免疫沉淀实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠 ，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。 简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以...

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）的实验设计通常包括以下几个关键步骤： 1. 目标蛋白质的选择： 2. 抗体的选择：选择特异性强、亲和力高的抗体来捕获目标蛋白质 3. 样本的准备：收集和准备细胞或组织样本。 4. 蛋白质的裂解和释放：选择合适的裂解条件，如pH值、离子强度、去污剂等。 5. 蛋白质浓度的测定：确定裂解液中蛋白质的浓度，以便于后续步骤的标准化。 6. 免疫沉淀的操作：将特异性抗体与裂解液混合，并在适宜的条件下孵育，以形成抗体-抗原复合物。 7. 非特异性结合的减少：通过预纯化步骤去除可能的非特异性...

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation，简称IP）是一种生物化学方法，它利用特异性抗体对抗原进行亲和纯化。在含有目的抗原的细胞裂解液中加入特定的抗体以及Protein A/G-Beads（预先将Protein A/G固定结合在磁珠上），根据抗原与抗体、Protein A/G与抗体的Fc的特异性，形成“抗原-抗体-Protein A/G-Beads”复合物，清洗离心后去除溶液中未结合的杂蛋白，检测是否存在目的蛋白。 免疫沉淀技术常用于从细胞或组织裂解物中分离用于免疫印迹检测或其他检测技术的蛋白和其他生物分子。它的目标是分离足够用于Western Blot或其他检测方法检测...

免疫沉淀RIP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠 ，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。 简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重...

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）是一种用于研究蛋白质相互作用和纯化特定蛋白质的实验方法。 优点: 1. 特异性强：利用特异性抗体捕获目标蛋白，可以有效地从复杂的生物样本中分离出感兴趣的蛋白质。 2. 灵敏度高：可以检测到低丰度的蛋白质，包括瞬态或弱相互作用的蛋白质复合物。 3. 应用范围广：适用于多种生物样本，如细胞裂解物、组织提取物和生物流体。 4. 生物学洞察深入：能够揭示蛋白质之间的相互作用网络，有助于理解细胞内的信号传递和调控机制。 5. 可与其他技术联用：如与质谱（IP-MS）联用，可以准确鉴定蛋白质及其相互作用伙...

免疫沉淀实验步骤： 1. 样品制备 a. 悬浮细胞样品处理：离心收集细胞（4℃, 1000g, 5 min），用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250 μL裂解液的比例加入含蛋白酶抑制剂的裂解液（裂解液应在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂Cocktail，使蛋白酶抑制剂Cocktail的终浓度为1×）。混匀后置于冰上处理10 min；离心收集上清液（4℃, 14000g, 10 min），置于冰上备用（或置于-20℃长期保存）。 b. 贴壁细胞样品处理：移去培养基，用PBS清洗细胞两遍；用细胞刮棒刮脱细胞，收集至1.5mL EP管内，按照6孔板每孔加...

免疫沉淀实验不同于WB实验的样品制备，对实验样品制备要求更高，除了要控制所有操作尽量在冰上完成外，关键的是裂解液的成分，裂解液成分直接决定了样品质量。 主要影响： 1. 蛋白的释放：许多目的蛋白定位在细胞器，质膜，细胞核，细胞骨架中，但通常这些亚细胞结构很难被裂解液有效溶解，所以很难将这些蛋白释放出来。 2. 蛋白相互作用：不同去垢剂对不同性质的蛋白质间相互作用影响程度不同，一些互作较弱的蛋白对尽管在比较温和的裂解液配方中仍然会被破坏。 免疫沉淀技术IP的应用有哪些？温州蛋白免疫沉淀磁珠哪个公司好用 Co-IP的优势： 1. 生理相关性：Co-IP可以在接近生理条...

免疫沉淀技术的实验方法通常包括以下步骤： 1. 样本准备 2. 细胞裂解：使用裂解缓冲液（含有蛋白酶抑制剂以防止蛋白质降解）裂解细胞，释放蛋白质。 3. 蛋白质浓度测定：使用BCA、Bradford或Lowry等方法测定裂解液中蛋白质的浓度。 4. 抗体预处理：如果使用预固定的抗体，需先将抗体固定在固相支持物上，如琼脂糖珠或磁性微珠。 5. 免疫沉淀反应：将裂解液与特异性抗体（固定或未固定）混合，并在4°C下缓慢摇晃孵育过夜，以允许抗体与目标蛋白质充分结合。 6. 固相支持物的回收：对于未固定的抗体，加入与抗体特异性结合的蛋白A或蛋白G结合的固相支持物。...

Co-IP（Co-Immunoprecipitation，共免疫沉淀）的实验方法通常包括以下步骤： 1. 细胞培养与裂解：细胞在适宜的培养条件下生长到适当的密度。 蛋白质分离：裂解后的细胞混合物通过离心去除未破碎的细胞碎片和未裂解的细胞。收集上清液 2. 抗体的添加：将特异性抗体（针对目标蛋白质的抗体）加入到裂解物中。 3. 免疫复合物的形成：抗体与目标蛋白结合后，形成免疫复合物。 4. 亲和介质的使用：向混合物中添加蛋白A或蛋白G结合的珠子（如琼脂糖或磁性珠子）。 5. 免疫复合物的捕获：将混合物与珠子孵育一段时间后，使用磁铁或离心的方法将珠子收集起来...

RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）的实验设计需要考虑多个方面，以确保实验的准确性和可重复性。 1. 目标蛋白的选择：确定你想要研究的目标RNA结合蛋白（RBP）。 2. 阳性和阴性对照：设计实验时，需要包括阳性对照和阴性对照。 3. 细胞培养与裂解：选择合适的细胞类型进行培养。 4. 抗体孵育：将特异性抗体与细胞裂解液孵育，以形成抗体-蛋白质-RNA复合物。 5. 免疫沉淀：使用蛋白A或蛋白G结合的珠子进行免疫沉淀，捕获抗体-蛋白质-RNA复合物。 6. 洗涤和分离：洗涤...

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）是一种用于研究蛋白质相互作用和蛋白质特性的重要方法。它具有一些明显的优点，但也存在一些局限性。 优点: 1. 特异性强：IP技术利用特异性抗体对目标蛋白进行捕获，因此具有很高的特异性。 2. 富集低丰度蛋白：可以从小量样本中富集低丰度的目标蛋白，有助于研究稀有蛋白。 3. 研究蛋白质相互作用：通过Co-IP等变体技术，可以研究蛋白质之间的相互作用。 4. 操作简便：IP实验步骤相对简单，容易在实验室中实施。 缺点: 1. 对抗体质量依赖性高：需要高质量的特异性抗体，否则可能导致假...