ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一种一步法反转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的预混液,主要用于RNA的特异性超高灵敏度定量检测。以下是它的一些主要特点:1.**一步法操作**:该试剂盒整合了反转录和PCR步骤,简化了操作流程,减少了操作时间,并限度地减少了人为误差和污染风险。2.**高灵敏度检测**:能够检测低至10个拷贝的目标序列,适合于低丰度RNA的检测。3.**多重检测能力**:可以在单个反应孔中进行多重检测,不同基因对应不同探针,不同探针对应不同荧光标记,进行多重荧光定量PCR检测。4.**高特异性**:通过使用TaqMan探针,该试剂盒提供了高特异性的检测,可以区分有单个核苷酸差异的miRNA。5.**热启动酶**:使用的BeyoFast™TaqDNAPolymerase是一种与抗体结合的热启动酶,有效避免非特异性扩增,提高PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。6.**兼容多种荧光定量PCR仪**:提供了LowROX和HighROX,兼容于无需ROX和需要LowROX或HighROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。此外,可以通过同源重组程序高效地插入线性化的外来 DNA,以产生稳定的细胞系,同时可以轻松制备表达载体。河北支持IND的GMP蛋白生产技术服务开发
热敏感性双链脱氧核糖核酸酶(ThermolabiledsDNase)的热稳定性是指该酶在特定温度条件下能够保持其活性的能力。然而,ThermolabiledsDNase的一个特性是其热敏感性,即该酶在相对较高的温度下(通常为55°C)可以被快速且不可逆地失活。这种特性对于实验操作非常有利,因为它允许在消化双链DNA后,通过简单的热处理步骤来确保酶的完全失活,从而避免对后续实验步骤的干扰。具体来说,ThermolabiledsDNase在20-40°C的温度范围内保持高活性状态,其对双链DNA的酶切活性比对单链DNA高出约5000倍。此外,该酶的活性比牛DNaseI的活力高出约30倍。然而,ThermolabiledsDNase的热敏感性意味着它可以通过55°C加热5分钟而完全且不可逆地灭活。这种热敏感性与热稳定性是两个不同的概念。热稳定性通常描述一个酶在高温下保持其结构和功能的能力,而ThermolabiledsDNase的热敏感性则强调了该酶在特定温度下失活的特性。这种热敏感性使得ThermolabiledsDNase成为一个非常有用的工具,特别是在需要快速去除RNA样品中的基因组DNA污染,而又不希望引入额外的抑制剂或保护剂的实验中。浙江微生物基因编辑技术服务临床前研究利⽤重组DNA技术对⼈体胶原蛋⽩编码区基因进⾏改造;其 次,将胶原蛋⽩分⼦的mRNA逆转录成相应的cDNA。
M-MLVAdvanceFastReverseTranscriptase(200U/μL)是一种高效的逆转录酶,用于将RNA模板转换成cDNA。这种酶是从MoloneyMurineLeukemiaVirus(M-MLV)衍生而来,经过基因工程改造,以提高其热稳定性和合成效率。以下是该产品的一些关键特点和应用:1.**高浓度**:提供200U/μL的高浓度,便于进行各种规模的实验。2.**热稳定性**:该酶具有较高的热稳定性,可以在高达55°C的温度下进行逆转录反应,这有助于打开RNA的二级结构,提高长链cDNA的合成效率。3.**低RNaseH活性**:与野生型M-MLV逆转录酶相比,这种酶的RNaseH活性较低,有助于保护RNA模板不被降解,从而提高长链cDNA的合成。4.**合成长链cDNA的能力**:能够合成长达7kb的cDNA,适合于需要合成长片段cDNA的实验。5.**适用于多种RNA模板**:可以用于从总RNA或mRNA模板合成cDNA链,适用于实时荧光定量RT-PCR、3'-和5'-RACE等实验。6.**储存条件**:建议在-20°C下保存,以保持酶的活性和稳定性。7.**使用方便**:通常,该酶会与5XFirst-StrandBuffer、0.1MDTT等组分一起提供,方便用户进行逆转录反应。8.**产品规格**:提供不同规格的产品,以满足不同实验规模的需求。
这项技术服务在多个领域展现出了巨大的应用潜力。在疫苗研发领域,VLP作为一种新型的疫苗候选物,具有良好的免疫原性,能够诱导机体产生强烈的免疫反应。江毕赤酵母表达的VLP疫苗可以针对多种病毒性疾病,为预防和控制传染病提供了创新的解决方案。例如,在应对一些新兴病毒威胁时,VLP疫苗能够快速启动研发和生产,为公众健康提供及时的保护。此外,在生物医学研究中,VLP还可以作为药物载体或诊断试剂的重要组成部分,用于疾病的和检测。评估抗体的免疫原性,包括其在实验动物体内诱发的免疫反应。这通常涉及对抗体药物的抗药抗体进行检测。
在生物科技日新月异的发展浪潮中,江毕赤酵母表达VLP(病毒样颗粒)技术服务正逐渐崭露头角,为众多科研和应用领域带来了新的契机与突破。江毕赤酵母作为一种的表达系统,在VLP的生产中具有独特的优势。它能够对复杂的蛋白质进行正确的折叠和修饰,使得表达出的VLP更接近天然病毒的结构和功能。与其他表达系统相比,江毕赤酵母具有生长速度快、易于培养和大规模发酵的特点,能够高效地生产大量的VLP。这不仅降低了生产成本,还提高了生产效率,为VLP的广泛应用奠定了坚实的基础。胶原蛋白是脊椎动物的主要结构蛋白。它在为细胞提供支撑支架方面起着至关重要的作用,从而影响细胞的存活。江苏类人源胶原蛋白开发技术服务开发
重组类人胶原蛋白 (rHLC),它具有低免疫原性和隐藏病毒的风险小,并且可以特别定制以用于特定应用。河北支持IND的GMP蛋白生产技术服务开发
TthDNAPolymerase(5U/μL)在分子生物学实验中的应用非常广,主要包括以下几个方面:1.**常规PCR扩增**:TthDNAPolymerase能够在74°C下进行DNA复制,具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′核酸外切酶活性,适用于常规PCR反应,可以高效地扩增目标DNA片段。2.**逆转录PCR(RT-PCR)**:在Mn2+存在的条件下,TthDNAPolymerase表现出较强的逆转录活性,可以用于一步法RT-PCR反应,有效地将RNA逆转录为cDNA,并进行后续的PCR扩增。这种特性使得TthDNAPolymerase在RNA样本检测中非常有用,尤其是在需要快速从RNA得到cDNA的实验中。3.**热启动PCR(HotStartPCR)**:TthDNAPolymerase可以用于热启动PCR,这是一种提高PCR反应特异性的技术。通过在低温下封闭DNA聚合酶的活性部位,避免非特异性扩增,然后在高温下解除封闭,从而保证只产生特异性扩增。4.**耐受PCR抑制成分**:TthDNAPolymerase对于血液、肌肉等生物组织中含有的肌红蛋白等PCR抑制成分具有较强的耐受性,十分适用于粗样本快速检测。5.**高灵敏度检测**:TthDNAPolymerase的PCR扩增检测灵敏度可达100pg,这使得它在需要高灵敏度检测的实验中非常有用。
逆转录酶在RNA降解中的影响主要体现在其RNaseH活性上。RNaseH活性是指逆转录酶在合成cDNA的同时,能够特异性地水解DNA-RNA杂交链中的RNA部分。这种活性在某些情况下可能会导致RNA模板的降解,从而影响cDNA的合成,尤其是在合成长链cDNA时。1.**RNaseH活性的影响**:一般病毒的逆转录酶通常会连接一个RNaseH活性结构域。这种活性会在合成过程中同时切割RNA:cDNA杂合链中的RNA模板。因此,RNA模板可能会在全长逆转录完成之前被降解,这会降低逆转录效率。2.**降低RNaseH活性**:为了更好地合成长链cDNA,工程化的逆转录试剂盒通常使用的是RNaseH活...