肉汤培养基(测磷细菌菌数)是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子;磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙,经球磨过300目,悬于蒸馏水中呈乳白混悬液;pH调至7.0±0.2,分装试管后121℃灭菌15 min,冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂,培养基既保持肉汤的高营养促生优势,又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”,可同步完成溶磷功能验证和菌数测定,适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数(MPN)法:将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释,各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管,每稀释度3重复,28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解,培养液由乳白→局部透明→全管澄清,并伴随菌膜形成;非溶磷菌虽可增殖,但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管,查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数,全程只需3天,比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋混匀;若肉汤本身含磷(牛肉膏批次差异),可先用磷钼蓝法测可溶磷,超过5 mg L⁻¹即弃用。科学家把Cry基因导入棉花、水稻,培育的Bt作物毕生自带抗虫盾,减少农药喷洒七成以上 。解纤维素芽孢杆菌
无机磷细菌培养基(Inorganic Phosphorus Bacteria Medium)是专门用于筛选、计数和验证具有“溶磷”功能微生物的合成培养基。其关键思路是“以难溶磷为磷源”:配方中不添加任何有机磷或磷,而用磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕、磷灰石或磷酸铝等难溶性无机磷酸盐作为磷源;同时提供葡萄糖、蔗糖或甘露醇等碳源,以及硫酸铵或硝酸钠作氮源,并辅以镁、钾、硫、微量元素和缓冲系统,pH 通常调至 6.8–7.2。只有能分泌有机酸、质子、酶类(如葡萄糖酸、甲酸、磷酸酶、植酸酶)的溶磷菌,才能将不溶性磷转化为可溶的 PO₄³⁻,供自身利用并在培养基上生长。培养基灭菌后呈乳白浑浊,倾注平板后表面略带沉淀。接种土壤稀释液或根际样品,28 ℃培养 3–5 天,具有溶磷能力的菌落周围会出现 2–10 mm 的透明晕圈——这是菌落分泌的酸或酶溶解磷酸三钙所致,晕圈直径与溶磷能力呈正相关。若需定量,可挑取晕圈明显的单菌落,接入液体无机磷培养基,振荡培养 7 天,用钼锑抗比色法测定上清液中有效磷含量,计算溶磷率(mg P·L⁻¹)与菌体生物量的比值,即可比较不同菌株的溶磷效率。阿姆利则链霉菌科学家正给它插入耐旱基因,希望让戈壁也长出稻浪。

枯草芽孢杆菌斯氏亚种(Bacillus subtilis subsp. spizizenii)是“枯草家族”里的轻骑兵,菌体纤细,却藏着一套“攻防兼备”的微生物 toolkit。1930 年代被 Spizizen 从沙漠尘土中分离,因而得名。它更擅在 35–45 ℃、低湿度的热旱边际快速萌发,芽孢外壁含特殊吡啶二羧酸钙层,可耐 90 ℃热水 20 min、紫外 5000 μW·s/cm² 仍存活,为制剂长途运输省下冷链成本。复苏后,斯氏亚种先分泌高活性 surfactin、fengycin 与 bacillomycin D,三脂肽协同击穿病原菌膜,对番茄青枯、辣椒疫霉、小麦纹枯的抑菌带宽达 28–32 mm;同时释放挥发性 2,3-丁二醇,启动植物 ISR 信号,使叶片过氧化物酶活性提高 1.8 倍,达到“未病先防”。田间试验中,每亩用 100 g 斯氏亚种可湿粉拌种,玉米出苗率提升 12%,后期纹枯病指降 46%,产量增 8.3%;若与滴灌同施,可使连作草莓根际尖孢镰刀菌数量下降 70%,果实可溶性糖提高 1.2 度,货架期延长 3 天。更妙的是,它能合成耐碱 α-淀粉酶与β-葡聚糖酶,在 pH 9.5、温度 50 ℃ 条件下仍保持 80% 酶活,用于青贮饲料可提前 2 天完成乳酸发酵,降低干物质损耗 3%。目前,工厂采用糖蜜—豆粕深部好氧发酵,48 h 芽孢量可达 5×10¹⁰ CFU/mL,喷雾干燥后存活率 > 95%,制成黑衣粉剂,保质期 24 个月。
威氏芽孢杆菌是土壤里低调的“多面手”。它先以杆状活菌在根际游弋,一遇干旱、高温便迅速缩成厚壁芽孢,可耐沸水煮十分钟、紫外曝晒两小时,仍能在十年后遇水萌发。植保学家把它当“杀菌剂”:芽孢复苏后分泌表面活性素、伊枯草菌素,像微型剪刀刺破病原菌膜,对白绢、根腐、灰霉的抑制率超七成;同时诱导植物开启系统抗性,番茄未染病就先“武装”叶片。温室试验显示,每亩用两百克菌粉拌基质,黄瓜枯萎率降四成,农药少打一半,果实仍青亮。更妙的是,它能分解有机磷长链,释放正磷酸供作物吸收,相当于给土壤配了“微肥”。东北大豆连作田因它缓解“磷饥饿”,亩产增8%。如今,生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。科学家还在其基因组里插入耐盐基因,让它在西北盐碱地也能萌发,为弃荒滩涂夺回粮田。小小威氏芽孢杆菌,用微米之躯守护绿色丰收,让农药瓶少一个,饭碗多一粒。其分泌的耐有机溶剂蛋白酶、褐藻胶裂解酶在洗涤、纺织及海藻转化中展现高活性,为生物制造提供新工具。

柠檬色明串珠菌(Leuconostoc citreum)是明串珠菌属的一种革兰氏阳性、兼性厌氧的球形乳酸菌,广存在于泡菜、奶酪、黑麦蜜露等天然发酵环境中。该菌在MRS培养基上形成白色、湿润、圆形小菌落,细胞呈卵圆形或球形,常以珠状连接排列,不产芽孢,无运动性。柠檬色明串珠菌具有较强的糖类发酵能力,可利用葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖等产酸产气,发酵过程中生成乳酸、乙酸及双乙酰等风味物质,是泡菜和奶酪发酵中的重要功能菌之一。其代谢产物不仅能降低环境pH值,抑制有害菌生长,还能赋予发酵食品特有的香气和口感,常用于泡菜酿造和干酪辅发酵剂的开发。此外,柠檬色明串珠菌对万古霉素天然耐药,但在免疫正常人群中致病性较低,主要沾染低下者,偶可引起呼吸道沾染等机会性沾染,临床报道较少,上需根据药敏结果选用氨基糖苷类或四环素类药物。综上所述,柠檬色明串珠菌作为一种具有工业应用潜力的乳酸菌,在食品发酵领域展现出良好前景,但在应用过程中仍需关注其耐药性和安全性评估。另一株C1在白酒窖池可产己酸和乙酸乙酯,使基酒主体香提高30%,为“增香菌”提供新选择。东北大学梭菌
科学家正给它植入耐旱、耐盐基因,让它在西北旱地也能结瘤。解纤维素芽孢杆菌
异常嗜冷芽孢杆菌(Bacillus psychrodurans)是芽孢杆菌属的“极地移民”。标准菌株能在-2 ℃缓慢增殖,更适生长温度只15 ℃,比较高不超过30 ℃;芽孢可耐受-20 ℃反复冻融,是研究低温适应的模式菌之一。其细胞膜富含短链与支链脂肪酸,冷休克蛋白Csp持续表达,使核糖体和RNA在冰水中仍保持活性,为“零度工厂”提供分子基础。在农业端,菌株L-4可分泌IAA 18 mg·L⁻¹并溶出有机磷2.3 mg·L⁻¹,4 ℃下仍使冬小麦根长增加25 %,返青期提前5天,分蘖数提高一成,相当于给作物披上“生物羽绒服”。工业方面,它的耐冷蛋白酶已在洗涤剂中试用,10 ℃洗衣去污力提升30 %,节能20 %;低温淀粉酶可将糖化温度由60 ℃降至35 ℃,为寒区酒精发酵节约大量蒸汽。环境修复更彰显其“冰雪技能”。菌株ANT-1在-5 ℃、10 %盐度下60天降解柴油60 %,为极地溢油、寒区输油管线泄漏提供原位生物修复方案;与冰藻共培养时,还能吸附Cd²⁺、Pb²⁺,吸附量分别达50 mg·g⁻¹和35 mg·g⁻¹,让重金属在冰层中被“冻结”并随菌体沉降。未来,借助合成生物学,把异常嗜冷芽孢杆菌的“冷酶+冷激”模块植入生产底盘,有望实现“零加热”生物制造,让微生物在冰水里也能为人类催化高值反应。解纤维素芽孢杆菌