2.**抗体糖基化改造**:利用Endo-S2和LacNAc的组合,直接实现野生型抗体的糖基化改造。Endo-S2对多样化LacNAc修饰的兼容性,可以高效获得功能修饰的糖工程抗体。3.**设计合成药物-连接子复合物**:研究人员设计并合成了LacNAc-linker-drug复合物结构,这是实现定点ADC化合物“一步”组装的关键。4.**“一步”定点偶联**:通过Endo-S2的催化作用,将小分子细胞毒药物通过特定的糖链结构直接定点连接到抗体的糖基化位点,简化了ADCs的制备流程。5.**评价和测试**:对获得的糖链定点ADC化合物进行结构均一性、亲水性、体外稳定性及体外活性的测试。测试结果显示,这些化合物具有非常好的结构均一性(DAR=2)、亲水性和体外稳定性,并且在体外具有强大的瘤抑制活性。
11A型肺炎多糖鼠单抗在疫苗研发中主要扮演的角色是作为特异性的识别分子,它可以识别并结合到肺炎链球菌11A型的多糖抗原上。这种单抗的引入,有助于提高疫苗的免疫效果,具体体现在以下几个方面:1.**免疫应答**:通过将肺炎多糖与蛋白载体(如乙肝表面蛋白)偶联,可以提高疫苗的免疫原性,使得接种疫苗的个体能够产生更高水平的抗体和免疫记忆。2.**改善疫苗效力**:11A型肺炎多糖鼠单抗的制备,可以用于定量检测33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,这对于疫苗的质量控制和效力评估至关重要。3.**促进多糖蛋白结合疫苗的开发**:利用单克隆抗体技术,可以开发出新型的肺炎多糖结合蛋白载体疫苗,这种疫苗能够激发更好的免疫反应,尤其是提高对抵抗力低下人群(如老人、化疗患者及2岁以下婴儿)的保护效果。4.**提高疫苗的特异性和亲和力**:11A型肺炎多糖鼠单抗由于其高度的特异性,可以更精确地靶向肺炎链球菌的11A型多糖,从而提高疫苗的预防效果。5.**疫苗质量控制**:单克隆抗体可用于疫苗生产过程中的抗原含量测定,确保疫苗的质量和效力,这对于疫苗研发和生产过程中的质量控制至关重要。
酵母重组表达的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一种酰胺水解酶,具有以下特点:1.**高效性**:PNGaseF是去除几乎所有N-连接寡糖从糖蛋白中有效的酶法方法。它能够在几分钟内快速且无偏倚地释放所有的N-糖链,适合后续的色谱或质谱分析。2.**重组酶**:该酶是重组的酰胺酶,能够从高甘露糖、杂合和复杂寡糖中切割内GlcNAc和天冬氨酸残基之间的连接。3.**纯度**:纯度达到95%以上,通过SDS-PAGE和完整ESI-MS进行确定。4.**储存稳定性**:在含有50%甘油的储存缓冲液中,好的活性和稳定性可维持长达24个月。5.**使用条件**:可以在原生或变性条件下使用,对于变性条件下的去糖基化,建议添加NP-40以解除SDS的抑制作用。6.**比活性**:具有高达100000U/mL的比活性。7.**His标签**:产品带有His标签,常用于抗体及其相关蛋白的完全去糖基化。8.储存条件:-25~-15℃保存,有效期1年。9.**无甘油版本**:还提供了无甘油版本的PNGaseF,这有助于在HPLC和质谱分析中获得结果。10.**酶活定义**:1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。这些特点使得酵母重组表达的PNGaseF成为研究和分析糖蛋白糖链结构的重要工具。泛素蛋白的C末端通常通过酰胺键与靶蛋白的氨基团连接在一起,最常见的是与靶蛋白赖氨酸的ε氨基团相连。
重组人血清白蛋白(rHSA)是一种重要的蛋白质,广泛应用于生物医学领域。植物表达的细胞培养级重组人血清白蛋白(rHSA)具有多项特点和科研应用价值:1.**高纯度和安全性**:植物源重组人血清白蛋白(rHSA)通过基因工程技术在植物如水稻中表达,避免了动物源成分和血源性的病毒污染的风险,提供了一种更安全、更纯净的蛋白质来源。2.**批次稳定性**:与来源于动物的血清白蛋白相比,植物表达的rHSA提供了更高的批次间一致性和稳定性,这对于科研和工业应用中的重复性和可靠性至关重要。3.**多功能性**:rHSA在细胞培养中可以作为重要的添加成分,有助于细胞生长和维持培养环境的稳定性。它还可以作为药物载体,疫苗保护剂、细胞冻存保护剂和医疗器械包埋剂等。4.**生物相容性**:由于rHSA的化学性质与天然HSA非常接近,它在生物医药生产中具有很高的生物相容性,可以用于多种药物的配方和医疗设备。5.**科研应用**:rHSA在科研中可用于细胞培养、药物载体研究、疫苗开发、组织工程和再生医学等领域。6.**生产规模**:植物表达系统具有大规模生产重组蛋白的潜力,这对于满足全球对rHSA日益增长的需求至关重要。多泛素化的靶蛋白被26S蛋白酶体识别。26S蛋白酶体由一个20S颗粒和两个19S调节颗粒组成。Recombinant Mouse SEZ6L2 Protein,His Tag
Pfu DNA Polymerase的热稳定性和保真性使其在优化PCR条件时更为灵活,比如在GC含量较高的模板中。Recombinant Mouse CLEC7A Protein,hFc Tag
重组增强型绿色荧光蛋白(RecombinantEnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP)是一种用于生物科学研究的工具。以下是重组EGFP的一些特点和应用:1.**高荧光强度**:EGFP比野生型GFP具有更强的荧光,这使得它在成像和检测时更为敏感和有效。2.**改进的折叠效率**:EGFP在生理温度(如37℃)下的折叠效率更高,这有助于在细胞内快速形成成熟的荧光蛋白。3.**单一激发峰**:与野生型GFP相比,EGFP具有单一的激发峰,这简化了成像条件的设置,并提高了信号的稳定性。4.**适合多种生物系统**:EGFP可以用于多种生物系统,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞。5.**多功能性**:EGFP可以作为报告基因用于基因表达分析,也可以作为融合标签用于蛋白质定位和动态研究。6.**非糖基化**:在大肠杆菌中表达的重组EGFP是非糖基化的,这有助于减少翻译后修饰的复杂性。7.**纯度高**:重组EGFP通常具有高纯度,适合用于各种生物化学和分子生物学实验。8.**稳定性**:EGFP的荧光稳定性好,适合长时间观察和成像。9.**分子量**:重组EGFP的分子量约为26.9kDa,由239个氨基酸构成。Recombinant Mouse CLEC7A Protein,hFc Tag
Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一种从嗜热脂肪芽孢杆菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是关于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些关键信息:来源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更强的5'-3' DNA聚合酶活性、链置换活性和dUTP耐受性,适合用于抗污染的等温扩增反应,如LAMP和CPA等。应用:主要应用于等温DNA扩增,包括环介导等温扩增(LAMP)和其他等温扩增技术。规格:活性定义:1 U指的是在65°C下3...