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    筛选出分泌特定单克隆抗体的杂交瘤细胞株abm58060-20a2-pu。将此细胞株转入t-75培养瓶中扩增至对数生长期保种或进行后续实验。实施例3腹水诱生法制备单克隆抗体一、腹水制备对数生长期细胞用无血清培养基洗涤并悬起，计数～5×105，1ml。悬浮的细胞腹腔注射事先用石蜡油致敏的小鼠。7天后开始收集腹水。取出的腹水于4℃离心4000rpm，10min。小心吸出中间的腹水收集于离心管中，4℃或-20℃保存。二、单克隆抗体的纯化用hitraprproteinaff(ge公司)亲和层析法按说明书从腹水中纯化抗体。sds-page胶鉴定纯度，bradford法测定浓度。纯化的抗体保存于-20℃。实施例4单克隆抗体特性鉴定一、亚型鉴定用100mmpbs()稀释包被羊抗鼠igg(北京中杉金桥生物技术有限公司)至μg/ml,每孔加100μl，4℃，过夜。倾空液体，用含％tween的pbs(pbs-t)洗3次，每孔加入200μl封闭液(含2％bsa和3％蔗糖的pbs)，37℃孵育1h。倾空液体，用pbs-t清洗3次。每孔加入，37℃孵育1h。倾空液体用pbs-t清洗3次。用封闭液1：1000稀释hrp标记的羊抗鼠(κ,λ)抗体或1：2000稀释hrp标记的羊抗鼠(igm，igg1，igg2b，igg2b，igg3，iga)抗体，37℃孵育1h。倾空液体，用pbs-t清洗3次。MLH1抗体试剂 苏苏械备20180519号.江苏作用dMMR抗体检测试剂经验丰富

    可能是由于蛋白的不稳定造成的。目前，其用途主要为：联合检测msh2、msh6、pms2、mlh1可用于lynchsyndrome(遗传性非息肉性结肠ai)的筛查。技术实现要素：发明人提供了一种抗msh6蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是。进一步地，所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是。进一步地，所述单克隆抗体特异性识别msh6蛋白。进一步地，所述单克隆抗体由保藏号为cgmcc**7492的杂交瘤细胞系产生。所述细胞株为小鼠杂交瘤细胞系abm58060-20a2-pu，分类命名为：小鼠杂交瘤细胞系，该细胞系已于2019年04月3日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。进一步地，所述抗msh6蛋白为小鼠igg2b亚型单克隆抗体。发明人还提供了一种抗msh6蛋白单克隆抗体的制备方法，其免疫小鼠所用的抗原为seqid**所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。发明人还提供了一株分泌抗msh6蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞株为小鼠杂交瘤细胞系abm58060-20a2-pu，所述细胞系保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：cgmcc**7492。甘肃dMMR抗体检测试剂值得推荐迈杰多平台的研究优势以及多组学数据的挖掘能力，促进产学研医结合，加速项目成果转化，创新科技产品研发。

    主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。2、按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法);与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。3、按结合方式可分为抗原—抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶(***)法和亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等，其中SP法是*常用的方法。三、几种常用免疫组织化学方法的原理1、免疫荧光方法是*早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用比较广。2、免疫酶标方法免疫酶标方法是继免疫荧光后，于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜。

    免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示，如角蛋白(keratin)显示上皮成分，LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时才会出现交叉反应。2、敏感性高在应用免疫组化的起始阶段，由于技术上的限制，只有直接法、间接法等敏感性不高的技术，那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP法的出现，使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合，这样高敏感性的抗体抗原反应，使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。3、定位准确、形态与功能相结合该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学研究的深入是十分有意义的。迈杰基于基因组学、蛋白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台，丰富的伴随诊断开发经验。

    当liu细胞出现一种或几种错配修复蛋白核表达的丢失，则提示liu为MSI-H。MLH1和MSH2作为错配修复复合体的共用亚单位，在发生功能缺陷时常同时伴有其同源错配修复蛋白的表达缺失。另外，如前所述，部分Lynch综合征是由于EpCAM基因胚系突变导致下游MSH2基因功能缺陷所致。Musulen等发现，在MSH2表达缺失的liu中检测出EpCAM蛋白缺失，与EpCAM基因突变的吻合率达100％，所以推荐将EpCAM免疫组织化学检测加入到Lynch综合征的筛查流程中。日常工作中用于鉴别肺腺ai与恶性间皮瘤的抗体Ber-EP4即是检测EpCAM的常用克隆之一。免疫组织化学检查错配修复蛋白表达缺失的作用如下：(1)提示哪个错配修复基因发生了功能缺失(表1)；(2)与MLH1启动子甲基化检测和／或BRAFV600E突变检测结合，区分散发性MSI-H结直肠ai和可疑Lynch综合征患者；(3)与EpCAM免疫组织化学检查结合，为后续的Lynch综合征遗传学突变检测提示方向。目前，4种主要的错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2均已有稳定的商品化抗体，但受组织固定、染色条件、抗体克隆号不同等因素的影响，可能会出现假阳性或假阴性结果。在判读免疫组织化学染色结果时应注意：(1)内对照是否阳性；(2)着色部位是否为细胞核；。经多平台平行验证（MSI-PCR、MSI-NGS)，一致性高，特异性好.湖南提供dMMR抗体检测试剂共同合作

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    具有两个或两个以上位点改变)、低频MSI(MSI-L，*有一个位点发生改变)以及微卫星稳定型(MSS，没有位点发生改变)。由于MSI-L结直肠ai在临床表现和病理改变上与MSSliu无明显差别，因此通常被归入MSSliu。约15％的结直肠ai经MSI途径发生，其中3％左右为家族遗传性(Lynch综合征)，12％为散发性。二、遗传性MSI-H结直肠ai(Lynch综合征)与散发性MSI-H结直肠ai1．Lynch综合征与散发性MSI-H结直肠ai发生机制的异同：作为经MSI途径发生的结直肠ai的典型**，Lynch综合征**初由Michigan大学病理系的Warthin博士于1913年**先发现并报道，至1966年Lynch医师明确了本病是一种常染色显性遗传的liu综合征，在迄今100年的发现和研究过程中，“ai症家族综合征(cancerfamilysyndrome)”、“Lynch综合征”、“遗传性非息肉病性结直肠ai(hereditarynon．polyposiscolorectalcancer)”等名称曾先后在不同时期被使用。随着近年来错配修复基因在本病发生中的作用逐渐明确，现在WHOliu分类将Lynch综合征这一名称用于携带有错配修复基因胚系缺陷的常染色体显性遗传性liu综合征。目前在Lynch综合征患者中发现的DNA错配修复缺陷包括三种类型：(1)错配修复基因的胚系突变。江苏作用dMMR抗体检测试剂经验丰富