原代肝细胞的来源供体来源很多。鉴于人原代肝细胞存在数量稀缺和伦理道德等问题,研究人员尝试从动物肝脏中分离原代肝细胞,用来体外培养并进行研究。使用较多的是啮齿动物,还有一些哺乳动物和鱼类。目前常用的供体品系有树鼩、大小鼠、猪、新西兰兔、比格犬、猫、牛、羊、鸡、鸭、鹅、鱼等。 原代肝细胞除了供体品系不同以外，也会根据细胞来源的供体数，分为单供体和多供体。供体数的选择主要取决于实验的研究目的。 原代肝细胞的应用场景也很多。随着技术水平的不断提高，原代培养的动物和人肝细胞已广泛应用于药物研究：①探讨药物在肝中的代谢途径和药物药代动力学的研究；②预测和解释药物与药物之间的相互作用；③研究药物的细胞毒性等...

原代肝细胞比较常用的模型是二维模型。在胶原包被的培养板上，原代肝细胞可贴壁培养，同样高密度培养有助于肝细胞分化状态的维持。但原代肝细胞在体外的培养时间较短，人原代肝细胞在体外培养3天内可保持乙肝病毒易感性，培养两周发生明显的去分化以及细胞凋亡情况。北京大学邓宏魁教授发表在《科学》上的数据显示，通过添加5种小分子化合物抑制原代肝细胞去分化进程，可在体外长期维持肝细胞的分化状态，维持时间长达八周。那为什么原代肝细胞在体外容易去分化呢？肝细胞在体外缺乏了肝细胞与肝非实质细胞的交流，又或者缺乏了肝脏的三维结构。基于以上问题与分析，我在硕士期间开展了肝细胞与肝非实质细胞的共培养工作。结果显示...

原代肝细胞的融合度是影响其生长和增值能力的重要因素之一。当融合度达到70%以上时，细胞开始进入高度同步状态，细胞之间的相互作用也得到了有效的发挥，从而促进了细胞的生长和增殖。但是，如果融合度低于70%，细胞之间的相互作用就会受到限制，导致细胞的增值能力受到限制，无法达到100%。此外，细胞之间的距离也是影响细胞生长和增值能力的重要因素之一。当细胞之间的距离刚好是黄金分割点时，细胞开始进入高度同步状态，细胞之间的相互作用也得到了有效的发挥，从而促进了细胞的生长和增殖。但是，如果细胞之间的距离超过了黄金分割点，细胞就无法进入高度同步状态，从而导致细胞的增值能力受到限制。细胞的培养密度也...

不同物种的原代肝细胞在贴壁时间上存在差异。以小鼠为例，其原代肝细胞可能在培养基中需1个小时开始贴壁，而其他物种则需要4-6小时左右。这是由于不同物种的细胞形态、生理特性和培养条件等因素的影响。 在进行原代肝细胞培养时，贴壁时间是一个重要的指标。一般来说，原代肝细胞在培养基中贴壁后，细胞的代谢活性和功能会得到提高，因此贴壁时间越短，细胞的生物学活性就越高。但是，如果贴壁时间过短，细胞可能会出现脱落或死亡等情况，因此需要根据具体情况进行调整。 另外，原代肝细胞的贴壁能力也与细胞的新鲜程度有关。新鲜分离的原代肝细胞一般需要4-6小时才能贴壁，而经过冷冻保存的细胞则需要更长的时间。因此，在进行原代肝细...

原代肝细胞是简单有效的生物体外模型。相比于其他类型诱导产生的肝脏细胞或是cancer细胞系，原代肝细胞在造模的同时不需要复杂的对细胞进行重编程，以及诱导分化，可以更方便更快速的进行高通量药理研究。此外和另外两种方式相比，原代肝细胞能够更准确的反应体内的真实情况，有数据表明，原代肝细胞比iPSC诱导产生的肝细胞内的碱基取代少数倍，同时这些细胞还保留了捐献者的特有特征，是较为理想的研究模型。另一个优势在于，原代肝细胞衍生的Organoid可以提供独特的肝毒模型，因为原代细胞保留了患者特有的I期II期药物代谢情况。原代细胞不仅拥有捐赠者特有的生理特性，同时也具备其他两种肝细胞在应对病原体时的生理反应...

原代肝细胞有三种常用的分离方法，每种方法都有对应的原理。原代肝细胞是从动物体内分离出来的未经过传代的肝细胞，具有很高的生物学活性和生理功能，是研究肝脏生理和病理的重要材料。目前，分离原代肝细胞的方法有直接剪切法、组织块消化法和两步胶原酶灌流法等。其中，两步胶原酶灌流法是一种比较常用的方法，因为它对肝细胞的损伤作用较小，可以提高肝细胞的产量和活力。 在两步胶原酶灌流法中，首先需要使用螯合剂来螯合肝脏中的铁离子，以避免胶原酶的活性受到抑制。然后，将肝脏灌注胶原酶，使其分解胶原纤维，从而释放出肝细胞。这种方法可以分离出数量多且活力好的肝细胞，适用于各种动物的肝脏，包括小鼠、大鼠、猪等。 直接剪切法是...

贴壁培养是一种常用的细胞培养方法，可以使原代肝细胞在培养皿表面附着生长，形成单层细胞群落。原代肝细胞的贴壁培养需要注意以下几点： 1. 分离和准备细胞：从新鲜的动物肝脏中分离出原代肝细胞后，需要进行细胞计数和质量检测，确保细胞数量和质量符合要求。 2. 培养基的选择：原代肝细胞的培养基需要选择适合其生长和代谢的培养基，常用的培养基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培养皿的涂层：为了使原代肝细胞能够附着生长，需要在培养皿表面涂层一定浓度的胶原蛋白、明胶或者其他细胞黏附因子。 4. 细胞接种和培养：将准备好的原代肝细胞接种到涂层好的培养皿中，加入适量的培养基，放入恒温培养箱中进行培养。需...

在进行原代肝细胞培养时，是否需要添加血清？在进行原代肝细胞培养时，通常需要添加血清。血清是一种含有多种营养物质和生长因子的液体，可以提供细胞生长所需的营养和生长因子，促进细胞的生长和增殖。血清中含有多种蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质等营养物质，可以为细胞提供能量和营养，促进细胞的生长和增殖。此外，血清中还含有多种生长因子，如胰岛素、表皮生长因子等，可以促进肝细胞的分化和增殖。然而，血清中也含有一些杂质和微生物，可能会对细胞的生长和功能产生不利影响。因此，在使用血清时，需要选择高质量的血清，并对血清进行严格的质量控制和检测，以确保血清的质量和安全性。此外，在进行原代肝细胞培养时，也可以使用...

原代肝细胞的分离冻存技术是一项非常复杂的实验技术，需要特定的实验室条件和高超的技术。在实验室中，必须严格遵守实验室管理和质量控制的要求，确保实验的准确性和可靠性。同时，由于涉及到人体组织的使用，还需要遵守伦理和法律规定，确保实验的合法性和道德性。在实验室中，分离原代肝细胞需要使用一系列的试剂和设备，如胰蛋白酶、胆汁酸、离心机等。这些试剂和设备必须经过严格的质量控制，确保其纯度和有效性。同时，实验室的环境条件也必须符合要求，如温度、湿度、洁净度等，以保证实验的稳定性和可重复性。在分离原代肝细胞的过程中，还需要进行细胞培养和细胞鉴定等步骤。这些步骤需要高超的技术和经验，以确保细胞正常的生长和增殖。...

原代肝细胞研究历史可以追溯到20世纪初。当时，科学家们开始对肝脏的结构和功能进行深入研究，并尝试从肝脏中分离出原代肝细胞进行研究。早期的研究方法是通过肝脏切片的方式来分离出肝细胞，但是这种方法存在很多局限性，比如细胞的存活率很低，细胞的数量也很有限。 随着技术的不断进步，科学家们开始尝试使用酶解法来分离原代肝细胞。这种方法可以有效地提高细胞的存活率和数量，但是由于酶的质量和浓度的不同，细胞的质量和纯度也存在很大的差异。 在20世纪50年代，科学家们开始使用离心法来分离原代肝细胞。这种方法可以有效地提高细胞的纯度和数量，但是由于离心过程中细胞受到的力的不同，细胞的形态和功能也会发生改变。 随着细...

原代肝细胞研究历史可以追溯到20世纪初。当时，科学家们开始对肝脏的结构和功能进行深入研究，并尝试从肝脏中分离出原代肝细胞进行研究。早期的研究方法是通过肝脏切片的方式来分离出肝细胞，但是这种方法存在很多局限性，比如细胞的存活率很低，细胞的数量也很有限。 随着技术的不断进步，科学家们开始尝试使用酶解法来分离原代肝细胞。这种方法可以有效地提高细胞的存活率和数量，但是由于酶的质量和浓度的不同，细胞的质量和纯度也存在很大的差异。 在20世纪50年代，科学家们开始使用离心法来分离原代肝细胞。这种方法可以有效地提高细胞的纯度和数量，但是由于离心过程中细胞受到的力的不同，细胞的形态和功能也会发生改变。 随着细...

原代肝细胞有三种常用的分离方法，每种方法都有对应的原理。原代肝细胞是从动物体内分离出来的未经过传代的肝细胞，具有很高的生物学活性和生理功能，是研究肝脏生理和病理的重要材料。目前，分离原代肝细胞的方法有直接剪切法、组织块消化法和两步胶原酶灌流法等。其中，两步胶原酶灌流法是一种比较常用的方法，因为它对肝细胞的损伤作用较小，可以提高肝细胞的产量和活力。 在两步胶原酶灌流法中，首先需要使用螯合剂来螯合肝脏中的铁离子，以避免胶原酶的活性受到抑制。然后，将肝脏灌注胶原酶，使其分解胶原纤维，从而释放出肝细胞。这种方法可以分离出数量多且活力好的肝细胞，适用于各种动物的肝脏，包括小鼠、大鼠、猪等。 直接剪切法是...

肝脏是人体内重要的organ之一，它不仅是人体的化学工厂，还是药物代谢的重要organ。药物在体内的代谢过程中，肝脏扮演着至关重要的角色。因此，研究肝脏的代谢功能对于药物研发和毒理学研究具有重要的意义。 在体外药物代谢研究中，肝脏是常用的模型之一。常用的体外模型包括肝微粒体、肝S9、肝胞质液、原代肝细胞、肝组织切片和重组人代谢酶等。其中，原代肝细胞因具有较好的体外试验重现性，基本维持了肝脏的代谢功能，特别是较好的保留了与体内一致的酶水平，成为了体外药物试验的“金标准”，广泛应用于药物代谢与毒理学研究中。 原代肝细胞的研究对于药物代谢和毒理学研究具有重要的意义。它可以模拟体内肝脏的代谢过程，研究...

endotoxin对原代肝细胞的培养有着重要的影响。endotoxin是一种细菌产生的有害物质，它可以对原代肝细胞的培养产生不良影响。在进行原代肝细胞的培养过程中，endotoxin的存在会导致细胞的凋亡、细胞周期的停滞、细胞功能的异常等问题。 endotoxin的存在会引起细胞内炎症反应，导致细胞的凋亡。endotoxin可以打通细胞内的炎症信号通路，导致细胞内产生大量的炎症因子，如肿瘤坏死因子、白细胞介素等。这些炎症因子会引起细胞的凋亡，从而影响原代肝细胞的培养。 endotoxin的存在还会导致细胞周期的停滞。endotoxin可以抑制细胞周期的进程，使得细胞无法正常分裂和增殖。这会导致...

原代肝细胞是一种非常重要的体外细胞模型。原代肝细胞是从新鲜的肝脏组织中分离出来的，具有高度的生物学活性和功能性，可以用于许多不同的应用，包括药物代谢和毒性测试、肝细胞疾病研究、肝细胞移植等。原代肝细胞与其他肝细胞模型相比具有许多优势。原代肝细胞是从新鲜的肝脏组织中分离出来，具有更高的生物学活性和功能性，这意味着原代肝细胞可以更好地模拟人体肝脏的生理和代谢过程，因此更适合用于药物代谢和毒性测试。这些细胞可以帮助研究人体对药物的反应，以及药物对肝脏的影响。原代肝细胞可以用于研究肝细胞疾病，如肝病、肝硬化等。这些疾病对人类健康造成了极大的威胁，因此研究这些疾病的机制非常重要。原代肝细胞可以提供一个更...

研究原代肝细胞的体外培养技术对肝病的克服有重要的意义。肝细胞是肝脏的主要组成部分，它们具有许多重要的生理功能，如合成胆汁、代谢药物等。因此，研究原代肝细胞的特性和功能对于理解肝脏疾病的发生和treatment具有重要意义。 然而，由于肝细胞的特殊性质，它们在体外的培养条件非常苛刻。一般来说，原代肝细胞需要特定的培养基、温度等环境条件才能够生长和繁殖。而且，即使在这些条件下进行培养，原代肝细胞的特征和功能也会逐渐丧失，这使得研究人员难以获得具有稳定特性的肝细胞。 为了解决这个问题，研究人员正在寻找更好的方法来维持肝细胞的特性和功能。一种常用的方法是使用三维培养技术，这种技术可以模拟肝脏的微环境，...

原代肝细胞是一种来源于肝脏组织的细胞，具有很高的酶水平和重现性，是进行肝脏相关研究的重要材料。我们公司的原代肝细胞产品采用较新的培养技术，能够保持细胞的原始性，具有很高的可再生性和稳定性，可以广泛应用于肝脏疾病的研究和药物筛选。我们的原代肝细胞产品采用关键技术的培养方法，能够保证细胞的生长和分化，同时不会影响细胞的稳定性和功能。我们的产品具有以下特点：1.高质量：我们的原代肝细胞产品来源于健康的人体肝脏组织，具有很高的生物学活性和稳定性，可以保证研究结果的准确性和可靠性。2.易于培养：我们的原代肝细胞产品采用较新的培养技术，能够保持细胞的原始性，同时不需要复杂的培养条件，可以方便地进行培养和扩...

解决人工肝脏合成难题，原代肝细胞是理想的肝细胞源。目前，常用的肝细胞源有人原代肝细胞、动物原代肝细胞、liver cancer细胞系HepG2、HepaRG、永生化细胞以及干细胞等。其中，人原代肝细胞是理想的肝细胞源，因为它们具有完整的肝功能和生理特性，能够更好地模拟人体肝脏的生理状态。但是，由于人原代肝细胞的获取和保存非常困难，且存在批次差异和有限的增殖能力，因此在实际应用中受到了一定的限制。 相比之下，动物原代肝细胞则具有更好的增殖能力和更便捷的获取方式，但是由于动物肝脏与人肝存在一定的差异，因此其在模拟人体肝脏生理状态方面存在一定的局限性。HepG2和HepaRG则是常用的liver c...

在进行原代肝细胞培养时，选择合适的培养条件非常重要，以下是一些选择培养条件的建议：1.培养基：选择适合肝细胞生长的培养基，如William'sE培养基、RPMI1640培养基等。不同的培养基成分可能会影响肝细胞的生长和功能。2.温度和湿度：肝细胞的培养温度通常为37°C，湿度为95%左右。在培养过程中，需要保持培养箱内的温度和湿度稳定。3.氧气含量：肝细胞需要充足的氧气供应，因此需要选择透气性好的培养容器，并保持培养箱内的氧气含量充足。4.细胞密度：肝细胞的培养密度需要根据实验目的和培养条件来确定。一般来说，肝细胞的培养密度不宜过高，以免影响细胞的生长和功能。5.细胞因子：在培养过程中，...

原代肝细胞的分离冻存技术是一项非常复杂的实验技术，需要特定的实验室条件和高超的技术。在实验室中，必须严格遵守实验室管理和质量控制的要求，确保实验的准确性和可靠性。同时，由于涉及到人体组织的使用，还需要遵守伦理和法律规定，确保实验的合法性和道德性。在实验室中，分离原代肝细胞需要使用一系列的试剂和设备，如胰蛋白酶、胆汁酸、离心机等。这些试剂和设备必须经过严格的质量控制，确保其纯度和有效性。同时，实验室的环境条件也必须符合要求，如温度、湿度、洁净度等，以保证实验的稳定性和可重复性。在分离原代肝细胞的过程中，还需要进行细胞培养和细胞鉴定等步骤。这些步骤需要高超的技术和经验，以确保细胞正常的生长和增殖。...

原代肝细胞是一种从新鲜肝脏组织中分离出来立即冻存的细胞，酶活性和酶种类和肝脏非常接近。它们是肝脏的主要细胞类型，能够执行多种生理功能，如合成和分泌胆汁、代谢药物和有害物质、合成和分泌蛋白质等。 原代肝细胞具有以下特点： 1. 高度的生物学活性：原代肝细胞具有高度的生物学活性，能够执行多种生理功能，如代谢药物和有害物质、合成和分泌蛋白质等。 2. 优异的细胞生长和增殖能力：原代肝细胞具有优异的细胞生长和增殖能力，能够在体外长期培养，为研究肝脏生理和病理提供了重要的工具。 3. 高度的细胞纯度：原代肝细胞可以通过多种方法从新鲜肝脏组织中分离出来，具有高度的细胞纯度，可以用于多种实验和应用。 4. ...

原代肝细胞研究历史可以追溯到20世纪初。当时，科学家们开始对肝脏的结构和功能进行深入研究，并尝试从肝脏中分离出原代肝细胞进行研究。早期的研究方法是通过肝脏切片的方式来分离出肝细胞，但是这种方法存在很多局限性，比如细胞的存活率很低，细胞的数量也很有限。 随着技术的不断进步，科学家们开始尝试使用酶解法来分离原代肝细胞。这种方法可以有效地提高细胞的存活率和数量，但是由于酶的质量和浓度的不同，细胞的质量和纯度也存在很大的差异。 在20世纪50年代，科学家们开始使用离心法来分离原代肝细胞。这种方法可以有效地提高细胞的纯度和数量，但是由于离心过程中细胞受到的力的不同，细胞的形态和功能也会发生改变。 随着细...

原代肝细胞是药物早期研究的金标准细胞模型。药物通过肝脏代谢后，大多数药物的毒性被消除，但同时也有一些无毒或低毒的物质通过生物转化后转变成有毒甚至毒性更大的物质，因此肝脏便必然成为研究药物毒性的重要target organ。原代肝细胞即为一个较好的筛选模型，尤其是在检测结构相关化合物时，原代肝细胞的角色更为重要。 人原代肝细胞是重要的体外模型。人原代肝细胞在较大程度上保留了细胞在体内organ里的功能,各种物质代谢功能和酶活性与体内的肝细胞极其相似,是较为接近临床的一种标准体外短期培养模型。人原代肝细胞通常从肝或肝组织中获得,一般在肝切除手术中或者肝移植后排斥的肝组织中获取,随后即时进行研究或者...

猫作也是原代肝细胞的常用供体，近年来在生物医药领域的研究中扮演着越来越重要的角色。相对于小鼠和大鼠等试验用动物，猫的体型更大，便于试验操作和观察，因此被广泛应用于科研、教育和药物研发等领域。据美国农业部动植物卫生检疫局（APHIS）的统计数据显示，在2017年，美国就使用了约万只猫进行试验研究。而在中国，试验用猫的年使用量也在不断增加，据文献报道，每年浙江省的药品质量监测就需要使用400-500只试验用猫。猫的原代肝细胞和肝微粒体是不可或缺的研究材料。通过对猫的肝细胞进行体外研究，可以更加准确地评估药物的代谢和毒性，为药物研发提供重要的参考依据。此外，猫的原代肝细胞还可以用于疾病模型的建立和药...

在新药研发的过程中，原代肝细胞是不可或缺的体外模型，这是因为肝脏能够代谢大部分药物。因此，通过使用原代肝细胞，可以更加准确地模拟药物在人体内的代谢和毒理反应，为新药研发提供更加可靠的数据支持。 在药物代谢实验中，原代肝细胞可以帮助研究人员了解药物在体内的代谢途径、代谢产物以及代谢速率等信息。这些信息对于药物的研发和临床应用都具有重要意义。同时，在药物毒理实验中，原代肝细胞也能够帮助研究人员评估药物的毒性和安全性，为药物的临床应用提供保障。 除此之外，原代肝细胞还可以用于药物靶向诱导实验。通过对原代肝细胞进行特定的处理，可以使其表达特定的蛋白质或基因，从而实现对药物靶向的调控。这种方法可以帮助研...

原代肝细胞的体外培养一直是困扰学者们开展肝病研究的难题。为了研究肝脏的生理和病理过程，学者们一直在努力开发体外培养原代肝细胞的方法。 一般来说，原代肝细胞体外培养可以维持7-14天左右，7天以后细胞的状态和活率会逐渐开始下降。 为了克服这些局限性，科学家们开始尝试将肝实质细胞和肝非实质细胞共同培养。根据邓宏魁教授的5C文章，将肝实质细胞和肝非实质细胞共同培养时，肝实质细胞和肝非实质细胞可以相互作用，形成更加复杂的细胞群体，从而更好地模拟肝脏的生理和病理过程，通过这种方法可以将原代肝细胞体外培养128天。 当然，共同培养方法也存在一些局限性，比如如何控制细胞的生长和分化、如何保持细胞的稳定性等。...

原代肝细胞可以分为贴壁原代肝细胞和悬浮原代肝细胞。贴壁原代肝细胞是指在培养皿中贴附在表面上的肝细胞，而悬浮原代肝细胞则是指在培养液中悬浮的肝细胞。由于原代肝细胞的特殊性质，它们在冷冻复苏后容易出现失巢凋亡的现象。因此，如果要将肝细胞用于悬浮培养，一般只能存活6小时左右，适合用于短期研究。而贴壁原代肝细胞则可以存活培养达15天，适合长期实验研究观察。贴壁原代肝细胞的培养需要一定的技术和条件。首先，需要选择适合的培养基和培养条件，以保证肝细胞的正常生长和分化。其次，需要注意细胞的密度和培养皿的大小，以避免细胞过度生长或过度拥挤。此外，还需要注意细胞的纯度和稳定性，以保证实验结果的准确性和可靠性。原...

原代肝细胞是药物早期研究的金标准细胞模型。药物通过肝脏代谢后，大多数药物的毒性被消除，但同时也有一些无毒或低毒的物质通过生物转化后转变成有毒甚至毒性更大的物质，因此肝脏便必然成为研究药物毒性的重要target organ。原代肝细胞即为一个较好的筛选模型，尤其是在检测结构相关化合物时，原代肝细胞的角色更为重要。 人原代肝细胞是重要的体外模型。人原代肝细胞在较大程度上保留了细胞在体内organ里的功能,各种物质代谢功能和酶活性与体内的肝细胞极其相似,是较为接近临床的一种标准体外短期培养模型。人原代肝细胞通常从肝或肝组织中获得,一般在肝切除手术中或者肝移植后排斥的肝组织中获取,随后即时进行研究或者...

原代肝细胞是药物早期研究的金标准细胞模型。药物通过肝脏代谢后，大多数药物的毒性被消除，但同时也有一些无毒或低毒的物质通过生物转化后转变成有毒甚至毒性更大的物质，因此肝脏便必然成为研究药物毒性的重要target organ。原代肝细胞即为一个较好的筛选模型，尤其是在检测结构相关化合物时，原代肝细胞的角色更为重要。 人原代肝细胞是重要的体外模型。人原代肝细胞在较大程度上保留了细胞在体内organ里的功能,各种物质代谢功能和酶活性与体内的肝细胞极其相似,是较为接近临床的一种标准体外短期培养模型。人原代肝细胞通常从肝或肝组织中获得,一般在肝切除手术中或者肝移植后排斥的肝组织中获取,随后即时进行研究或者...

猫作也是原代肝细胞的常用供体，近年来在生物医药领域的研究中扮演着越来越重要的角色。相对于小鼠和大鼠等试验用动物，猫的体型更大，便于试验操作和观察，因此被广泛应用于科研、教育和药物研发等领域。据美国农业部动植物卫生检疫局（APHIS）的统计数据显示，在2017年，美国就使用了约万只猫进行试验研究。而在中国，试验用猫的年使用量也在不断增加，据文献报道，每年浙江省的药品质量监测就需要使用400-500只试验用猫。猫的原代肝细胞和肝微粒体是不可或缺的研究材料。通过对猫的肝细胞进行体外研究，可以更加准确地评估药物的代谢和毒性，为药物研发提供重要的参考依据。此外，猫的原代肝细胞还可以用于疾病模型的建立和药...