重组人血清白蛋白(rHSA)是通过植物表达系统生产的细胞培养级产品,在科研领域有着广泛的应用。以下是rHSA在科研中的一些主要应用:1.**细胞培养**:rHSA是细胞培养中的重要成分,它可以作为血清替代品,促进细胞生长和维持细胞培养环境的稳定性。由于其无动物源成分,可以减少血清中可能存在的病毒污染风险,适用于需要高生物安全性的细胞培养研究。2.**药物载体**:rHSA因其良好的生物相容性和药物结合能力,被用作药物载体,有助于提高药物的稳定性、延长药物的半衰期,并可能改善药物的靶向性。3.**疫苗保护剂**:在疫苗开发中,rHSA可以用作保护剂,有助于提高疫苗的稳定性和有效性。4.**细胞冻存保护剂**:rHSA在细胞冻存过程中起到保护作用,有助于提高细胞复苏后的存活率。5.**医疗器械包埋剂**:在医疗器械领域,rHSA可以作为包埋剂,用于药物洗脱支架或其他植入式医疗设备。6.**生物制药**:rHSA在生物制药生产中作为稳定剂和保护剂,有助于提高蛋白质药物的稳定性和疗效。7.**基因**:在基因领域,rHSA可能被用作基因载体,帮助基因传递至目标细胞。8.**化妆品添加剂**:在化妆品行业,rHSA可能因其保湿和修复特性而被用作添加剂。E1通常被认为是泛素化过程中的限速步骤,因为它涉及到泛素的激起和ATP的水解。Recombinant Mouse PD-L2/B7-DC Protein,His Tag

N末端His标签的泛素蛋白(RecombinantHumanUbiquitinProteinTagged-HisTag,UB)是一种经过遗传工程改造,在其N末端融合了His标签的泛素蛋白。以下是这种蛋白的一些特点:1.**His标签**:N末端His标签是一种常见的融合标签,用于提高蛋白质的可溶性和便于通过亲和层析进行纯化。His标签通常由6到10个组氨酸(His)组成。2.**重组表达**:这种泛素蛋白通常在大肠杆菌(E.coli)或其他宿主细胞中通过重组DNA技术表达。3.**高度保守**:泛素蛋白是一个76个氨基酸残基的多肽,在真核生物中高度保守。4.**分子量**:由于N末端添加了His标签,重组泛素蛋白的分子量会略大于天然泛素(约8.5kDa)。5.**纯度**:重组泛素蛋白通常具有高纯度(>95%bySDS-PAGE),适合用于各种生物化学和分子生物学实验。6.**溶解性**:His标签的添加可以提高蛋白质在水溶液中的溶解性,便于实验操作。7.**稳定性**:冻干粉形式的重组泛素蛋白在-25~-15℃保存,具有较长的有效期,通常为一年。8.**应用广**:N末端His标签的泛素蛋白可用于多种实验,包括蛋白质泛素化、E3泛素连接酶活性测定、蛋白质相互作用研究等。Recombinant Human DcR1/TRAILR3 Protein,His TagUBE2L3与其他E2酶的区别在于它具有特定的结构特征,它包含一个高度保守的UBC结构域,这是E2酶家族的标志。

使用PreScissionProtease进行蛋白质切割时,为保证高纯度和高活性,需要考虑以下关键因素:1.**特异性切割位点**:确保融合蛋白中包含PreScissionProtease特异性识别的序列,以实现精确切割。2.**酶与底物的比例**:适当比例的酶量对于高效切割至关重要,过多或过少的酶都可能影响切割效率和纯度。3.**反应条件**:包括温度、pH和反应时间等,这些条件需要优化以确保酶的活性和选择性。通常,PreScissionProtease在4°C下进行酶切。4.**缓冲液兼容性**:使用与PreScissionProtease兼容的缓冲液,避免使用可能抑制酶活性的离子或化学物质。5.**蛋白浓度**:确保融合蛋白有足够的浓度,以提高切割效率和减少样品损失。6.**酶切后的分离**:切割后,需要有效分离目的蛋白和切割下来的标签,通常利用亲和层析等方法。7.**避免蛋白降解**:在实验过程中添加蛋白酶抑制剂,以防止蛋白降解酶对目的蛋白的降解。8.**避免蛋白质聚集**:在切割过程中,应避免条件导致蛋白质聚集或沉淀,这可能会影响纯度和活性。9.**避免氧化**:在蛋白质处理过程中,添加抗氧化剂如DTT或TCEP,以防止半胱氨酸残基的氧化。10.**清洁的实验环境**:确保实验器材和环境的清洁,避免微生物污染和核酸污染。
SpCas9蛋白(来自化脓性链球菌的Cas9蛋白)在基因编辑中的主要作用是作为核酸酶,能够精确地切割目标DNA序列。以下是SpCas9在基因编辑中的几个关键步骤和作用:1.**识别和结合**:SpCas9蛋白与一个单导向RNA(sgRNA)结合,形成RNP复合物。这个复合物能够识别并结合到基因组中与sgRNA互补的特定DNA序列。2.**PAM序列识别**:SpCas9需要一个称为原间隔子相邻基序(PAM)的特定序列作为识别目标DNA的先决条件。对于SpCas9,这个PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**:一旦RNP复合物与目标DNA结合,SpCas9就会在PAM序列的3个碱基对的上游位置切割DNA双链,产生一个双链断裂(DSB)。4.**引发DNA修复**:DNA双链断裂触发细胞的DNA修复机制,包括同源定向修复(HDR)和非同源末端连接(NHEJ)。研究人员可以利用这些修复机制来插入、删除或替换特定的DNA序列。5.**基因修改**:通过HDR,可以在断裂的DNA两端引入特定的DNA模板,从而实现精确的基因编辑。而NHEJ通常会导致小的插入或缺失(indel),这可以用来产生基因的敲除或敲入。6.**提高编辑效率**:为了提高SpCas9的编辑效率,研究人员可能会使用优化的sgRNA设计、蛋白质工程或嵌合融合蛋白等策略。

EndoS糖苷内切酶在ADCs制备中的具体应用步骤,根据上海药物研究所的研究,可以概括为以下几个关键环节:1.**筛选糖底物和糖苷内切酶**:研究人员筛选了一系列糖底物和糖苷内切酶,发现Endo-S2酶能够将二糖底物LacNAc转移至去糖抗体N297位糖基化位点,且LacNAc半乳糖6号位唾液酸化修饰不影响Endo-S2的转糖基化活性。2.**抗体糖基化改造**:利用Endo-S2和LacNAc的组合,直接实现野生型抗体的糖基化改造。Endo-S2对多样化LacNAc修饰的兼容性,可以高效获得功能修饰的糖工程抗体。3.**设计合成药物-连接子复合物**:研究人员设计并合成了LacNAc-linker-drug复合物结构,这是实现定点ADC化合物“一步”组装的关键。4.**“一步”定点偶联**:通过Endo-S2的催化作用,将小分子细胞毒药物通过特定的糖链结构直接定点连接到抗体的糖基化位点,简化了ADCs的制备流程。5.**评价和测试**:对获得的糖链定点ADC化合物进行结构均一性、亲水性、体外稳定性及体外活性的测试。测试结果显示,这些化合物具有非常好的结构均一性(DAR=2)、亲水性和体外稳定性,并且在体外具有强大的瘤抑制活性。
FnCas12a在切割DNA时产生黏性末端,有助于提高同源定向修复(HDR)的效率。Recombinant Mouse PD-L2/B7-DC Protein,His Tag
11A型肺炎多糖鼠单抗在疫苗研发中主要扮演的角色是作为特异性的识别分子,它可以识别并结合到肺炎链球菌11A型的多糖抗原上。这种单抗的引入,有助于提高疫苗的免疫效果,具体体现在以下几个方面:1.**免疫应答**:通过将肺炎多糖与蛋白载体(如乙肝表面蛋白)偶联,可以提高疫苗的免疫原性,使得接种疫苗的个体能够产生更高水平的抗体和免疫记忆。2.**改善疫苗效力**:11A型肺炎多糖鼠单抗的制备,可以用于定量检测33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,这对于疫苗的质量控制和效力评估至关重要。3.**促进多糖蛋白结合疫苗的开发**:利用单克隆抗体技术,可以开发出新型的肺炎多糖结合蛋白载体疫苗,这种疫苗能够激发更好的免疫反应,尤其是提高对抵抗力低下人群(如老人、化疗患者及2岁以下婴儿)的保护效果。4.**提高疫苗的特异性和亲和力**:11A型肺炎多糖鼠单抗由于其高度的特异性,可以更精确地靶向肺炎链球菌的11A型多糖,从而提高疫苗的预防效果。5.**疫苗质量控制**:单克隆抗体可用于疫苗生产过程中的抗原含量测定,确保疫苗的质量和效力,这对于疫苗研发和生产过程中的质量控制至关重要。Recombinant Mouse PD-L2/B7-DC Protein,His Tag
重组人TGM2蛋白(His Tag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。TGM2(组织转谷氨酰胺酶2)是一种多功能酶,广参与细胞外基质的交联、细胞黏附、信号转导和细胞凋亡等生物学过程,在组织修复、炎症反应和瘤发生中发挥重要作用。TGM2的功能与机制TGM2是一种钙依赖性酶,能够催化蛋白质或多肽中的谷氨酰胺残基与赖氨酸残基之间的交联反应,形成共价键。这种交联作用对于细胞外基质的稳定性和细胞黏附至关重要。此外,TGM2还参与细胞内信号转导,通过与多种细胞表面受体(如整合素)相互作用,调节细胞的迁移、增殖和凋亡。在病理状态下,TGM2的异常表达与多种疾病相关,如纤...