BMC原代分离步骤：1) 抽取人的外周血于肝素抗凝管中，取足5mL新鲜血液，加入PBS按1：1稀释血液（一般**管2mL+2mL）。2) 取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。3) 吸取稀释血液，在离分层液上方1cm处，沿试管壁徐徐加入，使稀释血液重叠于分层液上，并与分离液形成明显界面。4) 室温，离心2000rpm，20min。此时离心管中形成5层：较上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是淋巴细胞层呈白膜状。5) 小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层，尽量全部吸出单个核细胞。加5倍以上体积的PBS洗2次，每次离心1500rpm，10min。科研实验中试剂取用应注意事项：读数时量筒必须放平稳。琥珀酸钠溶液(0.1mol/L)
潮霉素 B(Hygromycin B) 是一种由吸水链霉菌产生的，能够克制细菌、菌类和 一些高等真核生物细胞内的蛋白质生物合成来。潮霉素 B 属于是氨基糖苷类，通过 克制蛋白质的合成来阻止微生物生长，对原核细胞与真核细胞都是克制作用。 Leagene Hygromycin B solution 常用于转基因实验的抗性筛选，筛选具有潮霉素 B 的抗性基因。 产品组成： 编号 名称 CA0012 CA0012 Storage Hygromycin B solution (50mg/ml) 使用说明书 10ml 20ml 1份 4℃ 避光 操作步骤(光供参考)： 1、 根据实验具体要求操作。 2、 一般植物细胞筛选浓度在 20～200μ g/ml，动物细胞筛选浓度 50～1000μ g/ml，应根 据具体实验选择较佳筛选浓度。琥珀酸钠溶液(0.1mol/L)科研实验中试剂取用应注意事项：取用少量的液体—使用胶头滴管。
Laemmli 加样缓冲液(2×)是一种以溴酚蓝为染料的 2 倍浓缩的蛋白上样缓冲液，主要 由 2-ME、SDS、溴酚蓝、Laemmli 分层缓冲液等组成，可用于不连续蛋白电泳的上样。 组成： 编号 名称 PE0005 5ml Storage Laemmli 加样缓冲液(2×) 使用说明书 4℃ 1份 操作步骤(光供参考)： 1、 取适量的蛋白样品和 Laemmli 加样缓冲液(2×)等量混合，充分混匀。 2、 直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。 3、 通常电泳至蓝色染料到达 PAGE 胶的底部附近即可停止。 注意事项： 1、 Leagene Laemmli 加样缓冲液(2×)中含少量β-巯基乙醇，有轻微刺激性气味。 2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 12 个月有效。亦可室温短期保存。
Tricine加样缓冲液(2×)使用说明书 说明书：①试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。②实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。③使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。④加入试剂的顺序，以保证所有反应板孔温育的时间一样。⑤按说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。Tricine加样缓冲液(2×)：产品规格：5ml。分类：电泳蛋白。储存条件：—20℃,12个月。用途：又称三羟甲基甘氨酸加样缓冲液,Tris-tricine缓冲系统的PAGE电泳。注意事项：主要由Tris-HCl、DTT、G-250等组成。利福平不能经血液透析或腹膜透析除去。
稳定转染细胞的筛选：1、转染48 h后，用含适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。注意：细胞处于活跃分裂状态时的杀伤效果较好。但细胞过于稠密，其效率会降低，较好将细胞稀释至丰度低于25%。2、每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。3、筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间（取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果）。4、挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。5、后续更换正常培养基培养即可。科研实验中试剂取用应注意事项：应在容器的正上方垂直滴入；胶头滴管不要接触容器壁。琥珀酸钠溶液(0.1mol/L)
BMC原代分离步骤：取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。琥珀酸钠溶液(0.1mol/L)
红霉素溶液：红霉素(Erythromycin)是由红霉素链霉菌(Streptomyces erythreus)所产生的大环内酯类克菌素，分子量为733.93。红霉素对革兰阳性菌(如绿色链球菌、葡萄球菌、炭疽杆菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌、溶血性链球菌、梭状芽孢杆菌等)具有很好的克菌性。另外，红霉素对某些革兰阴性菌也有一定的抑菌作用。红霉素抑菌作用在于其与细菌的聚核糖体结合而克制肽链的延伸，对青霉素产生耐药性的菌株，对红霉素敏感。临床上，红霉素常用于耐青霉素的金葡菌传染及对青霉素过敏的金葡菌传染。Leagene Erythromycin solution主要用于科研领域，不用于临床诊断或其他用途。琥珀酸钠溶液(0.1mol/L)
