经过多年的经验积累及市场积淀，倍笃生物已组合多条不同产品线，分别满足体外诊断、organoid及干细胞、细胞基因药物等领域的需求。其中，细胞基因药物领域产品线包含SAN HQ高盐核酸酶及M-SAN HQ中盐核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP级MSC/PSC培养基、GMP级胶原酶、AAV滴度检...

一个美国客户做了对照实验，比较Benzonase和SAN HQ高盐核酸酶纯化病毒载体的效率。实验设计如下，HEK293细胞转染及培养后，分别取了150Million的293细胞进行裂解，分别在各自适宜的条件下（即SAN HQ组反应条件为500mM盐浓度，而Benzonase组反应条件是150mM盐浓...

AAV病毒滴度通常分为物理滴度和infection滴度。物理滴度一般是指基因组滴度或者衣壳滴度。在测定AAV的含量时，通常采用基因组滴度或者衣壳滴度作为单位，其中基因组滴度为携带基因组的AAV的浓度，衣壳滴度为AAV物理颗粒的浓度。基因组滴度一般采用qPCR、ddPCR、染料法、UV/Vis等方法来...

Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ，中盐核酸酶)，是用Pichia pastoris表达的重组非特异内切核酸酶，广泛应用于生产工艺流程中，在生理盐条件下去除双链及单链的DNA及RNA。这款核酸酶的适宜pH范围很广（pH 7.2-8.7...

伦敦大学学院（UCL）的工艺开发团队，在细胞药物Car-T涉及的慢病毒（Lentivirus，LV）生产过程中，比较了Benzonase和M-SAN HQ中盐核酸酶在酶活、酶切时间、各阶段LV的稳定性等方面的表现，发现在生理盐条件下M-SAN HQ中盐核酸酶酶活更高、酶切时间更短，同时用纳米颗粒分析...

核酸酶活性受到很多因素影响，如盐浓度、pH、底物、温度等。因此，不同客户、不同项目中核酸酶的使用条件都不一。目前，生物制药行业对Benonase全能核酸酶的使用比较熟悉，如生理盐或低盐浓度、脱盐操作等。对于大部分使用Benzonase的项目，使用M-SAN HQ中盐核酸酶可以完全替代，而且温度、Mg...

核酸酶活性受到很多因素影响，如盐浓度、pH、底物、温度等。因此，不同客户、不同项目中核酸酶的使用条件都不一。目前，生物制药行业对Benonase全能核酸酶的使用比较熟悉，如生理盐或低盐浓度、脱盐操作等。对于大部分使用Benzonase的项目，使用M-SAN HQ中盐核酸酶可以完全替代，而且温度、Mg...

M-SAN HQ中盐核酸酶在生理盐条件下的优势，让其成为生物生产工艺中去除核酸污染的更好选择。经过多年的市场宣传，M-SAN HQ中盐核酸酶品质已得到多个全球TOP CDMOs认可，纳入其工艺开发筛选平台。此外，目前全球有10+临床项目涉及的病毒载体生产用到M-SAN HQ中盐核酸酶。对于同一个项目...

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中盐核酸酶，2021年推出对应的M-SAN HQ ELISA kit。该试剂盒原理是采用双抗夹心法定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中M-SAN HQ中盐核酸酶的残留含量，特异性的anti-M-SAN作为捕获抗...

伦敦大学学院（UCL）的工艺开发团队，在细胞药物Car-T涉及的慢病毒（Lentivirus，LV）生产过程中，比较了Benzonase和M-SAN HQ中盐核酸酶在酶活、酶切时间、各阶段LV的稳定性等方面的表现，发现在生理盐条件下M-SAN HQ中盐核酸酶酶活更高、酶切时间更短，同时用纳米颗粒分析...

此外，文章作者对每个步骤的样品进行纳米颗粒分析（NTA），结果发现：澄清环节后，M-SAN HQ中盐核酸酶和Benzonase处理组才出现比较明确的LV病毒颗粒峰；TFF处理后，回流液样品的LV病毒颗粒峰更加尖锐，表明病毒颗粒分散度更好、稳定性更高。回流液的NTA结果进一步表明，M-SAN HQ中盐...

Mayer等（2023）以measles virus(麻疹病毒，MV)为例，评估了四种不同核酸酶（BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中盐核酸酶及SAN HQ高盐核酸酶）对于染色质DNA去除的效果。Vero细胞通过微载体贴壁培养来生产麻疹病毒MV，72h后收获上清液，使用3...

ArcticZymes厂家对盐活性核酸酶系列产品（Salt Active Nucleases，SANs）的生产及质控，包括SAN HQ高盐核酸酶和M-SAN HQ中盐核酸酶，在符合ISO13485:2016体系基础上，增加了cGMP质控标准，如microbes、endotoxin、蛋白酶等；同时提供...

一般来说，生物生产工艺用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注册商标）为主，能高效降解任何形式（双链、单链、线状、环状）的DNA和RNA。该酶来自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通过E.coli发酵生产得到。该酶的适宜反应条件是低盐浓度范围（<100mM...

监管部门对HCD的残留量有明确的规定。美国FDA发布的指导原则中指出生物制品HCD残余限度为 100pg/剂，对于大剂量生物制品如单克隆抗体，根据其残留DNA来源及给药途径，残留量可放宽至 10ng/剂。细胞基因药物终产品的DNA残留有两种来源，分别是宿主细胞DNA（HCD）和转染用的质粒。质粒和H...

Mayer等（2023）以measles virus(麻疹病毒，MV)为例，评估了四种不同核酸酶（BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中盐核酸酶及SAN HQ高盐核酸酶）对于染色质DNA去除的效果。Vero细胞通过微载体贴壁培养来生产麻疹病毒MV，72h后收获上清液，使用3...

跟其他类型的核酸酶一样，SAN HQ高盐核酸酶和M-SAN HQ中盐核酸酶的灭活方法有很多，分为可逆灭活及不可逆灭活。金属离子螯合剂如EDTA会可逆抑制两者的活性，加入的EDTA浓度一般是溶液中Mg2+浓度的2倍左右即可完全抑制活性；后续补加过量的Mg2+即可恢复核酸酶活性。加热、还原剂（如DTT）...

宿主细胞DNA（HCD）残留以染色质形式存在，其中有带负电荷的DNA、带正电荷及疏水区段的组蛋白，就像胶带一样能够吸附很多物质，包括各种杂蛋白、色谱填料、目的病毒颗粒。非特异吸附杂蛋白，会影响蛋白杂质（如HCP）等的去除；吸附到色谱填料上，会降低色谱分离纯化效率；吸附到目的病毒颗粒时，会影响目的产物...

ArcticZymes Technologies有两条产品线，分别针对分子诊断和生物药物生产两个领域。在分子诊断领域，产品有虾碱酶（SAP）、UNG酶、等温扩增酶（IsoPol）、连接酶、蛋白酶、内切核酸酶及外切核酸酶等，涉及核酸抽提、扩增及测序等应用。在生物药物生产领域，全球创新的盐活性核酸酶（S...

大规模生产阶段，AAV/LV载体生产流程跟抗体、疫苗类药物的生产类似，主要包含上游培养、下游纯化及制剂部分。上游培养分为质粒开发、细胞扩增、三质粒共转染及病毒载体生产等步骤。下游纯化分为细胞裂解释放AAV病毒颗粒（可以通过去污剂、机械作用、高渗或冻融操作等）or收获细胞上清液得到含LV病毒原液、加入...

对于含包膜的病毒载体，如慢病毒LV、逆转录病毒RV等，在细胞培养上清液中收获。而M-SAN HQ中盐核酸酶，作为市场上更适合生理盐条件的核酸酶，所以，M-SAN HQ成了包膜病毒载体生产的更好选择。优势在于：1. M-SAN HQ兼容多种细胞培养体系，在细胞培养盐浓度条件下具有更优活性；2. M-S...

监管部门对HCD的残留量有明确的规定。美国FDA发布的指导原则中指出生物制品HCD残余限度为 100pg/剂，对于大剂量生物制品如单克隆抗体，根据其残留DNA来源及给药途径，残留量可放宽至 10ng/剂。细胞基因药物终产品的DNA残留有两种来源，分别是宿主细胞DNA（HCD）和转染用的质粒。质粒和H...

在干细胞医治领域， 某些疾病靠单纯的细胞替代并不能取得满意效果。利用逆转录病毒和慢病毒将外源目的基因整合到干细胞基因组，对基因功能缺失的遗传病具有良好疗效，但也存在一定致瘤风险。相比之下，CRISPR/Cas9基因编辑技术能够精确实现基因敲入、敲除及碱基修复。因此， 采用CRISPR/Cas9基因编...

在生物工艺流程中，需要使用核酸酶去除终产品中的核酸污染，而核酸酶作为外源成份，也需要在生产流程中去除。核酸酶去除工艺包括热灭活法、酶抑制剂、离子交换和亲合层析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右，包装了完整基因组DNA后的AAV病毒颗粒PI大致为5.9，来自于S.marcescens的全能核酸...

染色质由组蛋白和DNA组成，——147个碱基对的DNA缠绕在8个组蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚体）周围，形成基本的染色质单位，即核小体。核小体像珠串一样串连在一起，并被包装成更高阶的染色质结构。DNA带负电荷，富含碱性氨基酸的组蛋白带正电荷，且组蛋白多聚物有很多疏水区段。所有这些特点...

基因药物是指将外源基因引入靶细胞，纠正或补偿基因缺陷或异常引起的疾病的。这种策略对许多疾病的康复有很大的潜力，包括ai症、神经退行性疾病和心血管疾病。目前已经进行了2000多项基因药物临床试验，大多数载体已被证明是有效和安全的。目前的研究表明，大约64%的基因药物临床试验是为了医治ai症疾病，而**常...

残留的宿主DNA是生产中产生的杂质，其存在潜在的致瘤性、传染性和免疫原性等风险。相关研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能会有一定的致病性，而且残留DNA片段越大，生物制品的风险等级越高。因此，各国监管机构对其提出了严格要求。美国食品药品监督管理局（FDA）在《关于人类基...

在干细胞医治领域， 某些疾病靠单纯的细胞替代并不能取得满意效果。利用逆转录病毒和慢病毒将外源目的基因整合到干细胞基因组，对基因功能缺失的遗传病具有良好疗效，但也存在一定致瘤风险。相比之下，CRISPR/Cas9基因编辑技术能够精确实现基因敲入、敲除及碱基修复。因此， 采用CRISPR/Cas9基因编...

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中盐核酸酶，2021年推出对应的M-SAN HQ ELISA kit。该试剂盒原理是采用双抗夹心法定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中M-SAN HQ中盐核酸酶的残留含量，特异性的anti-M-SAN作为捕获抗...

残留的宿主DNA是生产中产生的杂质，其存在潜在的致瘤性、传染性和免疫原性等风险。相关研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能会有一定的致病性，而且残留DNA片段越大，生物制品的风险等级越高。因此，各国监管机构对其提出了严格要求。美国食品药品监督管理局（FDA）在《关于人类基...