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载体构建——同源重组法-生命科学软件。还是以基因ATG7为例，首先在NCBI,TAIR等基因网站找到这个基因，复制CDS序列。将序列插入newdnafile，然后重命名文件。选中全长后，点击Features>addfeature>labelname改为CDS>type改为CDS。这样的目的是为了方便后续检测基因是否插入成功。查看实验室已有的酶，点击Emazy>chooseemazy>先移除右边框中的酶，然后再添加你所在实验室中已购买的酶。保存文件为ATG文件。后续要在载体中插入到这个文件所以要先保存。-生命科学软件。打开载体文件,找到到多酶切位点序列。查看哪些酶切位点可用且不会切到基因片段，然后确定酶切位点，可用一个酶，也可以用两个酶，不过比较好选两个酶。在载体文件中选择要两个酶切位点，点击Action>In-fusioncloning>Insertfragment。医学生物行业常用专业软件介绍。北京SnapGene生命科学软件推荐

酶界面，基本就是酶和酶组选择的各种信息，方便查看和使用。-生命科学软件特征界面是质粒的每个元件详细情况，双击特征能显示出特征的开始结束碱基序列，简单描述，表达产物，转录方向和复制方向等等一系列的特征。有助于帮助更好地了解你所需的质粒。引物界面显示图谱中通用的引物，可以用来测序，检测插入片段是否正确。-生命科学软件历史界面能够显示对质粒处理的过程，制成流程图，方便你去查看，例如上面切除lacz特征片段后，历史界面会做出相应的改变，同时还有文字描述的流程。杭州正版生命科学软件是什么适用于生命科学行业的控制系统和软件。

历史记录颜色-生命科学软件。使用可选的历史记录标上颜色来标识序列的***更改。查看有关组装结构的详细信息，包括结扎的粘性末端。拥有您的数据SnapGene可以帮助您选择读取和共享文件，同时保持对数据的完全控制。安全文件管理-生命科学软件。把您的SnapGene文件放在您想要的地方。使用您熟悉的、安全的计算机操作系统来存储和管理SnapGene文件。从其他格式导入支持读取许多常见的文件格式。不仅可以导入DNA序列，还可以导入功能注释和注解。

点击Actions→InsertFragment，点击HindIII+键盘Shift键+ApaI，点击Insert，在sourceoffragment处选择插入的目的片段来源。点击上述同样的酶，给该重组质粒命名，点击clone。-生命科学软件引物设计及模拟克隆-生命科学软件以pEGFP-C1构建humanp53CDS过表达载体为例，通过酶切位点筛选，选择“EcoRI”和“BamHI”两种内切酶，其中需要注意的是：EcoRI在上游，BamHI在下游按照之前步骤，用snapgene打开p53CDS序列选择底部“Sequence”页面生物软件,会用这个就够了!

将序列粘贴到序列框中，同理更改名字以及添加酶切位点序列（下游酶切位点是BamHI）和保护碱基的序列，然后点击“addprimertotemplate”-生命科学软件点击“Map”，Ctrl键选择两个引物（如图），点击“Action”→“PCR”点击“PCR”，即获得扩增产物-生命科学软件打开表达载体序列，按Ctrl键选择两个酶切位点（蓝色标记的），点击“Action”→“Restrictioncloning”→“Insertfragment”点击“Insert”，选择刚刚扩增产物的文件“A”，然后分别输入相应内切酶的名字，点击插入的片段。在右下角点击“Clone”即可。生命科学软件 - 专业软件代理商。北京SnapGene生命科学软件推荐

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TA和GC克隆-生命科学软件。通过TA或GC克隆捕获PCR产物。选择传统的TA克隆或高效的GC克隆。为了方便起见，提供了常用的TA克隆载体和Lucigen的GC克隆载体。AnnealingOligos将两个寡核苷酸重组以形成双链产物。使用简单控件为限制克隆添加悬挑。避免错误-生命科学软件。使用SnapGene，确保构造符合您的要求，并确认您获得了所需的序列。基因融合阅读框确保构造中的转换功能位于框架中。使用序列视图可以查看两个已翻译的特征是否在框架中。北京SnapGene生命科学软件推荐

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