酵母重组表达的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一种酰胺水解酶,具有以下特点:1.**高效性**:PNGaseF是去除几乎所有N-连接寡糖从糖蛋白中有效的酶法方法。它能够在几分钟内快速且无偏倚地释放所有的N-糖链,适合后续的色谱或质谱分析。2.**重组酶**:该酶是重组的酰胺酶,能够从高甘露糖、杂合和复杂寡糖中切割内GlcNAc和天冬氨酸残基之间的连接。3.**纯度**:纯度达到95%以上,通过SDS-PAGE和完整ESI-MS进行确定。4.**储存稳定性**:在含有50%甘油的储存缓冲液中,好的活性和稳定性可维持长达24个月。5.**使用条件**:可以在原生或变性条件下使用,对于变性条件下的去糖基化,建议添加NP-40以解除SDS的抑制作用。6.**比活性**:具有高达100000U/mL的比活性。7.**His标签**:产品带有His标签,常用于抗体及其相关蛋白的完全去糖基化。8.储存条件:-25~-15℃保存,有效期1年。9.**无甘油版本**:还提供了无甘油版本的PNGaseF,这有助于在HPLC和质谱分析中获得结果。10.**酶活定义**:1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。这些特点使得酵母重组表达的PNGaseF成为研究和分析糖蛋白糖链结构的重要工具。Ultra-Long Master Mix 在分子生物学实验中的应用主要集中在需要扩增长片段DNA序列的场合。Recombinant Cynomolgus IL-8/CXCL8 Protein,His Tag
嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶I(BstDNAPolymeraseI)是一种热稳定的酶,它在高温下(55-65°C)仍然保持活性,这使得它在分子生物学实验中非常有用,尤其是在需要高温反应的实验中,如热循环扩增(PCR)。BstDNAPolymeraseI具有以下特性:1.**热稳定性**:BstDNAPolymeraseI在高温下具有较高的稳定性,适用于高温反应的实验,如PCR。2.**3'到5'外切酶活性**:这种酶具有3'到5'外切酶活性,能够切除DNA末端上的非特异性引物和杂交DNA,使其成为等温扩增应用的理想酶。3.**耐盐性**:BstDNAPolymeraseI在高盐条件下仍能保持稳定活性,这在一些特殊的PCR应用中非常有用。4.**等温扩增**:由于其3'到5'外切酶活性,BstDNAPolymeraseI用于等温扩增反应,如LAMP技术,这种技术能够在恒温下进行DNA扩增,无需繁琐的温度循环。5.**快速PCR**:由于其高温稳定性,BstDNAPolymeraseI也可用于快速PCR反应,缩短了实验时间。6.**高GC含量模板扩增**:BstDNAPolymeraseI对高GC含量模板的扩增效果较好,因此在一些难扩增的模板中表现出色。Recombinant Mouse ARTN Protein,hFc TagMultiplex Probe qPCR Mix 是一种浓缩预混液,含有抗体技术修饰的热启动酶Hotstart Taq DNA聚合酶。
蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一种特殊的融合蛋白,它结合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些关键特点和应用:1.**融合表达产物**:pA-MNase是蛋白A与微球菌核酸酶MNase的融合表达产物,因此它同时具有ProteinA的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性。2.**双重功能**:由于其双重功能,pA-MNase常用于蛋白质-DNA相互作用研究,特别是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技术中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一种发现于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的细胞壁表面蛋白,分子量为42kDa,能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)结合,通常结合部位为免疫球蛋白的Fc区。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一种核酸内切酶,能够降解核酸,常用于降解蛋白质制备中存在的核酸,减少细胞裂解液的粘度,以及用于染色质结构分析和快速RNA测序。5.**反应条件**:MNase的反应条件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要补充100µg/ml重组白蛋白,分子生物学级,并在37°C下孵化。
Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一种从嗜热脂肪芽孢杆菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是关于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些关键信息:来源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更强的5'-3' DNA聚合酶活性、链置换活性和dUTP耐受性,适合用于抗污染的等温扩增反应,如LAMP和CPA等。应用:主要应用于等温DNA扩增,包括环介导等温扩增(LAMP)和其他等温扩增技术。规格:活性定义:1 U指的是在65°C下30分钟内将10 nmol的dNTP整合到酸不溶物质中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。产品形式:提供的产品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),货号14402ES,以及冻干粉形式的产品,货号14405ES,不含甘油。灵敏度和稳定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高灵敏度,低至5copies目的基因可测,且在飞克(fg)级别的模板量下也能快速达到阈值。在37°C下,该酶可以保持相对稳定的效应长达5天,并且在-20℃下可以稳定保存2年。储存条件:建议在-25℃至-15℃下储存,以保持产品活性,并避免反复冻融。FnCas12a可以识别不同的PAM序列,例如5'-TTN-3',这增加了它可以靶向的基因组区域 。
提取的DNA质量评估通常涉及以下几个方面:1.**纯度评估**:-**分光光度法**:通过测量DNA样本在260nm和280nm处的吸光度(OD值)来评估DNA的纯度。纯度可以通过OD260/OD280的比值来评估,对于纯DNA,这个比值通常在1.8左右。如果比值低于1.8,可能表明存在蛋白质污染;如果高于1.9,则可能存在RNA污染。此外,OD260/OD230的比值可以用来评估盐离子等杂质的残留,纯DNA的比值应在2.0-2.2之间。-**琼脂糖凝胶电泳法**:通过电泳分离DNA片段,根据DNA在凝胶上的迁移情况来评估其纯度。如果泳道口中存在较亮的条带,可能表明存在蛋白污染。2.**浓度评估**:-**紫外分光光度计**:使用紫外分光光度计测定DNA在260nm处的吸光度,根据比尔-朗伯定律(Beer-Lambertlaw)计算DNA的浓度。对于纯DNA,OD260的读数为1.0时,大约相当于50μg/mL的双链DNA。-**荧光定量法**:使用荧光染料结合DNA,通过测量荧光变化来定量DNA。这种方法比紫外分光光度法更敏感、精确,并且可能对特定的核酸有特异性。
UDG在结构上属于单功能DNA糖基化酶,它通过沿着DNA链滑动,识别尿嘧啶分子,进行碱基切除。Recombinant Cynomolgus IL-8/CXCL8 Protein,His Tag
核酸内切酶VIII(EndonucleaseVIII)是一种来自大肠杆菌的DNA损伤修复酶,具有以下特点:1.**双功能活性**:核酸内切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**释放受损嘧啶碱基**:N-糖基化酶活性可以释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇,生成一个脱嘌呤(apurinic,AP)位点。3.**切割AP位点**:AP裂解酶活性可以切割AP位点的3'和5'端,产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口(Gap)。4.**识别并切除受损碱基**:核酸内切酶VIII可以识别并切除多种受损碱基,包括尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。5.**与EndonucleaseIII的区别**:虽然核酸内切酶VIII与核酸内切酶III相似,但核酸内切酶VIII具有β和δ裂解酶活性,而核酸内切酶III具有β裂解酶活性。6.**应用领域**:核酸内切酶VIII可以应用于单细胞凝胶电泳、NGS建库中DNA损伤修复、酶法合成DNA中释放DNA链、碱洗脱,搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)进行含U片段的克隆等。
确保Cre重组酶只作用于特定细胞,主要通过以下几种方式实现:1.**组织特异性启动子**:-利用组织特异性启动子控制Cre重组酶的表达,可以确保Cre酶只在特定组织或细胞中表达。这种方法通过将Cre基因置于特定细胞类型特有的启动子控制之下,实现对Cre酶表达的精确控制。2.**诱导型Cre重组酶系统**:-通过使用Cre-ERT(雌素受体突变体与Cre重组酶的融合蛋白),可以实现对Cre活性的时间控制。在无他莫昔芬诱导时,Cre-ERT与热激蛋白Hsp90结合,定位于细胞质中;当他莫昔芬给药诱导时,Hsp90脱离Cre-ERT,使Cre-ERT进入细胞核发挥基因重组的作用。这种系统相当于为...