陕西婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

GB29989

乙酰肉碱转移酶(CAT)溶液：吸取100µL乙酰肉碱转移酶悬浮液，经1500r/min离心10min，弃去上层清液，沉淀用2mL水溶解。临用时配制。

标准品左旋肉碱标准品（C7H15NO3）：纯度≥98%。

标准溶液配制

左旋肉碱标准储备液（80µg/mL）：准确称取20mg（精确0.0001g）于102℃±2℃烘箱中烘2h的左旋肉碱，用水定容至250mL容量瓶中。此液置于4℃冰箱中可保存1个月。

左旋肉碱标准工作液：分别吸取左旋肉碱标准储备液0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL于25mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。此溶液***于当天使用。

仪器和设备 分析天平：感量0.1mg。 pH计：精度0.01。 离心机：转速≥1500r/min。 恒温水浴锅：温度可控制在40℃±2℃。 分光光度计。 上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，有需要可以联系我司哦！陕西婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

酶循环法MamoruTakahashi等(1(1994)开发了一种使用肉碱脱氢酶(CDH)测定血清中左旋肉碱的高灵敏度方法。该方法是一个还原型辅酶I(NADH硫代氧化型辅酶I(Thio-NAD+)和肉碱脱酶(CDH)共同参与的新型酶循环技术,原理是左旋肉碱在CDH和Thio-NAD+的存在下转化为脱氢肉碱同时生成硫代还原型辅酶I(Thio-NADH)脱肉碱又在CDH和NADH的存在下转化为左旋肉碱同时生成NAD+此反应每循环一次,将生成与左旋肉碱等当量的Thio-NADH,因此在一定时间内,循环反应的次数便是Thio-NADH生成相当于左旋肉碱的倍数通过测定Thio-NADH积累而引起415nm处的光吸收增量即可得知左旋肉碱的含量,还可以提高左旋肉碱的n倍灵敏度。用该方法测定血清中L-肉碱时L肉碱的标准曲线在5~250mol/L范围内是线性收率在96.5%~106%之间批内与批间的变异系数(CD分别为在0.66%~4.33%之间和1.02%~2.56%之间。该方法不受胆红素、血红蛋白各种酷酷DL-肉碱和抗坏血酸盐的干扰，且操作过程简单、快速、精确、自动。陕西左旋肉碱测定用试剂上海普誉科贸有限公司为您提供 左旋肉碱测定用，有想法的可以来电咨询！

法验证参数

线性和线性范围左旋肉碱标准储备液浓度为80μg/mL。吸取0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL的左旋肉碱标准储备液定容到25mL，经过计算，该系列标准溶液中左旋肉碱的质量浓度分别为1.6μg/mL、3.2μg/mL、6.4μg/mL、9.6μg/mL、16μg/mL。以左旋肉碱标准工作液的浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，制作标准曲线。标准曲线线性方程结果见表1。2.2检出限和定量限左旋肉碱的检出限采用空白标准偏差法评估，即通过分析大量（n≥10）样品空白确定检出限（LOD）。本次实验通过10次样品空白**测试，计算出检测结果的算数平均值（X）和标准偏差（S）确定检出限（LOD）。计算公式如下：LOD=X+3S上式中：LOD为方法检出限（mg/100g）;X为10次**空白平均值;S为10次**空白标准偏差。定量限（LOQ）的确定主要是从其可信性考虑，为了增加数据的可信性，将10倍的检出限作为本检验方法的定量限。实验结果见表2。当样品称样量为5.0000g时，该方法的检出限為0.187mg/100g，定量限为1.87mg/100g。

乙酰辅酶性质乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，**酸氧化脱羧，脂酸的β－氧化的产物。同时，它是脂酸合成，胆固醇合成和酮体生成的碳来源。三大营养物质的彻底氧化殊途同归，都会生成乙酰辅酶A以进入三羧酸循环。乙酰辅酶A是活化了的乙酸。基团（CH3CO-=乙酰基）与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。这其实是高能键硫酯键。它是脂肪酸的beta-氧化及糖酵解后产生的**酸氧化脱羧的产物。在三羧酸循环的第一步，乙酰基转移到草酰乙酸中，生成柠檬酸。循环也叫柠檬酸循环。左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，让您满意，欢迎新老客户来电！

一般描述乙酰辅酶A，三锂盐应用乙酰辅酶A用于使用放射性同位素测定细胞提取物中的CAT酶活性。细胞提取物中的CAT酶活性催化乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素。已经开发了许多测定来测量细胞提取物中的CAT活性。乙酰辅酶A也已用于测定柠檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰辅酶A（Ac-CoA）是糖酵解的**终产物，参与Ac-CoA途径，这是碳化合物的代谢途径。Ac-CoA在胆固醇合成中十分重要。它还参与脂肪酸的生物合成和多胺（如精胺和亚精胺）的分解代谢。低水平的Ac-CoA导致神经胶质细胞和神经元功能的丧失。酮体和甘油三酯在水解时产生Ac-CoA，这间接导致组蛋白乙酰化增加。制备说明工作溶液：比较好溶剂：具有弱酸性pH（4至5）的水或水溶液。储存条件（工作溶液）：-15至-25°C50mg/ml磷酸盐缓冲液，pH7，在-15至-25℃下，可稳定保存3周。未冻存的溶液应立即使用。其他说明*用于生命科学研究。不可用于诊断。左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，用户的信赖之选，有需求可以来电咨询！陕西婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

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GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

标准曲线的绘制吸取左旋肉碱标准工作液2.0mL于1cm比色皿中，加入0.8mL显色工作液和100µL乙酰辅酶A溶液，盖上比色皿盖，混合均匀后放入分光光度计中，分光光度计的波长调为412nm，5min后归零。迅速加入100µL乙酰肉碱转移酶溶液，混合均匀后放入分光光度计中，反应10min后记录吸光值。以左旋肉碱标准工作液的浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标，制作标准曲线。

试样测定取2.0mL试样处理液按上述的步骤测定其吸光值。在标准曲线上查得试样待测液的浓度。

分析结果的表述试样中的左旋肉碱的含量X，以质量分数mg/100g表示7精密度在重复性条件下获得的两次**测定结果的***差值不应超过算术平均值的10%。

其他方法检出限0.6mg/100g，定量限为2mg/100g。 陕西婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

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