潮霉素 B使用方法：一、 储存液的配制（50mg/ml）称取1 g 潮霉素B（CH6362）用PBS（0.01 M）溶液或去离子水溶解，定容20ml。0.22μm滤器过滤除菌，分装于无菌冻存管，2-8℃冷藏，1年内稳定。或直接选购潮霉素B溶液（50mg/ml，CH6361）二、 工作浓度的筛选：潮霉素B用来筛选的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于开始次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定较佳筛选浓度。一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg...

检测试剂盒变质的原因：样本因素。标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。操作因素。标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。为保证溶质尽可能全部转移到容量瓶中，应用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒并将每次洗涤后的溶液都注入到容量瓶中。GUS染色液如何判断是否是基质效应呢？第一种方法是采用线性稀释，一般来...

G418溶液是什么：G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一种氨基糖苷类 ,这种氨基糖类的结构和新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似，在分子遗传试验中,是稳定转染常用的抗性筛选试剂。它通过克制转座子Tn601，Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生东西,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为ｍＲＮＡ ,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的表达 ,使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。Ｇ418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、...

人外周血单核细胞（PBMC）分离：PBMC（peripheral blood mononuclear cell），外周血单个核细胞，顾名思义，其主要细胞类型为血液里边具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞（Ｔ/Ｂ），单核细胞，吞噬细胞，树突状细胞和其他少量细胞类型。其中淋巴细胞占很大一部分。分离ＰＢＭＣ的主要目的是为了将多核细胞和红细胞去除，收集单个核细胞，从而能够很方便地模拟体外的血液免疫环境。脐带血单个核细胞（MNC）分离脐血是指胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血液，含有丰富的干细胞和祖细胞，主要包含造血干细胞和间充质干细胞。脐血MNC能治好多种病种，包括：神经系统疾病，呼吸系统疾病，...

Laemmli 加样缓冲液(2×)是一种以溴酚蓝为染料的 2 倍浓缩的蛋白上样缓冲液，主要 由 2-ME、SDS、溴酚蓝、Laemmli 分层缓冲液等组成，可用于不连续蛋白电泳的上样。 组成： 编号 名称 PE0005 5ml Storage Laemmli 加样缓冲液(2×) 使用说明书 4℃ 1份 操作步骤(光供参考)： 1、 取适量的蛋白样品和 Laemmli 加样缓冲液(2×)等量混合，充分混匀。 2、 直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。 3、 通常电泳至蓝色染料到达 PAGE 胶的底部附近即可停止。 注意事项： 1、 Leagene Laemmli 加样缓冲液(2×)中含...

配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着，是为了保持其原有的ph电势平衡不变，为了测量时会更加精确。这里面就是PH电极的保护液，即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己学会如何配置，使ph电极浸泡在保护液里，这样就能快速回复其活性，又能很好的测量了。配制ph计保护液——3mol/L的KCL溶液步骤： 1、计算：KCL摩尔质量74.5g/moL, 则KCL质量＝3mol×74.5g/mol=223.5g； 2、 称量：用分析天平称量KCL=223.5g，注意分析天平的使用； 3、 溶解：在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解，并用玻璃棒搅拌； 4、...

试剂盒实验技巧：浓洗刷液或许会有结晶分出，检测试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响效果。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，核算时请后乘以稀释倍数（×5×n）。各步加样均应运用加样器，并经常校正其正确性，以避免实验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数目多，举荐运用排加样。封板膜只限一次性运用，以避免交叉污染。严格按照说明书的操作进行，检测试剂盒实验效果断定有必要以酶标仪读数为准。BMC原代分离步骤：小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层，尽量全部吸出单个核细胞。甲基绿指示剂(0.1-2.0)检测试剂盒以免疫学反应为根...

具体的检测试剂盒规矩说明操作方法：汲取液体时要选用量程和需求量接近的微量加样器吸，减少差错。液体悉数参加酶标孔后，将酶标板放在桌子上平行悄悄摇晃30s，检测试剂盒使液体充沛混合均匀，也使其得到充沛的反应。孵育时要使盖板膜封好酶标板，避免水分蒸腾，以防曲线不成线性。试验前的30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出，使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同，酶标板只要取出所需量。因为底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。手工洗板时每次参加洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，避免交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。液体试剂分散度大，...

用pH计测定配制好的盐溶液的pH值，使其在6.4~7.0之间。一般盐雾标准中要求试验过程中的盐雾收集液pH值在6.5~7.2之间。当pH值不在上述范围时，应用氢氧化钠（NaOH）或者冰乙酸（CH3COOH）进行调节。氢氧化钠可以使pH值升高，冰乙酸使pH值降低。通常只需要加入少量的即可调节pH值。在氯化钠溶液中加入少量冰乙酸，搅拌均匀，并用pH计测量溶液的pH值，直至其为3.0-3.1之间，试验过程中收集液的PH值应在3.1-3.3之间。配制好乙酸盐雾溶液后，加入氯化铜，其浓度为0.26g/L±0.02g/L（即0.205g/L±0.015g/L无水氯化铜）。调节溶液的pH值，直至其为3.0-...

缓冲溶液的缓冲能力：在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱，其溶液pH值变化不大，但若加入酸，碱的量多时，缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· 　 L-1NaAc组成的缓冲溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大，否则，不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH较小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较...

检测试剂盒以免疫学反应为根底，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗刷除去剩余的游离反应物，从而确保试验结果的特异性与稳定性。运用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入，再与HRP符号的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过完全洗刷后加底物TMB显色。检测试剂盒TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)...

检测试剂盒样品收集:血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒液试管。血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，血脂高样品。组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆...

检测试剂盒操作注意事项：检测试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。所有液体组分使用前充分摇匀。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。一般盐雾标准中要求试验过程中的盐雾收集液pH值在6.5~7.2之间。氯化铵缓冲液(0.2mol/L,pH8.0-10.0)如何降低检测...

检测试剂盒说明：检测原理：选用双抗体夹心ABC-法。试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频频运用时)。浓洗刷液低温保存会有盐分出，稀释时可在水浴中加温助溶。中、英文说明书或许会有不一致之处，请以英文说明书为准。刚敞开的酶联板孔中或许会含有少量水样物质，此为正常现象，不会对实验效果形成任何影响。检测试剂盒优势：活络、特异的抗体；安稳的重复性和可靠性；吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；适用血清、血浆、安排匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型。普遍使用液体试剂的基本原理，因此液体试剂在药剂学上的应用具有普遍意义。封闭用脱脂奶粉加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段...

DC细胞诱导：1) 将收集的PBMC在1640培养基，在37 ℃、5 % CO2条件下在培养板培养4h。2) 轻轻吸取上清，收集贴壁细胞，加入含15%血清，100ng/ml rhGM-CSF、100ng/ml rhIL-4的1640培养基，培养5～7d获得未成熟DC，用25ng/ml hTNF-α刺激2～3天，获得成熟DC。3) 用倒置显微镜观察细胞形态，至细胞毛刺样突起，有典型DC形态悬浮细胞。注意事项：细胞较好在细胞贴壁注：分离后细胞较好在贴壁后当天换液（贴壁细胞贴壁能力很弱，润洗时轻柔），过夜后部分细胞漂浮，细胞得率减少。固体试剂的取用:药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净。IP...

用亚甲基蓝溶液染色后，被染为深蓝色的部分是（细胞核）亚甲基蓝可以结合核酸，使细胞核呈蓝色。 台盼蓝能使死细胞着色机理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中较常用的死细胞鉴定染色方法之一。DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。人工汗液(碱性,AATCC 15-2002)试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一，但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性...

检测试剂盒用途：运用定性夹心免疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是我国型HEV毒株主要氨基酸序列中抗原性很强的肽段，别离来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品参与孔中并孵育，如果其间存在HEV IgM抗体，这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除掉其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后参与羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与*次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合，洗板除掉未结合的酶结合物，参与TMB底物溶液，在第三次孵育时会发作酶-底物反响，只要那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所构成的...

检测试剂盒样品收集:血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒液试管。血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，血脂高样品。组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆...

盐酸金霉素溶液(Chlortetracycline,5mg/ml) 简介： 金 霉 素 (Chlortetracycline) 又 称 氯 四 环 素 ， 是 Benjamin Dugga 从 Streptomyces aureofaciens 金色链霉菌(Streptomyces aureofaciens) 分离出来的一种四环素类。 CAS 号为 57-，分子量为 478.88。金霉素抑菌原理在于与 tRNA 竞争性结合，从而克制蛋 白质合成。临床上，金霉素可以用于革兰阳性菌如金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌的传染 以及沙眼的治好 组成： 编号 名称 CA0105 Storage Chlorte...

检测试剂盒变质的原因：样本因素。标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。操作因素。标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。检测试剂盒汲取液体时要选用量程和需要量挨近的微量加样器吸。TCA(5%w/v)标准物质的正确使用:不确定度表示被测量值的分散性，不同的标准物质其特性的不确定度也不同。在选...

冬季检测试剂盒的正确保存：血清标本如是以无菌操作别离，则可以在2～8℃下保存一周，检测试剂盒如为有菌操作，则主张冰冻保存。样本的长期保存，应在-70℃以下。冰冻保存的血清标本须留心避免因停电等构成的重复冻融。检测试剂盒标本的重复冻融所发作的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发作损坏效果，然后引起假阴性效果。此外，冻融标本的混匀亦应留心，不要进行剧烈振动，重复倒置混匀即可。标本在保存中如出现细菌污染所造成的的混浊或絮状物时，应离心沉积后取上清检测。试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的试验确诊方法。因为其试剂安稳、易保存，操作简便，效果判别较客观等要素，已普遍应用在免疫学查验的各领域中。检测试剂...

缓冲溶液的缓冲能力：在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱，其溶液pH值变化不大，但若加入酸，碱的量多时，缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· 　 L-1NaAc组成的缓冲溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大，否则，不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH较小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较...

如何正确保存和使用pH缓冲溶液：缓冲溶液配制后，应装在玻璃瓶或聚乙烯瓶中（碱性pH缓冲液，如，pH=9.18、pH=10.01、pH=12.46等，应装在聚乙烯瓶中）瓶盖严密盖紧，在冰箱中低温(5～10℃)保存，一般可使用六个月左右，如发现有混频器浊，发霉或沉淀现象，不能继续使用。使用时，应准备几个50mL的聚乙烯小瓶，将大瓶中的组冲溶液倒入小瓶中，并在环境温度下放置1～2个小时，等温度平衡后再使用。使用后不得再倒入大瓶中，以免污染，瓶中的缓冲溶液在＞10℃的环境条件下可以使用2～3天，一般pH=7.00、pH=6.86、pH=14.00三种溶液使用时间可以长一些，pH=9.18和pH=10....

科研实验中试剂取用应注意事项：1. 固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的.一支药匙不能同时取用两种或两种以上的试剂.药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净,以备下次使用.药匙的两端为大小两匙,取固体量较多时用大匙,较少时用小匙。2. 取用不定量(较多)液体——直接倾倒a. 瓶塞必须倒放在桌面上【防止药品腐蚀实验台或污染药品】；b. 直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口，试管45度，并且缓缓地倒【防止药液损失】；c. 贴标签的一面必须朝向手心处【防止药液洒出腐蚀标签】；d. 倒完液体后，要立即盖紧瓶塞，并把瓶子放回原处，标签朝向外面【防止药品潮解、变质】。利福平溶液怎么配制：过滤灭菌...

检测试剂盒的选择方法：1、特异性：检测试剂盒的特异性与检测试剂盒的要害组分，抗体对有关。若抗体对中为多抗，另一个有必要为单抗，建议运用双单抗。挑选一个好的检测试剂盒，咱们首先要考虑的就是特异性。2、灵敏度：检测试剂盒的好坏往往就取决于灵明度的高低，因而灵敏度也是咱们挑选检测试剂盒的一个重要技术参数。灵敏度反映的是检测试剂盒检出被检物质的量的才能，用户可根据自己样本中待检目标的量挑选合适的检测试剂盒，假如待检目标量很低，一般的检测试剂盒不能满足要求，可挑选高敏的检测试剂盒。3、重复性：科学实验讲究重复性，一般检测试剂盒，其板内和板间变异系数应该控制在 15% 以内。注意ELISA检测试剂盒保存期...

丁胺卡那霉素功能与主治：①本品适用于绿脓杆菌及其他假单胞菌属、大肠杆菌、变形杆菌（吲哚阳性和吲哚阴性）、普鲁威登菌、克雷伯菌、肠杆菌、沙雷菌属、不动杆菌属与葡萄球菌属等所致的菌血症、细菌性心内膜炎、败血症（包括新生儿脓毒症）、呼吸道传染、骨关节传染、神经系统传染（包括脑膜炎）、皮肤软组织传染、胆道传染、腹腔传染（包括腹膜炎）、烧伤、手术后传染（包括血管外科手术后传染）及复发性尿路传染等。②阿米卡星不宜用于单纯性尿路传染初治病例，除非致病菌对其他毒性较低的克菌药均不敏感。③阿米卡星对大部分氨基糖苷类纯化酶稳定，故适用于治好革兰阴性杆菌中卡那霉素、庆大霉素或妥布霉素耐药菌株，尤其如普鲁威登菌属、粘...

在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱，其溶液pH值变化不大，但若加入酸，碱的量多时，缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc组成的缓冲溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大，否则，不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。当加入一定量...

用亚甲基蓝溶液染色后，被染为深蓝色的部分是（细胞核）亚甲基蓝可以结合核酸，使细胞核呈蓝色。 台盼蓝能使死细胞着色机理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中较常用的死细胞鉴定染色方法之一。利福平不能经血液透析或腹膜透析除去。常规甘油封片剂检测试剂盒实验经验分析：吸取液体时，要用量程和需要量接近的去吸，减少误差。将液体加到酶标孔中时，避免头和孔内液体接触，可使头上的液滴和...

检测检测试剂盒注意事项：检测检测试剂盒保存在2-8℃，运用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗刷液会有结晶，这归于正常现象，水浴加热使结晶彻底溶解后再运用。试验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。严厉按照阐明书中标明的时刻、加液量及次序进行温育操作。所有液体组分运用前充分摇匀。检测检测试剂盒搜集：标本搜集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验，若不能马上进行实验，可将标本放于-20℃保存，但应防止反复冻融。从试剂瓶取用试剂，用左手持量筒（或试管），并用大姆指指示所需体积刻度处。普鲁士蓝染色液(沙黄法)检测试剂盒标本保存方法：标本凝集不全。在没有促凝剂和抗凝...

检测试剂盒具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点，而且因为一日之内能够检查几百乃至上千份标本，因此在生物医学各领域的使用规模日益扩展。在检测试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在检测试剂盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并注意不行溅出，不行产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规则的量参加板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。PH电极的保护液，即 3mol/L的KCL溶液。维生素B2检测试剂盒(荧光光度法)盐酸金霉素溶液(Chlortetracycline,5mg/ml) 简介： 金 霉 素 (Chlo...