上海PUYU左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

分析过程1.4.1样品预处理在小烧杯中称取5g（精确至0.1mg）奶粉样品，用30mL、40℃的水溶解至100mL的容量瓶中。高氯酸溶液加10mL后，上下混合均匀，静置20min。用三级水定容后混匀，用定量滤纸过滤至100mL的三角瓶中。吸取20mL滤液于50mL的小烧杯中，用氢氧化钾溶液调节滤液的pH值，当pH值达到12.5～13.0，放入40℃水浴锅中60min。经冷却后，用高氯酸调节pH达到7.0～7.5。小心地转入50mL的容量瓶中，定容混匀，放入4℃的冰箱过夜。用时取出放置至室温后，用注射器吸取上清液用滤膜过滤待用。1.4.2绘制标准曲线在2个1cm的比色皿中分别吸取2.0mL的左旋肉碱标准工作液，分别加入0.8mL的显色工作液和100μL的CoA溶液混匀，放入分光光度仪中，在412nm的波长下5min后进行归零。在外槽的比色皿中加入100μL的CAT溶液混匀，反应10min后比色。制作標准曲线，横坐标为左旋肉碱标准工作液浓度，纵坐标为吸光度值[4]。1.4.3测定样品按照步骤“1.4.2”测定处理好的样液的吸光值，查得样液浓度。 上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，有需要可以联系我司哦！上海PUYU左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

乙酰辅酶A（Acetyl-CoA）含量测定试剂盒说明书分光光度法25管/24样正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义乙酰辅酶A***存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化，经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水，释放能量用于ATP合成。此外，乙酰辅酶A是合成脂肪酸，酮体，胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。测定原理苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶A和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应，乙酰辅酶A含量和NADH的生成速率成正比黑龙江PUYU左旋肉碱测定用试剂L肉碱上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，竭诚为您。

精密度本实验进行精密度验证，选取1个婴幼儿配方奶粉样品进行7次重复性测定，结果见表3。结果表明：经重复性实验得到的相对标准偏差为1.77%，符合（GB/T27417—2017）的要求。2.4回收率本实验的回收率验证是通过将已知浓度的分析物加入样品中，使加标后样品中的左旋肉碱浓度分别处于标准曲线的低、中、高3个浓度，按照预定的分析方法进行检测，计算左旋肉碱的回收率[5]，但婴幼儿配方奶粉中左旋肉碱含量比较高，无法达到标准曲线低浓度范围，故加标样A将已知浓度的分析物加到空白中，加标样B、C加入同一样品中

1试验方法——《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》（GB29989—2013）1.1原理概述将样品中的蛋白质用高氯酸溶液沉淀，过滤后的滤液用氢氧化钾溶液皂化，使左旋肉碱游离。在乙酰肉碱转移酶的催化作用下，游离的左旋肉碱和乙酰辅酶A反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶A。辅酶A和显色剂发生显色反应，可从工作曲线上查得相应的质量浓度，据此计算样品中左旋肉碱的含量。1.2试验用品1.2.1试剂和标准品13%的高氯酸溶液（HClO4）;4mol/L的氢氧化钾溶液（KOH）;10mol/L的氢氧化钠溶液（NaOH）;2-硝基苯甲酸;N-2-羟乙基哌嗪-2-乙烷磺酸;乙二胺四乙酸二钠;乙酰辅酶A（CoA）;乙酰肉碱转移酶（CAT）。其中，乙酰辅酶A（CoA）和乙酰肉碱转移酶（CAT）需要在2～8℃的环境中保存。试验用水均为三级水，所用试剂均为分析纯。左旋肉碱标准品（C7H15NO3）：纯度≥98%。上海普誉科贸有限公司是一家专业提供 左旋肉碱测定用的公司，欢迎您的来电！

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法

该方法也有不足,由于DTNB 还能与待测样品中其他的硫醇类(-SH)物质起反应DTNB与CoASH不能完全反应,从而影响测定的准确度。因此为了消除-SH物质的干扰Marquis 在测定前将样品置于90CpH85的环境中处理5min;也有人用H20，化样品中含硫醇基的物质8(2)2-酮戊二酸脱酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)对原方法进行改进,在测定游离辅酶A时用2-  戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脱酶(OGDH)催化下与COASH反应生产珀酷辅酶A和还原型辅酶I(NADH)NADH在340m 处有强吸收。与原方法相比，OCDH与 COASH反应的专一性更强，反应更加完全,且不受其他-SH 的影响。该方法灵敏度高至nmol级，肉碱回收率在103%~115%之间适合低肉碱含量的样品。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，让您满意，欢迎新老客户来电！吉林实验室用左旋肉碱测定用试剂HEPES

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