上周，我们后台有收到小伙伴私信问：做制备液相实验时，流动相使用前为什么要脱气?“流动相使用前先脱气”是老师反复强调、标准操作规程里明确标注的步骤，但很多人对其背后的原理和重要性可能一知半解，甚至想偷懒。所以，本周小编决定来和大家唠一唠！一、流动相里藏着“隐形气泡”？我们常用的流动相（比如甲醇、水、乙腈等体系，或含缓冲盐的溶液），即便看起来澄清透明，其实都溶解了一定量的空气，会在你的色谱系统中引发一系列棘手的问题，直接影响分析的准确性、稳定性和仪器寿命。二、偷懒=隐患，不可取想过偷懒的小伙伴这一趴是重点：1、压力不稳+基线噪音现象：色谱基线剧烈漂移、出现毛刺或假峰，泵的输出压力忽高忽低。元凶：流动相中的气泡在高压泵工作时，会被压缩和释放，产生脉冲，导致流速不稳定。这些气泡流经检测器时，会引起剧烈波动，产生噪音。后果：严重影响数据的准确性，特别是在检测低浓度样品时，信号可能被完全淹没在噪音中，白忙活一场。2、峰形畸变+分离失效现象：目标峰拖尾、展宽、分叉，甚至出现“肩峰”。元凶：微小的气泡进入色谱柱后，相当于“堵塞”了部分固定相通道，导致流动相流速不均、传质效率下降。后果：色谱柱的分离效率下降。 无需漫长等待，万立制备液相凭借优化流路设计与高压输送系统，实现快速分离纯化，提升科研效率。flash制备液相色谱订制
2.使用中：关注压力与流量异常实验过程中需实时观察过滤器进出口压力差：正常情况下，新滤膜的初始压力应稳定（通常≤）；若压力突然升高，可能是滤膜堵塞，需立即停止实验，更换滤膜（避免压力过高导致滤膜破裂或溶剂反冲）；若压力骤降，需检查是否因滤膜破损、组件松动导致“短路”，此时应终止实验并排查问题。3.使用后：即时清洁，避免残留沉积实验结束后1小时内必须完成清洁，防止溶剂中的溶质（如缓冲盐、有机物）干涸结晶，堵塞滤膜或管路：l水溶性残留：先用纯水冲洗3-5次，再用5%甲醇水溶液循环冲洗2分钟，纯水洗至中性；l有机相残留：先用与实验溶剂兼容的有机溶剂（如甲醇、乙腈）冲洗，再用纯水冲洗去除有机相，避免滤膜长期接触有机溶剂导致老化；l强极性/高浓度缓冲盐：需用温热纯水（40-50℃）浸泡滤杯10分钟后冲洗，避免盐类结晶附着。三、定期维护除日常操作外，需根据使用频率制定定期维护计划，通常建议每2-4周进行一次深度养护：1、滤膜定期更换：常规使用下，有机相滤膜建议每5-10次实验更换，水相滤膜每3-5次更换；2、组件拆解清洗：【滤杯与滤头】拆解后用软毛刷蘸取5%硝酸溶液或10%异丙醇轻轻刷洗，再用纯水超声清洗15-20分钟。万立中高压液相色谱常见问题制备液相难题，万立仪器为您巧妙来化解。
传统制备液相色谱仪操作复杂，需要专业人员经过长期培训才能熟练掌握，这给中小实验室、企业生产线的使用带来不便。快速制备液相色谱仪采用智能化人机交互系统，配备直观的触控屏幕与预设方法库，用户只需选择对应方法，输入样品信息，即可自动完成仪器参数设置与运行操作。同时，设备具备实时数据监控与异常报警功能，可实时显示分离曲线、组分浓度等数据，当出现压力异常、溶剂不足等问题时，立即发出报警并提示解决方案。即使是刚接触设备的操作人员，也能在1-2小时内掌握基本操作，大幅降低了使用门槛，让更多实验室与生产场景能轻松应用高效的制备液相色谱技术。
注意：终梯度维持时间不宜过长（如超过10分钟），否则会延长分析周期，且高比例有机相可能对某些色谱柱（如亲水作用柱）造成损伤。4.平衡时间：解决“基线漂移”与“保留时间重现性”平衡时间是指梯度运行结束后，用初始流动相冲洗色谱柱的时间，目的是让柱内流动相组成恢复至初始状态，避免“前一次梯度残留影响下一次分析”，导致保留时间漂移、基线不平。优化技巧：基础平衡时间：≥10倍柱体积（CV）柱体积（CV）=πr²L（r为柱半径，L为柱长，单位均为cm），例如×150mm的色谱柱，CV≈；若流速为1mL/min，10倍CV即25mL，对应平衡时间≥25分钟。▶误区：只平衡5-10分钟，柱内流动相未完全恢复，易导致下一次进样的保留时间偏差（如±）。特殊情况调整：用缓冲盐流动相（如磷酸盐、醋酸盐）：平衡时间需延长至15-20倍CV，因为缓冲盐与有机相混合后，在柱内的平衡速度更慢；梯度范围宽（如5%-95%乙腈）：平衡时间延长20%-30%，避免高比例有机相在柱内残留；快速分析（如用×50mm短柱）：可适当缩短至8-10倍CV，但需通过连续进样验证保留时间重现性（RSD≤1%）。三、不同实战场景的梯度优化策略针对常见的分析需求（如杂质检测、复杂样品分离、快速筛查）。万立制备液相色谱仪，适配多种溶剂灵活度高。
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流动相进入泵前先经过脱气模块（通常是真空或膜分离技术），实时去除溶解气体；3、氦气吹扫脱气（效果佳，适合高精度实验）：将惰性气体通入溶剂中把溶解的空气排出。严格来说，此方法不能将溶剂脱气，它只是用低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来。连续通氨脱气效果较好，但成本高。4、抽真空脱气（适合大批量流动相）：将流动相放入真空脱气装置中，抽真空的同时搅拌，让气体快速逸出。缺点是易抽走有机相，使混合溶剂组成发生变化。总结：流动相脱气不是“多此一举”，千万不要因为步骤简单就掉以轻心。花几分钟做好脱气操作，既能避免峰形异常、数据失真等问题，又能保护昂贵的仪器和色谱柱，让实验少走弯路、效率翻倍。声明：图片素材来源于豆包，部分内容来源于网络、《液相色谱宝典》，本篇文章只是用于科普，不作任何商业用途，不构成任何实验指导。如涉及内容或其他问题，请联系我们。本文所述为通用实验室规范，具体操作请参照您所使用的仪器说明书和实验室标准操作规程。 flash制备液相色谱订制
