检测试剂盒实验注意事项:封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。检测试剂盒实验为什么要设置复孔？计算平均值，确保实验结果更准确；解决实验中误操作造成的跳孔现象；计算CV值，对实验的操作和检测试剂盒的精密度进行评估。加样要准确、快速。如果加样不准确，酶生成物的量不能确定，检测试剂盒直接影响显色结果。显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关，所以加样应慎重。固体试剂的取用:贴标签的一面必须朝向手心处【防止药液洒出腐蚀标签】。NBRIP-P培养基
SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 简介： SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)是一种以溴酚蓝为染料的 2.5 倍浓缩的蛋白上样缓冲液， 主要由 SDS、溴酚蓝、EDTA、蔗糖等组成，可用于蛋白上样。 组成： 编号 名称 PE0010 5ml Storage SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 使用说明书 4℃ 1份 操作步骤(光供参考)： 1、 取适量的蛋白样品和 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)混合，充分混匀。 2、 直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。 3、 通常电泳至蓝色染料到达 PAGE 胶的底部附近即可停止。 注意事项： 1、 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)中不含β-巯基乙醇。 2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 12 个月有效。亦可室温短期保存。PIPES缓冲液(10mmol/L,pH6.8)从滴瓶中取用液体试剂时，要用滴瓶中的滴管，滴管决不能伸入所用的容器中。
用亚甲基蓝溶液染色后，被染为深蓝色的部分是（细胞核）亚甲基蓝可以结合核酸，使细胞核呈蓝色。 台盼蓝能使死细胞着色机理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中较常用的死细胞鉴定染色方法之一。
加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。检测试剂盒孔底透明度高的固相载体。
pH缓冲溶液有何用途：（1）pH测量前标定校准pH计。（2）用以检定pH计的准确性，例如，用pH=6.86和pH=14.00，标定pH计后，将pH电极插入pH=9.18溶液中，检查仪器显示值和标准溶液的pH值是否一致。（3）在一般精度测量时检pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化，因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中，根据误差大小确定是否需要重新标定。（4）检测pH电极的性能。如何配制pH标准缓冲溶液：对于一般pH测量，可使用成套的pH组冲试剂（可配制250mL），配制溶液时，应使用去离子水，并预先煮沸15～30分钟，以除去溶解的二氧化碳。剪开塑料袋将试剂倒入烧杯中，用适量去离子水使之溶解，并冲洗包装袋，再倒入250mL容量瓶中，稀释至刻度，充分摇匀即可。杀灭曲线的建立：第2天换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.0)
pH缓冲溶液有何用途：用以检定pH计的准确性。NBRIP-P培养基
试剂盒实验遇到复孔该怎么办。在设计复孔检查时，提出问题：是对同一个样品作两次稀释，再别离加到板上的两个孔，仍是只稀释一次，然后罗致两次别离加到两个孔？前者好像把稀释时的过错也考虑到了，但做出来的成果两个孔相关挺大的。在实验中设复孔，意图是为了削减本次实验的体系过错对实验数据带来的影响，所以应该用第二种，有条件的话复孔的数量能够添加，体系过错更小。选用后者。假定在实验室阶段，或许需求屡次稀释，然后将不同稀释次数的别离做复孔，以便检查稀释进程中带来的过错；假定同一次稀释的复孔一起的存在检测差异大，或许板的均一性存在必定问题（打扫操作因素）。假定不同稀释次数差异大，阐明稀释方法有问题。NBRIP-P培养基
