酶联免疫吸附筛查法是以抗原与抗体的特异性反应、酶与底物的特异性反应为基础,借助酶促反应的放大作用,提高反应的灵敏度来进行检测某一特定物质,具有特异性强、灵敏度高等特点。但复杂的基质样品可使测定结果受到干扰,测定所用过氧化酶的活性易受到样品中脂肪、pH值变化、金属离子的影响,使酶的反应活度下降,在加入底物后,显色偏浅,从而造成结果的假阳性或假阴性。所以该方法适用于大批量样品的快速筛查,对于特殊样品要进行基体加标试验,提高结果的准确度,必要时可用仪器法进行验证。谷物食品中黄曲霉污染存在那些危害?河北实验室装黄曲霉M1试纸
黄曲霉素的危害有那些?近日,一则女子肺部***黄曲霉菌的新闻冲上热搜,起因竟是因秋收时接触发霉玉米所致,其罪魁祸首就是黄曲霉菌。黄曲霉菌并不可怕,通过常规的杀菌方式均可消除,但由其产生的黄曲霉***,却是已知的化学物质中致*性**强的一种,对包括人和若干动物具有强烈的毒性,其毒性作用主要是对肝脏造成不可逆的损伤。黄曲霉素还是是已知的化学物质中致*性**强的一种,黄曲霉***耐热,一般烹调加工温度下难以破坏。农业农村部、国家质检总局和市场监督管理局的监管中,都规定黄曲霉***是相关食品的必检项目之一。河北实验室装黄曲霉M1试纸黄曲霉污染如何快速鉴别?
黄曲霉b1检测试剂盒样本前处理
谷物、配合饲料处理方法(例如:玉米、大米、大豆、猪饲料、鸡饲料等样本)
1)称取2g±0.05g粉碎样本于50ml离心管中,加10ml样本提取液,振荡5分钟,室温4000转/分离心10分钟;
2)取0.5ml上清,加入0.5ml去离子水,混匀;
3)取50µl进行分析。
样本稀释倍数:10检测下限:3ppb
高油脂饲料处理方法
1)称取2g±0.05g粉碎样本于50ml离心管中,加8ml正己烷和10ml样本提取液,振荡5分钟,室温4000转/分离心10分钟;
2)去除上层液体,取0.5ml下层液体加入0.5ml去离子水,混匀;
3)取50µl进行分析。
样本稀释倍数:10 检测下限:3ppb
黄曲霉素M1检测试剂盒技术指标
1试剂盒灵敏度:0.02ppb(ng/ml)
2反应模式:25℃,30min~15min
3检测下限:
谷物……………………………………0.1ppb
饲料……………………………………0.2ppb
4交叉反应率:
黄曲霉素B1…………………………100%
黄曲霉素B2…………………………80%
黄曲霉素G1…………………………75%
黄曲霉素G2…………………………45%
黄曲霉素M1…………………………8%
5样本回收率:
谷物及配合饲料……………………85%±15%
试剂盒组成
酶标板……………………………96孔
标准液(黑盖):各1ml0ppb、0.02ppb、0.04ppb、0.08ppb、0.16ppb、0.32ppb
高标准液:
100ppb…………………1ml
酶标记物(红盖)…………………5.5ml
抗体工作液(蓝盖)………………5.5ml
底物液A(白盖)……………………6ml
底物液B(黑盖)……………………6ml
终止液(黄盖)………………………6ml
20×浓缩洗涤液(白盖)……………40ml
说明书…………………………………1
份盖板膜…………………………………1张
自封袋…………………………………1个 黄曲霉污染的食品还能食用嘛?
黄曲霉m1检测试剂盒酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2加样反应:加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。
3洗涤:小心揭开盖板膜,甩去孔内液体,每孔加350µl工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,***一次拍干(用吸水纸拍干,拍干后未被***的气泡可用干净的***头刺破)。
4显色:每孔加入底物液A50µl,再加底物液B50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。
5终止:每孔加入终止液50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。
6测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。 黄曲霉b1检测卡如何使用?浙江芬德黄曲霉试纸
黄曲霉污染如何分辨?河北实验室装黄曲霉M1试纸
产黄曲霉微生物经常在种植、贮藏、加工和运输过程污染玉米、花生等富含脂肪酸的粮食及相关食品和饲料,并会产生多种有毒次生代谢产物,统称为黄曲霉***。黄曲霉***(Aflatoxins,AFT)是一类化学结构相似、具有强毒性的化合物总称。目前已发现的黄曲霉***有20余种,**常见的有AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2,AFB1与AFB2在体内经过羟化可衍生成AFM1、AFM2,其中M是Milk的简写,奶牛食用了含有AFB1和AFB2的饲料,AFB1和AFB2在奶牛体内经过代谢会有一小部分转化为AFM1、AFM2,这也是牛奶中AFM1、AFM2的来源。在天然环境中受污染的粮食和饲料中以AFB1**为多见,其毒性和致*性也**强。1993年,该类物质被国际**研究机构划为I类致*物,其毒性是**的68倍。河北实验室装黄曲霉M1试纸
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