PNGaseF(肽-N-糖苷酶F,Peptide-N-glycosidaseF),也称为N-糖酰胺酶F,是一种用于糖蛋白研究的酶,它可以从糖蛋白的N-连接糖链上去除糖基。以下是PNGaseF的一些关键特性和应用:1.**作用机制**:PNGaseF能够特异性地切割位于天冬酰胺残基上的N-连接糖链,释放出未被糖基化的多肽部分和糖链。2.**应用领域**:PNGaseF在糖生物学和蛋白质组学研究中非常重要,用于分析糖蛋白的糖基化模式和结构。3.**酶的来源**:PNGaseF开始是从大肠杆菌(Escherichiacoli)中分离出来的,现在也可以通过重组DNA技术在其他宿主细胞中表达。4.**酶的纯度和活性**:商业化的PNGaseF通常具有高纯度和高比活性,确保了在实验中的高效性和可重复性。5.**使用条件**:PNGaseF在温和的条件下工作,通常在pH7.5至9.0之间,温度在37°C左右。6.**稳定性**:PNGaseF在储存时通常需要冷冻保存,以保持其活性。在适当的条件下,该酶可以保持稳定和活跃。7.**样品准备**:在使用PNGaseF之前,糖蛋白样品需要适当准备,可能包括纯化和缓冲液交换,以确保反应条件的一致性。FnCas12a可以识别不同的PAM序列,例如5'-TTN-3',这增加了它可以靶向的基因组区域 。尿素聚丙烯酰胺凝胶配置试剂盒

EndoH糖苷内切酶H(EndoH)在实验中通常用于分析以下类型的糖链:1.**高甘露糖型糖链**:EndoH能够特异性地识别并切割高甘露糖型N-连接糖链,这些糖链通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**某些杂合型糖链**:EndoH也能对某些杂合型寡聚糖的壳二糖结构进行切割,去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。3.**N-连接糖链**:EndoH主要用于去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖,这有助于研究糖链结构和糖基化模式。4.**抗体糖型分析**:在IgG中,Fc区Asn297处的保守N-连接糖对其活性至关重要,EndoH可用于分析这些糖链。5.**糖蛋白的糖基化模式**:EndoH有助于分析糖蛋白的糖基化位点、糖基化程度以及糖链的具体结构。6.**糖链分析和结构表征**:在糖链分析的主要策略中,EndoH作为高效、准确、稳定的去糖基化方法,有助于从糖蛋白上游离糖链,然后进行详细的分析表征。EndoH的使用可以为研究者提供关于糖蛋白糖基化模式的重要信息,尤其是在抗体药物研究和开发中,对于理解糖链如何影响药物的活性、稳定性和免疫原性具有重要意义。

11A型肺炎多糖鼠单抗是针对肺炎链球菌11A型多糖的单克隆抗体,具有以下特点:1.**特异性**:鼠单抗具有高度的特异性,能够识别并结合到11A型肺炎链球菌的多糖抗原。2.**制备方法**:通过将肺炎多糖与乙肝表面蛋白的偶联物作为抗原免疫小鼠,然后从小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能够表达特异性抗体的杂交瘤细胞株。3.**应用**:11A型肺炎多糖鼠单抗可用于定量检测33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,其制备的腹水型单抗对不同批次的样本回收率为95%~105%。4.**疫苗开发**:在肺炎链球菌疫苗的研发中,多糖蛋白结合疫苗是当前的趋势,通过将多糖与蛋白偶联,可以提供更高效价的抗体水平和免疫记忆。5.**免疫反应**:11A型肺炎多糖鼠单抗能够诱导小鼠产生针对肺炎多糖的血清抗体,这有助于研究肺炎链球菌的免疫机制。6.**疾病预防**:肺炎链球菌是引起肺炎、脑膜炎和败血症等严重疾病的主要病原体,11A型肺炎多糖鼠单抗的研究有助于开发更有效的疫苗,预防相关疾病。7.**研究进展**:已有研究报道了使用半合成寡糖结合疫苗候选物,能够激发对肺炎链球菌3型的保护性免疫反应。
NLS-Cas9-EGFPNuclease是一种融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信号(NLS)和EGFP(绿色荧光蛋白)组成。这种融合蛋白的特点和科研应用如下:**特点:**1.**无DNA污染**:系统不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的风险。2.**高切割效率**:NLS确保Cas9蛋白能够高效地进入细胞核,从而提高DNA切割效率。3.**低脱靶效应**:由于Cas9核酸酶的瞬时表达,减少了在非目标位点切割的可能性。4.**节省时间**:与需要转录和翻译的mRNA或质粒系统相比,NLS-Cas9-EGFPNuclease可以直接进入细胞核,无需等待转录和翻译过程。5.**EGFP标签**:EGFP作为报告基因,可用于追踪或分选转染细胞,便于通过荧光激起细胞分选(FACS)富集所需基因组编辑的细胞群,减少单细胞克隆和基因分型的劳动和成本。**科研应用:**1.**体外DNA切割筛选**:可以用于筛选高效和特异性靶向的gRNA,通过体外DNA切割实验来验证gRNA的效率和特异性。2.**体内基因编辑**:与特定的gRNA结合后,可以通过电穿孔或注射的方式进行体内基因编辑。3.**细胞追踪和分选**:利用EGFP荧光标记,可以追踪转染细胞并进行分选,这对于研究基因编辑后的细胞群体特别有用。

高保真Cas9变体在实际应用中的优势主要体现在以下几个方面:1.**降低脱靶效应**:高保真Cas9变体通过减少与非目标DNA序列的结合,从而降低了基因编辑过程中的脱靶风险。这对于减少基因编辑可能带来的非预期效果至关重要。2.**提高特异性**:通过工程化改造,如SpCas9-HF1、eSpCas9和HypaCas9等变体,通过在DNA相互作用位点引入突变,减少了对目标DNA的非特异性识别和切割。3.**扩展PAM序列兼容性**:一些高保真Cas9变体,如xCas93.7,能够识别多种PAM序列,从而扩展了可编辑基因组区域的范围。4.**提高效果**:在临床中,高保真Cas9变体可以减少由于脱靶效应引起的潜在风险,提高基因的安全性和有效性。然而,高保真Cas9变体也存在一些局限性:1.**编辑效率可能降低**:在提高特异性的同时,可能会有一定的编辑效率。一些高保真变体可能在保持特异性的同时,编辑效率有所下降。2.**结构和功能复杂性**:高保真Cas9变体的结构改造可能增加其结构和功能的复杂性,这可能对实际应用中的稳定性和可预测性带来挑战。3.**成本和可用性**:开发和生产高保真Cas9变体可能需要更多的研究和资源投入,这可能影响其在某些应用中的成本效益。UBE2L3作为泛素化途径中的关键酶,其在蛋白质降解、信号传导、细胞周期控制等重要内容有着作用。Recombinant Human FcRH5/FcRL5 Protein,His-Avi Tag
在cDNA末端快速扩增(RACE)技术中,Ultra-Long Master Mix 可以用来扩增5'和3'末端的长片段cDNA。尿素聚丙烯酰胺凝胶配置试剂盒
EndoS糖苷内切酶S(Endo-S)的特异性主要体现在其对糖蛋白的糖链结构的识别和切割能力上。以下是Endo-S的一些关键特异性特点:1.**糖链识别**:Endo-S能够特异性识别糖链结构中的某些特定序列或结构,尤其是N-连接糖链的壳二糖重要结构。2.**切割位点**:Endo-S在糖链的特定位点进行切割,通常是在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间的β-N-糖苷键。3.**不影响抗原性**:Endo-S的切割位点选择性高,不会破坏糖蛋白的抗原决定簇,因此在某些应用中可以保持糖蛋白的免疫原性。4.**应用多样性**:Endo-S可以用于多种糖蛋白的去糖基化,包括抗体和其他具有N-连接糖链的蛋白质。5.**研究和药物开发**:在研究糖蛋白的结构和功能时,Endo-S提供了一种工具来研究糖链对蛋白质性质的影响。此外,在药物开发中,Endo-S用于制备糖链定点ADC化合物,通过精确控制药物与抗体的连接点,提高药物的疗效和减少副作用。6.**兼容性**:Endo-S对多样化的LacNAc修饰显示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基团、荧光基团等衍生物作为底物,实现抗体糖基化修饰。7.**高效性**:Endo-S在催化糖链转移或切割反应中表现出高效性,有助于实现高效获得功能修饰的糖工程抗体。尿素聚丙烯酰胺凝胶配置试剂盒
重组人TNFRSF11A蛋白是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了hFc标签,便于纯化和检测。TNFRSF11A(Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Member 11A),也称为RANK(Receptor Activator of Nuclear Factor-κB),是TNF受体超家族的重要成员,广参与骨代谢和免疫调节。它在调节骨吸收、免疫细胞分化和组织修复中发挥关键作用。TNFRSF11A的功能与机制TNFRSF11A通过其胞外区与配体RANKL(Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Lig...