有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚6μm,常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8~10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明,中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测,医学实验,动物模型构建。天津哪家做病理实验外包病理实验外包,病理染色常...
病理实验外包,染色常见染色介绍天狼星红染色:主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成,主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚6μm,常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8~10min。6、流水冲洗...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍茜素红染色:茜素红S(AlizarinRedS)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的**而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。普遍用于骨细胞或组织病理生理的研究。茜素红S是橙黄色的针状体。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素经发烟硫酸磺化,然后转变为钠盐制得。属一种蒽醌(Anthraquinone)类的衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与钙盐以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍普鲁士蓝染色:普鲁士蓝染色(Prussianbluereaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁**钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁**钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁**钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁**物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁**物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。Perlsstain常...
●原因:①组织脱水,透明不够。②浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明时间不够,或组织中含有乙醇等,石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。④二甲苯使用时间过久。●解决方法:①必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③脱水,透明渗蜡不够,应重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再进行渗蜡包埋。④更换二甲苯。2.切片皱褶太多且不能完全展开●原因:①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。③组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。●解决方法:①可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片...
病理实验外包,病理染色HE染色:在组织病理学中,苏木素-伊红染色是一种日常使用比较***的常规染色方法。常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。伊红是比较常用的胞质染料,本身溶于醇而不溶于水,为砖红色粉末状或酱红色结晶。配方:伊红Y(水溶)0.5-1g,蒸馏水99ml。如果取用伊红Y(醇溶性)应当溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊红液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色过程,使得胞质的色泽更加艳丽。结果是细胞核呈蓝色,胞质、肌肉、结缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种微生物也...
病理实验外包,病理染色免疫组化染色的分类:1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(***)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍透射电镜检测:通过电子束穿透细胞和组织,从而可以观察细胞内的超微结构。其放大倍数更大,真空要求也更高。透射电子显微镜可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2nm的亚显微结构或超微结构。电子显微镜技术的应用是建立在光学显微镜的基础之上的,光学显微镜的分辨率为0.2μm,透射电子显微镜的分辨率为0.2nm,也就是说透射电子显微镜在光学显微镜的基础上放大了1000倍。透射电镜的电子束通过样品后由物镜成像于中间镜上,再通过中间镜和投影镜逐级放大,成像于荧光屏或照相干版上,分辨细微物质结构;能在看到表面的图像的同时也看到内层物质。用于******电镜检查的标本必须制成...
病理实验外包,南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1. 冰冻切片室温晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时(此步可不洗)。2. 滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液(抗体的量视组织大小而定,原则是可以均匀覆盖组织面,且保证整个过程中不会使组织干涸)。3. 将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒,室温孵育2小时或4℃过夜。4. 第二天先将湿盒放到37℃回温1 h,然后吸取片上的一抗进行回收,将切片插入到小染缸PBS冲洗。5. 滴加用PBS稀释好的二抗(避光)置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗,切片置于染缸内,PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI...
病理实验外包比较常见的病理染色实验是免疫组化染色,用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,***通过显色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。免疫组化的特...
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片弯曲且不能形成直带●原因:①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。●解决方法:①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。③修整组织块时,注意修切整齐。④移动切片刀,更换刀口位置。2.切片上出现裂纹●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质,如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。●解决方法:①切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质...
病理实验外包,病理染色肌肉组织染色1.横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌2.早期心肌病变组织染色(1)Nagar-Olsen染色法(1974年)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核(2)Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测-南京英瀚斯-第三方检测机构。贵州生物病理实验外包实验室病理实验外包,病...
病理实验外包,病理染色荧光原位杂交技术详细介绍1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。它的基本原理是:如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的,二者经变性-退火-复性,即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛,可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的**化学反应,经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。2、实验流程FISH样本的制备→探针的制备→探针标记→杂交→(染色体显带)→荧光显微镜检测→结果分析。3...
病理实验外包比较常见的实验是免疫组化染色,免疫组织化学的突出优点。1.高度的特异性:抗原--抗体反应是特异性比较强的反应之一。免疫组织化学所用的抗体必须是特异性强的多价或单价抗体,具有高度的识别能力,在抗原识别上可达到单个氨基酸的水平。2.敏感性高:现代免疫组织化学采用各种有效方法比较大限度保存细胞或组织内待检物质的抗原性,或采用各种增敏方法,或使用高敏感、高亲和力的抗体等手段,保证可检出细胞内超微量的抗原成分,用显微镜观察结果。因此,它是在细胞、分子水平或基因水平的检测技术。3.方法步骤统一:若掌握一种基本的技术操作方法步骤,则一通百通。4.形态、机能和代谢密切结合:免疫组化是一种综合性检测...
病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖...
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片粘在切片刀不易取下●原因:切片时有静电作用,产生静电吸引,在冬季或气候干燥时常出现这种情况。●解决方法:可用加湿器。以增加空气中的水分,而减少静电作用。2.切片厚薄不均●原因:①切片微动部分失灵,齿轮跳格。②蜡块太大,过硬,转动时刀刃受震动。●解决方法:①修理切片机失灵的部分,调整螺旋。加机油润滑零件,必要时需请专业技术人员调整切片机。②如蜡块过大,以后取材时注意取材的大小。蜡块组织过硬,可返回水中浸泡,再重新脱水和包埋。病理实验外包检测,动物模型 - 南京英瀚斯生物提供小鼠模型.**模型.病理实验外包检测。生物病理实验外包价格病理实验外包...
病理实验外包比较常见的实验是免疫组化染色,免疫组织化学的突出优点。1.高度的特异性:抗原--抗体反应是特异性比较强的反应之一。免疫组织化学所用的抗体必须是特异性强的多价或单价抗体,具有高度的识别能力,在抗原识别上可达到单个氨基酸的水平。2.敏感性高:现代免疫组织化学采用各种有效方法比较大限度保存细胞或组织内待检物质的抗原性,或采用各种增敏方法,或使用高敏感、高亲和力的抗体等手段,保证可检出细胞内超微量的抗原成分,用显微镜观察结果。因此,它是在细胞、分子水平或基因水平的检测技术。3.方法步骤统一:若掌握一种基本的技术操作方法步骤,则一通百通。4.形态、机能和代谢密切结合:免疫组化是一种综合性检测...
病理实验外包,样品保存和寄送注意事项一、取材注意事项1.取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。2.切片材料应根据需要观察的部位进行选择,尽可能不要损伤所需要的部分。二、固定注意事项1.一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。2.有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。3.固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1~2次新液。4.材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,并随同材料在溶...
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片弯曲且不能形成直带●原因:①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。●解决方法:①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。③修整组织块时,注意修切整齐。④移动切片刀,更换刀口位置。2.切片上出现裂纹●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质,如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。●解决方法:①切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍尼氏染色:神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代替粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以只突出尼氏物质,也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。各种神经细胞内都含有尼氏体,但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中,但不在于轴突和胞体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化,尼氏体是神经元内蛋白质合成的重要部位,当神经元受到刺激后,胞体内的尼氏...
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片弯曲且不能形成直带●原因:①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。●解决方法:①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。③修整组织块时,注意修切整齐。④移动切片刀,更换刀口位置。2.切片上出现裂纹●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质,如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。●解决方法:①切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质...
病理实验外包,病理染色组织的取材和要求:知识点1:对送检组织标本的要求送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入4%中性缓冲甲醛溶液中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的,应当在送检单上注明,有特殊要求(如细菌培养、解释道化学分析等)应当事先联系,并且在标本未固定前进行处理。知识点2:组织取材要求在对送检组织标本进行详细检查的基础上,根据诊断的需要,确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记,以便镜检时核对。另外,尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影,并编号存档南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测需要...
病理实验外包,病理染色HE染色常见问题:Q5:细胞核呈棕红色改变答:苏木素染液过度氧化;或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8),或在稀释的氨水溶液,或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡,这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6:伊红染色较淡答:伊红的PH改变了(PH可能已大于5);或反蓝液体未漂洗干净,残留后影响胞浆嗜酸性染色;或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策:检查伊红染色液PH,可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示,调整实验步骤。病理实验外包检测-南京英瀚斯-第三方检测机构。湖北生物病理实验外包实验室病...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍VonKossa染色:简介:钙结节的形成为成骨细胞特有,Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法,利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐,在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→Vonkossa染**(钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色;或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,背景呈红色)。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积,由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于...
病理实验外包,病理染色胶原纤维染色法1.VanGieson(V.G)***-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核2.天狼星红(Siriusred)***染色法红色:胶原纤维绿色:细胞核黄色:其他另:天狼星红***染色法:(偏光显微镜)Ⅰ型:强双折光性,呈黄色或红色纤维Ⅱ型:弱双折光,呈多种色彩疏网状分布Ⅲ型:弱双折光,呈绿色的细纤维Ⅳ型:弱双折光的基膜,呈淡黄色 公司自建有标准的细胞培养房,配备有生物安全柜、超净工作台、三气细胞培养箱、二氧化碳细胞培养箱、荧光倒置显微镜、体视镜、酶标仪、流式细胞仪等设备。病理实验外包,真实靠谱的公司南京英瀚斯。山东组织病理实验外包...
有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚6μm,常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8~10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明,中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包所需样本如何保存。广东真实病理实验外包公司病理实验外包,病理染色切片常见问题...
病理实验外包组织切片包含以下服务:1.石蜡包埋及切片:石蜡切片(paraffinsection)的基本原理是用固定剂石蜡固定组织、细胞以及各种亚细胞器,保持组织微细结构,制成薄片,并用不同的染色方法增加各部分色差,在显微镜下观察组织、细胞的形态结构,或利用化学或物理方法显示组织、细胞内的某些化学成分,并可进行形态和化学成分的定量分析。2.冰冻包埋及切片:冰冻切片(frozensection)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法,能够较完好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶活性以及抗原免疫活性。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。电镜检测,病理...
病理实验外包,病理染色HE染色常见问题:Q3:细胞核染色过浅,颜色暗淡答:切片在苏木素染液中停留过短,或苏木素过度氧化失效,或分化时间太长。对策:重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液,每个3-5min即可,接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h,自来水冲洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h,自来水冲洗10min染色。Q4:细胞核染色过深,胞浆着蓝色答:切片在苏木素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好...
病理实验外包,南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1. 冰冻切片室温晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时(此步可不洗)。2. 滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液(抗体的量视组织大小而定,原则是可以均匀覆盖组织面,且保证整个过程中不会使组织干涸)。3. 将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒,室温孵育2小时或4℃过夜。4. 第二天先将湿盒放到37℃回温1 h,然后吸取片上的一抗进行回收,将切片插入到小染缸PBS冲洗。5. 滴加用PBS稀释好的二抗(避光)置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗,切片置于染缸内,PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI...
病理实验外包,病理染色组织样本保存液多聚甲醛的配置:4%多聚甲醛固定液(4%ParaformaldehydeFixSolution,4%PFAFixSolution)是一种普遍用于免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)、免疫荧光(Immunofluorescence,IF)、免疫细胞化学(Immunocytochemistry,IC)、流式分析(Fluorescence-activatedcellsorting,FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。织学上,4%的多聚甲醛穿透力强,固定均匀,能使组织硬化,有利于切片。该固定剂造成的组织收缩少,损伤小,...