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广州细胞支原体污染

检测新鲜培养基是否有支原体污染，可以采用以下五种方案： 1. 培养法：这是一种传统且可靠的方法，通过将培养基接...

支原体基本参数

品牌
世途科生物
型号
CM0001

支原体企业商机

检测新鲜培养基是否有支原体污染，可以采用以下五种方案：

1. 培养法：这是一种传统且可靠的方法，通过将培养基接种到适宜支原体生长的微生物培养基或琼脂平板上，观察是否有支原体生长。这种方法较为耗时，但成本较低。

2. 荧光染色法：使用特定的荧光染料（如Hoechst 33258）对细胞进行染色，然后在荧光显微镜下观察。如果存在支原体污染，可以看到细胞表面或细胞间隙中支原体DNA的荧光染色。

3. PCR法：通过设计针对支原体特定序列的引物，利用PCR技术特异性扩增目标DNA。PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳进行检测，如果出现条带则表明存在支原体污染。

4. 电镜观察法：使用电子显微镜直接观察培养细胞中的支原体污染情况。这种方法可以提供直观的支原体形态信息，但设备要求较高。

5. 一步法恒温支原体检测：使用特定的试剂盒，如Yeasen一步法恒温支原体检测试剂，采用等温扩增技术，通过颜色变化（由蓝紫色变为天蓝色）进行快速检测。

细胞培养中，支原体检测的重要性？广州细胞支原体污染

支原体污染和黑胶虫污染是两种不同类型的细胞培养污染，它们具有各自的特点和区别：

支原体污染：在相差显微镜下，支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。

黑胶虫污染：在高倍镜下，被黑胶虫污染的细胞膜会变得模糊不清，边界不清晰，有粗糙感。

污染的影响：

支原体污染：可能导致细胞增殖缓慢，甚至从培养器皿脱落，影响细胞的DNA、RNA及蛋白表达。

黑胶虫污染：与细胞竞争性生长，开始时对细胞没有什么影响，但当数量多时，细胞生长会受到影响直至死亡。

污染的来源：

支原体污染：可能来源于工作环境的污染、操作者本身、培养基的污染、交叉污染、实验器材带来的污染以及用来制备细胞的原始组织或部位的污染。

黑胶虫污染：可能来源于细胞本身的污染或从动物取材时的污染，也可能通过培养箱空气进行污染。

杭州支原体检测方法LAMP法细胞培养为什么建议使用支原体检测？

细胞培养中支原体检测出现假阴性结果可能由以下原因引起：

1. 样本质量问题：如果采集的样本中含有抑制剂或者样本在处理、存储过程中出现问题，可能会影响PCR反应，导致假阴性。

2. 技术或操作问题：实验操作中的误差，如样本处理不当、试剂配制错误、仪器设备问题等，都可能导致假阴性结果。

3. 检测方法的局限性：某些检测方法可能存在灵敏度或特异性不足的问题，导致无法准确检测到病原体。

4. 培养基和培养条件的影响：培养法的灵敏度容易受到培养基和培养条件的影响，如果培养条件不适宜，可能导致支原体无法生长或生长缓慢，从而检测不到。

5. 支原体种类问题：不是所有的支原体种类都能通过培养法检测到，某些特定种类的支原体可能无法在常用的培养基中生长，导致漏检。

支原体检测的样本既可以是细胞，也可以是培养基。在细胞培养中，支原体污染是常见的问题，因此需要对细胞和培养基进行检测。细胞库、病毒种子批、对照细胞以及临床用细胞等都需要进行支原体检查，这通常包括培养法和指示细胞培养法（DNA染色法）。同时，病毒类疫苗的病毒收获液、原液也采用培养法检查支原体，必要时，也可以采用指示细胞培养法筛选培养基。

此外，支原体检测的培养基推荐使用支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基等，这些培养基可用于检测药品和生物制品中的支原体。在进行支原体检测时，需要取培养物样品接种到适宜支原体生长的微生物培养基或琼脂平板上。

因此，支原体检测的样本既可以是细胞，也可以是培养基，具体取决于检测的目的和方法。

细胞培养支原体污染怎么检测？

支原体污染是细胞培养中普遍的问题之一，细胞库中或正在使用的细胞中，支原体的污染率约为15%-35%。并对培养细胞的生理和代谢造成诸多影响：

01/ 争夺营养：支原体的污染会阻碍细胞生长和增殖

02/ 改变蛋白质、RNA 或 DNA 合成的水平

03/ 改变基因表达、细胞信号传导和形态

04/ 损害膜和细胞器

05/ 导致突变和染色体变化

06/ 时间、金钱和有价值的细胞丢失：支原体的污染会导致严重的经济损失以及研究时间损失

07/ 实验结果的不可靠性

08/ 生物安全问题

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细胞培养中支原体污染的后果？广州细胞支原体污染

细胞培养中，支原体检测的重要性体现在以下几个方面：

1. 高污染发生率：支原体对培养细胞的污染发生率非常高，据估计平均发生率在60%左右。

3. 隐匿性强：支原体污染具有很高的隐匿性，早期不容易被发现，除非使用特异性和灵敏度都非常高的专业检测试剂盒。

3. 影响实验结果：支原体污染会改变细胞的生理性质，影响实验结果的准确性。细胞培养物一旦被支原体污染，会改变细胞DNA、RNA及蛋白表达，导致实验数据不准确、不稳定。

4. 难以通过肉眼或常规方法发现：支原体污染无法通过肉眼检查细胞来发现，也不能通过向培养基中加入抗*素控制。

5. 对细胞培养数据可靠性的影响：支原体污染会降低细胞系的有效性，使得细胞培养数据失去可靠性，无法为生命科学研究提供有意义的数据。

6. 预防和控制污染的必要性：定期进行支原体检测是细胞培养实验室进行自我质量监控的必要组成部分，有助于及时发现并控制污染，保证实验的准确性和重复性。

7. 避免细胞株受损：支原体污染可能导致细胞株受损，影响细胞株的质量和研究价值。及时检测和清*支原体污染有助于保护珍贵的细胞资源

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将洗涤后的细胞悬浮在适量的PBS中，取一部分细胞悬液放入无菌离心管中。在取样过程中，要保持操作的轻柔与稳定。避免产生过多的气泡或剧烈晃动，防止对细胞造成机械损伤或引入不必要的污染。同时，为了提高检测结果的准确性，可以进行多次取样。例如，从不同的培养瓶或培养板中分别取样，或者在同一培养容器的不同位置进行取样。取样完成后，要尽快将样本送往检测实验室。在运输过程中，要确保样本的稳定性和安全性。可以使用冷藏或保温设备，根据检测要求保持合适的温度条件。总之，细胞支原体检测的取样环节需要严格遵循无菌操作原则，精心准备、准确操作。只有这样，才能获取具有代表性的样本，为准确检测支原体污染提供可靠的依据。支原体...

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