Recombinant Human Siglec-9 Protein

PreScissionProtease（PSP）是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶（humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease）和GST组成的融合蛋白。它具有以下特点：1.**特异性识别**：PreScissionProtease能在低温下（4°C）特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro，并在Gln和Gly氨基酸残基之间进行酶切。2.**依赖结构**：底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构，还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。3.**分离GST标签**：它可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。4.**表达宿主**：本品由大肠杆菌中重组表达，并以无菌液体形式提供。5.**物理性质**：分子量约为46kDa，物理外观为无菌无色液体。6.**储存缓冲液**：25mMTris-HCl（pH8.0），150mMNaCl，1mMEDTA，5mMDTT，50%（V/V）Glycerin。7.**酶切缓冲液**：10×酶切缓冲液为500mMTris-HCl（pH7.0），1.5MNaCl，10mMEDTA，10mMDTT。8.**纯度**：经SDS-PAGE及HPLC分析，纯度大于95%。9.**酶活定义**：在5℃条件下反应16小时，能够切割10µg的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。研究表明，优化后的Cas12a系统在多种细胞类型中表现出良好的编辑效率。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag

BsuDNAPolymerase（嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶）在PCR中的应用具有多个优势，以下是一些关键点：1.**链置换活性**：BsuDNAPolymerase具有很强的链置换活性，这使得它非常适合于等温扩增技术，如重组酶聚合酶扩增（RPA）。在这些技术中，BsuDNAPolymerase可以快速、高效、特异性地扩增模板，在10到30分钟内将痕量的核酸模板（低至单拷贝）扩增至可以检出的水平。2.**高温稳定性**：BsuDNAPolymerase在高温下保持活性，这使得它在一些需要高温反应的实验条件下表现出色。3.**高灵敏度和特异性**：BsuDNAPolymerase在等温扩增中展现出高灵敏度，能够将微量核酸模板扩增到可检测水平。同时，它也具有高特异性，减少了非特异性扩增的风险。4.**简化的样品处理**：BsuDNAPolymerase可以直接对复杂样品进行扩增，无需事先进行复杂的核酸纯化和提取步骤，节省了时间和成本。5.**可扩增DNA和RNA**：BsuDNAPolymerase不仅可以扩增DNA，还可以直接扩增RNA，省去了额外的逆转录反应（cDNA合成）步骤，这对于RNA的检测和分析更加方便快捷。6.**无核酸外切酶和RNase残留**：BsuDNAPolymerase在生产过程中确保无核酸外切酶、切口酶及RNase残留，这有助于提高实验的准确性和重复性。Recombinant Human LILRA3/CD85e (His-Avi Tag)Cpf1是一种新发现的类2/型V CRISPR-Cas DNA内切酶，在不同系统中显示出一系列的活性。

在基因编辑中，除了NLS-Cas9-EGFPNuclease，还有多种技术可以提高编辑的特异性，这些技术包括：1.**高保真Cas9变体**：通过工程化改造Cas9蛋白，例如使用SpCas9-HF1或eSpCas9等高保真变体，可以减少脱靶效应，提高特异性。2.**碱基编辑器（BaseEditors）**：这类编辑器可以在不产生DNA双链断裂的情况下直接在特定位置进行单个碱基的转换，从而减少非目标编辑。3.**引导编辑器（PrimeEditors）**：由哈佛大学刘如谦教授团队开发的引导编辑器可以在不依赖DNA双链断裂和同源定向修复的情况下，实现精细的基因组编辑。4.**CRISPRi和CRISPRa**：这两种技术分别用于抑制或激起特定基因的表达，而不切割DNA，从而减少了脱靶风险。5.**新型CRISPR系统**：例如CRISPR/Cas12j和CRISPR/CasΦ，这些系统可能具有不同的PAM序列要求和更高的特异性。6.**AI辅助设计**：利用人工智能预测和优化sgRNA的设计，以减少脱靶效应。7.**优化递送系统**：改进CRISPR组分的递送方法，例如使用核糖核的蛋白（RNP）复合物，可以提高编辑效率和特异性。8.转座子编辑系统：利用转座子进行基因组编辑，可以在不依赖DNA双链断裂的情况下实现大片段DNA序列的插入。

在进行IdeSProtease的分子改造时，平衡酶的活性和稳定性是一个关键的挑战。以下是一些策略，这些策略可以帮助研究者在提高酶稳定性的同时保持或甚至提高其催化活性：1.**定向进化**：使用定向进化技术进行多轮的突变和筛选，以获得在所需条件下具有改进稳定性的酶变体，同时监测其催化活性，确保改造后的酶保持高效催化能力。2.**结构基础的理性设计**：基于IdeSProtease的三维结构信息，识别可能影响稳定性和活性的关键氨基酸残基，通过点突变或小肽插入来优化这些区域。3.**计算模拟**：利用分子动力学模拟和计算化学方法预测突变对酶稳定性和活性的影响，以指导理性设计。4.**糖基化修饰**：通过糖基化可以增加酶的溶解性和稳定性，但需注意不要干扰酶的活性位点或底物结合位点。5.**活性位点附近的柔性区域改造**：通过刚化柔性区域的策略提高酶的热稳定性，同时保持活性位点的柔性以维持催化活性。6.**长距离相互作用分析**：研究蛋白质内部的长距离相互作用，识别影响稳定性和活性的远程突变，通过这些突变优化酶的性能。7.**酶活性和稳定性的权衡分析**：通过实验数据，分析酶活性和稳定性之间的关系，找到比较好平衡点。去泛素化酶（Deubiquitinating enzymes, DUBs）可以去除泛素化蛋白上的泛素链，使泛素分子得以回收和再利用。

嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶I（BstDNAPolymeraseI）和它的大片段（LargeFragment）是两种在分子生物学实验中常用的酶。它们的主要区别在于结构和活性：1.**结构**：-完整的BstDNAPolymeraseI包含一个5'→3'的核酸外切酶活性区域，而大片段是通过基因工程改造或蛋白酶处理去掉了这个外切酶活性区域的酶。因此，大片段没有5'→3'的核酸外切酶活性，但保留了5'→3'的DNA聚合酶活性。2.**活性**：-BstDNAPolymeraseI具有5'→3'的核酸外切酶活性，这意味着它在合成DNA的同时可以“校对”错误，切除不匹配的核苷酸。而大片段由于缺少外切酶活性区域，不具有这种校对能力。-大片段具有更强的链置换能力，这使得它非常适合于等温扩增反应，如环介导的等温扩增（LAMP）和滚环扩增（RCA）。3.**应用**：-BstDNAPolymeraseI由于具有校对功能，可能更适合于需要高保真度的DNA合成反应。-BstDNAPolymerase,LargeFragment由于其链置换能力，更适合于等温扩增技术，这些技术不需要热循环仪，可以在恒定温度下进行DNA扩增。4.**热稳定性**：-BstDNAPolymerase,LargeFragment通常在65°C左右的温度下进行反应，而BstDNAPolymeraseI可能具有更宽的反应温度范围。多泛素化的靶蛋白被26S蛋白酶体识别。26S蛋白酶体由一个20S颗粒和两个19S调节颗粒组成。Recombinant Mouse LIF Protein

FnCas12a需要一个crRNA，而不需要tracrRNA，简化了RNA的设计和构建过程。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag

酵母重组表达的N-糖苷酶F（PNGaseF）是一种酰胺水解酶，具有以下特点：1.**高效性**：PNGaseF是去除几乎所有N-连接寡糖从糖蛋白中有效的酶法方法。它能够在几分钟内快速且无偏倚地释放所有的N-糖链，适合后续的色谱或质谱分析。2.**重组酶**：该酶是重组的酰胺酶，能够从高甘露糖、杂合和复杂寡糖中切割内GlcNAc和天冬氨酸残基之间的连接。3.**纯度**：纯度达到95%以上，通过SDS-PAGE和完整ESI-MS进行确定。4.**储存稳定性**：在含有50%甘油的储存缓冲液中，好的活性和稳定性可维持长达24个月。5.**使用条件**：可以在原生或变性条件下使用，对于变性条件下的去糖基化，建议添加NP-40以解除SDS的抑制作用。6.**比活性**：具有高达100000U/mL的比活性。7.**His标签**：产品带有His标签，常用于抗体及其相关蛋白的完全去糖基化。8.储存条件：-25~-15℃保存，有效期1年。9.**无甘油版本**：还提供了无甘油版本的PNGaseF，这有助于在HPLC和质谱分析中获得结果。10.**酶活定义**：1个酶活力单位指在10μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。这些特点使得酵母重组表达的PNGaseF成为研究和分析糖蛋白糖链结构的重要工具。Recombinant Human Siglec-9 Protein,His-Avi Tag