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支原体基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 型号
  • CM0001
支原体企业商机

支原体检测中的PCR法和LAMP方法各有其优势和劣势,以下是两种方法的比较:

PCR法
优势:
1.高灵敏度:PCR法可以扩增支原体DNA,具有很高的灵敏度。
2.操作简便:PCR操作相对简单,结果准确,速度快,通常3个小时左右即可得到结果。
3.可靠性:PCR法已成为日常细胞培养维护的可靠方法,是细胞样本库保护细胞的方法。
劣势:
1. 样品量需求:相对于某些快速检测方法,PCR可能需要较多的样品量。
2. 检测周期:尽管PCR法相对快速,但在某些情况下,检测周期可能较长。
LAMP法
优势:
1. 设备简单:只需要一个稳定的恒温环境,如恒温水浴或热拟温器,不需要复杂的温度控制设备。
2. 高特异性:LAMP技术采用多个特异性引物,提供了较高的特异性。
3. 结果可视化:LAMP扩增产物可形成肉眼观察的颜色产物,有助于直接观察扩增结果。
劣势:
1. 引物设计复杂:需要设计多个引物,包括外部引物、内部引物和环引物,引物设计较为复杂。
2. 避免污染:由于没有封闭系统,避免污染造成的假阳性是一个问题。
支原体污染源和主要类型?广州支原体预防试剂现货

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目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中,其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在实验室中的传播来源多种多样,主要来源包括实验室人员、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、以及由猪来源的胰蛋白酶溶液。此外,来自其他实验室或商业供应商的细胞培养物、培养基、污染的试剂;非无菌供应品、培养基和溶液;实验室人员;培养箱;液氮;空气颗粒和气溶胶;抗*素的过度使用;细胞培养器皿的不正确密封;以及其他的支原体细胞培养物等都可能成为支原体的传播途径。
广州支原体预防试剂现货巢式PCR法和一步法恒温支原体检测试剂盒到底哪个比较好呢?

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支原体去除试剂使用后,对支原体的检测可能会有影响。一些支原体去除试剂通过特异性地与支原体膜结合、改变支原体膜的通透性来杀死支原体,而对真核细胞几乎没有影响。然而,某些情况下,去除试剂可能会对细胞的活力和形态产生一定的影响,尤其是在去除剂作用期间。此外,如果去除剂的效果不彻底,可能会导致细胞再次被支原体污染。

需要注意的是,某些支原体去除试剂可能会在去除支原体的过程中导致支原体膜溶解,从而释放出支原体的DNA,这可能会在随后的支原体核酸检测中引起假阳性结果。因此,在去除支原体后,建议在继续正常传代培养几代细胞后再进行支原体检测,以确保检测结果的准确性。

支原体污染和黑胶虫污染是两种不同类型的细胞培养污染,它们具有各自的特点和区别:
支原体污染:在相差显微镜下,支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。
黑胶虫污染:在高倍镜下,被黑胶虫污染的细胞膜会变得模糊不清,边界不清晰,有粗糙感。

污染的影响:
支原体污染:可能导致细胞增殖缓慢,甚至从培养器皿脱落,影响细胞的DNA、RNA及蛋白表达。
黑胶虫污染:与细胞竞争性生长,开始时对细胞没有什么影响,但当数量多时,细胞生长会受到影响直至死亡。

污染的来源:
支原体污染:可能来源于工作环境的污染、操作者本身、培养基的污染、交叉污染、实验器材带来的污染以及用来制备细胞的原始组织或部位的污染。
黑胶虫污染:可能来源于细胞本身的污染或从动物取材时的污染,也可能通过培养箱空气进行污染。
细胞被支原体污染了会有什么影响?

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支原体污染一旦发生,不仅对细胞培养造成严重影响,甚至可能导致实验结果失真。而且支原体污染在细胞培养实验中相当常见。因此,预防措施是确保细胞培养环境和实验结果可靠性的重要手段。
01/ 良好的无菌技术及实验操作,保证操作不会引入新的污染
02/ 保持实验空间的清洁
03/ 确保从可靠的来源获取细胞,减少不同细胞之间的交叉传染
04/ 防止交叉污染
05/ 减少气溶胶生成
06/ 谨慎使用抗*素
07/ 定期支原体筛查
08/ 丢弃或处理受到支原体污染的细胞
09/ 保持良好的记录
支原体去除试剂使用之后,对支原体的检测是否有影响?广州细胞培养支原体检测方法LAMP法

支原体污染如何预防?广州支原体预防试剂现货

一步法支原体检测试剂盒的防污染版本通常采用等温扩增技术,如LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)原理,通过支原体特异性引物在恒温条件下对样本进行检测,终通过颜色变化确定样品中是否含有支原体污染。这种方法的优势在于:
1. 快速检测:可以在较短的时间内完成检测,通常在60分钟以内。
2. 高灵敏度和特异性:等温扩增技术可以检测到非常低浓度的支原体DNA。
3. 操作简便:不需要复杂的设备,如PCR仪或电泳设备,只需水浴锅即可完成扩增反应。
4. 减少污染风险:由于无需开盖电泳,可以减少因气溶胶造成的交叉污染。
此外,试剂盒还包含UNG(Uracil-N-Glycosylase)酶,用于防止PCR过程中的污染,UNG酶可以消化反应液中可能存在的尿嘧啶,从而减少因污染导致的假阳性结果。
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将洗涤后的细胞悬浮在适量的PBS中,取一部分细胞悬液放入无菌离心管中。在取样过程中,要保持操作的轻柔与稳定。避免产生过多的气泡或剧烈晃动,防止对细胞造成机械损伤或引入不必要的污染。同时,为了提高检测结果的准确性,可以进行多次取样。例如,从不同的培养瓶或培养板中分别取样,或者在同一培养容器的不同位置进行取样。取样完成后,要尽快将样本送往检测实验室。在运输过程中,要确保样本的稳定性和安全性。可以使用冷藏或保温设备,根据检测要求保持合适的温度条件。总之,细胞支原体检测的取样环节需要严格遵循无菌操作原则,精心准备、准确操作。只有这样,才能获取具有代表性的样本,为准确检测支原体污染提供可靠的依据。支原体...

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