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腰椎间盘突出是造成全球大部分地区工作缺失和活动受限的主要疾病,随着日常生活节奏的不断加快,腰椎间盘突出症已经成为临床脊柱外科的常见病和多发病,而且发病人群越来越呈现年轻化及普遍化的趋势。该病主要是由于腰椎长期的受力不均或突然性外伤,导致腰椎纤维环出现变形、破裂,纤维环、髓核及软骨终板单独或同时外突,...
并进质粒抽提。GAG质粒和VSV质粒同样可以转化至感受态细菌DH5α中,并进行无内质粒抽提。质粒抽提后冷冻于-20℃保存。2、慢病毒包装1)使用DMEM完全培养基培养6cm皿HEK293T至汇合度为70~80%。采用opti-MEM和Lipo3000分别转染含有目的基因的pMSCV-eGFP、VSV...
细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的ji活、表达以及调控等的作用,它并不是bing理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。上海东寰为您分享细胞凋亡与细胞坏死的区别。细胞凋亡与程序性死亡其实从严格的词学意义上来说,...
也可以挑去单克隆细胞株进行进一步培养,以得到满意的稳定表达目的基因的细胞株。6)使用qRT-PCR和Westernblot的方法检测目的基因的表达量和蛋白水平是否显著提高。7)由此可得三组细胞株:a.正常细胞株;b.空载病毒载体的细胞株;c.过表达目的基因的病毒载体的细胞。8)在后续培养传代该稳转细...
在温度37℃中培养24h左右,然后观察其形态,颜色等变化。除此之外,平行设置两个稀释度培养基,步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生物可以分散为单个细胞,然后进行一定环境条件下培养,直到其长成菌落为止,然后进行计算大肠杆菌的数量,通过稀释度和样本数量进行计算。免疫磁珠法该分离技术的主要原理是以磁珠为载体...
APOE-/-鼠左颈动脉结扎糖尿病模型目的:用APOE-/-鼠做左颈动脉结扎后注射STZ造糖尿病模型一、材料:动物:APOE-/-鼠;试剂:STZ、柠檬酸缓冲液;器械:眼科剪、眼科弯镊、眼科剪、手术剪、手术镊、6-0非吸收缝合线、4-0缝合线;二、颈动脉结扎模型建立:APOE-/-鼠做左颈动...
防止有Matrigel流经上孔而留下残留胶;3、需要按照细胞的生长速度定时采集图像,并且对其成管长度、覆盖面积、成环数和结点进行测量和记录,并且对其进行统计分析;4、分上下孔的ibidi血管生成载玻片能去除凹液面,使成像效果更好。(Matrigel铺在下孔,细胞铺在Matrigel上,上孔充满培养基...
如发生与发展、抗原呈递、免疫调节、组织愈合等。此外,外泌体与疾病的研究表明:外泌体可能在代谢性疾病的出现以及心血管健康中发挥作用。外泌体生物发生和神经元细胞中分泌小泡的调节之间的交集为外泌体和神经退行性疾病的发病机制之间假定的联系提供了新的见解。与研究外泌体在其他疾病中的作用相比,外泌体在中的研究进...
在温度37℃中培养24h左右,然后观察其形态,颜色等变化。除此之外,平行设置两个稀释度培养基,步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生物可以分散为单个细胞,然后进行一定环境条件下培养,直到其长成菌落为止,然后进行计算大肠杆菌的数量,通过稀释度和样本数量进行计算。免疫磁珠法该分离技术的主要原理是以磁珠为载体...
动物模型名称:酒精诱导的肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:150g-160g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:用酒精诱导法。大鼠每天按10mL/kg体重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每...
其中可以看出手术侧后爪的缩足阈值较手术前及对侧后爪有***降低,且标准误区间非常小。图4是表1的数据通过曲线图的方式展现。结果显示:大鼠在术后***天即出现手术侧后爪敏感,施加轻微的重量(4g左右)都会引起缩足表现,这说明其痛阈明显降低,对轻微的刺激均呈现抬脚,舔舐后足等痛觉过敏表现。这种表现维持至...
防止有Matrigel流经上孔而留下残留胶;3、需要按照细胞的生长速度定时采集图像,并且对其成管长度、覆盖面积、成环数和结点进行测量和记录,并且对其进行统计分析;4、分上下孔的ibidi血管生成载玻片能去除凹液面,使成像效果更好。(Matrigel铺在下孔,细胞铺在Matrigel上,上孔充满培养基...
进而使一些生长因子受体磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周龄雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮肤。在DMBA涂抹一周后,每周两次将TPA(40nmol)施用到相同部位。模型验证:几周后,小鼠背部皮肤上出现色素沉着斑点。组织学研究表明,小鼠真皮组织中色素细胞...
动物模型名称:腹主动脉缩窄致心衰大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:采用主动脉缩窄法建立模型大鼠麻醉后,仰卧位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中线切开皮肤及肌层,分离出腹主动脉,在肾动脉上方...
上海东寰生物科技有限公司模型特点:造模时的致敏激发的时间间隔、剂量和频次不尽相同,通常获得的是嗜酸细胞性。若要研究其他表型的,需要调整剂量、改变流程或者添加LPS等试剂。COPD动物模型1.诱导模型实验动物:小鼠、豚鼠、大鼠造模试剂:烟雾、空气污染物及有害气体(PM2.5、臭氧、二氧化氮)、脂多糖、...
细胞鉴定服务细胞鉴定服务(DH0007)一、服务介绍为了后续实验成功进行,我们对分离培养的细胞做一个细胞鉴定实验。细胞鉴定实验包括形态学鉴定、免疫组织细胞化学鉴定(免疫荧光化学鉴定)、流式细胞仪鉴定二、服务内容及价格服务编号服务内容服务价格服务周期(工作日)DH0007-1免疫组织细胞化学鉴定(免疫...
原理过表达稳定细胞系(OverexpressionStableCellLines)的构建利用慢病毒转染、电转等技术手段将特定的基因序列整合到宿主细胞的染色体上,使得目的基因能够在宿主细胞内长期且稳定的表达。用途基因功能研究、免疫/杀伤/增殖等、抗体药物的活性筛选(细胞水平的结合和阻断)、CAR分子的...
建议按照2×106每孔的数量将293T细胞均匀铺入。(2)第二天:在24小时之内,观察293T细胞的汇合度在90%~95%之间时,向其中加入DNA-脂质体复合体,DNA-脂质体复合体制备方法如下:a)轻轻混匀LipoMax,根据说明书加入相应量于500µlOpti-MEM无血清培养基中,混合均匀并置...
然后立即把细胞转移至提前准备的装有5-10ml预热的完全培养基的15ml离心管中;4、离心,小心移除上清;5、加入5ml预热完全培养基,吹打重悬细胞,然后把细胞悬液转移至T25培养瓶中,并放入二氧化碳培养箱(5%CO2,37℃)中培养;6、第二天观察细胞的贴壁情况,并进行换液。注意事项细胞复苏操作要...
具体选用何种培养器皿取决于细胞生长密度需求(启动正常生长所需的密度)。二.细胞换液培养1、全量换液:把所有的旧培养液移除,加入新的培养液(加入培养基的量根据细胞的密度和生长速度);2、半量换液:把旧培养液移至15ml离心管中,然后在培养器皿中加入适量新培养基(避免细胞离开培养液太久),把装有旧培养液...
流式细胞检测工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代先进的细胞定量分析技术之一,下面就由上海东寰给大家简要介绍。光源、液流通路、信号检测传输和数据...
并进质粒抽提。GAG质粒和VSV质粒同样可以转化至感受态细菌DH5α中,并进行无内质粒抽提。质粒抽提后冷冻于-20℃保存。2、慢病毒包装1)使用DMEM完全培养基培养6cm皿HEK293T至汇合度为70~80%。采用opti-MEM和Lipo3000分别转染含有目的基因的pMSCV-eGFP、VSV...
细胞迁移和侵袭实验细胞迁移和侵袭技术服务(DH0004)一、服务介绍细胞迁移\侵袭是指细胞在接收到信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动,常采用Transwell的方法。Transwell实验主要材料是transwell小室,嵌套的底层为一张带着微孔的膜,孔径大小为8-12um。细胞侵袭实验需在膜...
细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的ji活、表达以及调控等的作用,它并不是bing理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。上海东寰为您分享细胞凋亡与细胞坏死的区别。细胞凋亡与程序性死亡其实从严格的词学意义上来说,...
细胞生命的终结有许多种方式,凋亡只是其中一种,所以要确保自己检测到的的确是凋亡信号。上海东寰为您分析细胞凋亡的检测方法!细胞凋亡的检测方法也有多种,如形态学检测、磷脂酰丝氨酸外翻分析(AnnexinV法)、线粒体膜势能检测、DN***断化检测、TUNEL法及Caspase-3活性检测等,可根据自己的...
细胞周期和凋亡技术服务(DH0003)一、服务介绍细胞周期(CellCycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G...
注意事项1.病毒包装的几个关键点主要包括:细胞因素、载体系统(尽量使用成熟的商业化载体系统)、构建重组的质粒正确与否、质粒抽提纯化情况、包装转染控制(24、48小时的细胞及荧光状态判断)、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等都会影响到是否能包装成功)。,需要观察包装病毒后的48...
而且因为有5条定位线,与划痕相交,这样就有10个可固定监测点,不作重复,误差也很小。2、如果你连续监测24小时,你需要考虑到划痕缩小是细胞迁移和细胞繁殖共同作用的结果,而不是单纯的细胞迁移。如果你要单纯的考虑细胞迁移,你可以先用丝裂霉素(1ug/ml)处理一小时,抑制细胞的分裂,这样你的结果就是细胞...
防止有Matrigel流经上孔而留下残留胶;3、需要按照细胞的生长速度定时采集图像,并且对其成管长度、覆盖面积、成环数和结点进行测量和记录,并且对其进行统计分析;4、分上下孔的ibidi血管生成载玻片能去除凹液面,使成像效果更好。(Matrigel铺在下孔,细胞铺在Matrigel上,上孔充满培养基...
细胞转染技术服务细胞转染实验技术服务(DH0002)一、服务介绍细胞转染(Transfection)是指将DNA或者RNA导入真核细胞中的过程。转染的目的是产生重组蛋白,或特异性增强或控制转染细胞中的基因表达。常规转染技术可以分为两大类,一类为瞬时转染,一类为稳定转染(构建稳定细胞株)。二、服务内容...