为什么使用胎儿血清而不是新生儿血清或成人血清?胎儿血清含有较多的生长因子,丙种球蛋白(即抗体)含量较低,非胎儿血清也有。这些很重要,因为生长因子促进细胞存活和增殖,而抗体可以与培养的细胞结合。此外,与成人或新生儿相比,胎儿血清中的补体蛋白(补体)含量较低。这些补体具有溶解培养细胞和干扰免疫测定的不良作用。血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。胎牛血里的生长因子适合牛体内各种细胞生长,通常在8个月胎龄后慢慢消失。徐州RPMI 1640 Medium
如何解冻血清?血清应该在2-8°C过夜解冻以避免降解,或者在室温条件下,定期轻轻摇动使组分重悬。解冻的血清在加入细胞培养基前应该混合均匀。由于反复冻存会严重影响血清品质,建议将解冻的血清分装成单次使用量,并冻存于-20°C。如果储存于2-8°C,应该在2-4周使用。温度超过37°C时会降解营养成分,破坏血清功能。如果血清收到时存在部分解冻,还能继续使用吗?血清是干冰包装运输,到达时应该是冷冻状态。但是,如果由于运输时间超期导致部分解冻,依然可以继续使用。完全解冻后分装成单次用量进行冻存。血清产品的保质期是多久?大部分血清产品,在未开封冻存的情况下生产之日起5年,具体可参考瓶身或CoA上的信息。丹阳DMEM(高糖)培养基(含双抗)胎牛血清100纳米过滤,过滤材料符合美国药典的生物安全性标准。
血清中出现沉淀的原因很多:反复的冻融会使血清脂蛋白发生变性造成浑浊,可通过分装成单次用量减少冻融来尽量避免此种情况。血清是在低温环境下迅速加工以保持其生长特性,血清中遗留的一些纤维蛋白原在解冻时会转化成纤维蛋白。过量的纤维蛋白在血清中呈现为可见的絮状物质,可通过400xg离心移除。不建议通过过滤血清来移除絮状物质,因为滤器可能堵塞,或者意外截留到重要的蛋白质。牛血清产品检测项目包括内有害元素、细菌、菌体、霉菌、支原体和噬菌体检测吗?胎牛血清采用非常严谨的标准检测过这些相关微生物的污染,具体可以参加每批次的CoA。什么是γ辐照的血清(胎牛血清)?γ辐照的血清通过暴露于放射性60Co产生的25-40kGy剂量的γ射线来灭活病毒和其他外来微生物(比如支原体)。γ辐照处理不影响血清的理化性质或细胞培养性能。
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。虽然胎牛血清与新生牛血清的成分并不存在很大的差别,可是诸如促细胞生长因子和促贴附因子等组份并不相同。
胎牛血清的生产和质控也是影响产品品质的重要因素。胎牛血清生产流程可分为原料采集、原料加工及冷链运输三个重要环节。生产过程中的每一步,如血源采集、加工、过滤、辐照处理、包装、质检和物流等,都必须遵循行业高标准,以确保产品的优异品质。一个符合业内标准的血清生产流程是这样的:在严格规范的健康与检疫监控下,怀孕母牛从牧场运输到屠宰场,胎牛经心脏穿刺取血,得到胎牛血清原料;新生牛和小牛血清则取自出生相应天数的牛血液。按照国际标准,血清生产需经过多级预过滤和三级0.1μm精过滤,以去除包括支原体在内的各种微生物与杂质。生产后的血清需经过严苛的质检环节,得到合格成品后,保存和运输环节也要严格遵循相关要求。胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。连云港Bouin's固定液
胎牛血清提供维持细胞指数生长的激元素、基础培养基中没有或量很少的营养物。徐州RPMI 1640 Medium
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是一种取自牛胚胎的血清,常用于配置动物细胞的培养基。胎牛血清中含有生长因子等蛋白质,且抗体含量少。细胞生物学的研究人员通常会在培养基中加入一定比例的胎牛血清,以帮助维持体外培养(invitro)的细胞的存活。但胎牛血清的组成复杂多变,研究人员一般将其视作成分不明的混合物,认为其可能增加实验结果的不确定性。如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。徐州RPMI 1640 Medium
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