加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时，有阻碍溶液pH变化的作用，称为缓冲作用。甲基绿染色液(1%)
怎样减少检测试剂盒误差？严控反应时间，反应时间过长，酶失活；反应时间过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合，生成物结构松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假阴性。注意检测试剂盒保存期，过保存期的试剂不能使用。评估试剂的实用性，试剂的稳定与否，对准确率的高低到头重要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品反复比照试验，判定试剂符合要求后方可使用。严格掌握显色时间，显色时间过短，加入终止液反应终止后，底物结合物的量过少，易出现假阴性。超过显色要求时间后显色，应判为假阳性，这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色，不可报阳性，这可能是本底显色的结果。巴氏染色液(Papanicolaou EA36)稀释过的血液样本小心铺到Ficoll分离液上面。
冬季检测试剂盒的正确保存：血清标本如是以无菌操作别离，则可以在2～8℃下保存一周，检测试剂盒如为有菌操作，则主张冰冻保存。样本的长期保存，应在-70℃以下。冰冻保存的血清标本须留心避免因停电等构成的重复冻融。检测试剂盒标本的重复冻融所发作的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发作损坏效果，然后引起假阴性效果。此外，冻融标本的混匀亦应留心，不要进行剧烈振动，重复倒置混匀即可。标本在保存中如出现细菌污染所造成的的混浊或絮状物时，应离心沉积后取上清检测。试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的试验确诊方法。因为其试剂安稳、易保存，操作简便，效果判别较客观等要素，已普遍应用在免疫学查验的各领域中。检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗体检测。
检测试剂盒试验忌讳：浓洗刷液或许会有结晶析出，检测试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先将样本稀释必定倍数（n倍）后再测定，计算时请终乘以稀释倍数（×5×n）。各步加样均应运用加样器，并常常校正其正确性，以防止试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内，如标本数目多，举荐运用排加样。封板膜只限一次性运用，以防止交叉污染。严格按照说明书的操作进行，检测试剂盒试验成果断定有必要以酶标仪读数为准。从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装进密封袋中保存。瓶上装有滴管的试剂瓶称作滴瓶。
挑选检测试剂盒的方法：灵敏度。反应的是检测试剂盒检出被检物质的低量的才行，用户可根据自个样本中待检目标的量挑选合适的检测试剂盒，比如待检目标量很低，一般的检测试剂盒不能满足要求，可挑选高敏的检测试剂盒。重复性：科学试验考究重复性，通常检测试剂盒，其板内和板间变异系数应当控制在15%以内。特异性：检测试剂盒的特异性与检测试剂盒的关键组分，抗体对有关，若抗体对中为多抗，另一个有必要为单抗，推荐运用双单抗。简便性：在确保高质量数据的情况下，试验时间短，操作便捷，这也可以作为挑选检测试剂盒的一个判断。PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂。巴氏染色液(Papanicolaou EA36)
早期的化学试剂只是指“化学分析和化学试验中为测定物质的组分或组成而使用的纯粹化学药品”。甲基绿染色液(1%)
LISA检测试剂盒实验结果分析的三个小建议:实验中样品都要做复孔或三孔，然后计算每个浓度标准品的平均OD值，复孔的变异系数应该小于20%。平均OD值减去空白孔的OD值。制作标准曲线。 以减去本底后的OD值为X轴，标准品的浓度为Y轴，利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图，比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法（比如直线、半对数、对数、四参数方程等）并从中选择一条合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合，可以将标准品的浓度作为未知数，将对应的OD值带入该方程，计算出标准品的浓度，得到的结果应该与实际浓度很接近（+/-10%）。选择拟合度高的那条曲线。甲基绿染色液(1%)
