咸阳左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

标准曲线的绘制吸取左旋肉碱标准工作液2.0mL于1cm比色皿中，加入0.8mL显色工作液和100µL乙酰辅酶A溶液，盖上比色皿盖，混合均匀后放入分光光度计中，分光光度计的波长调为412nm，5min后归零。迅速加入100µL乙酰肉碱转移酶溶液，混合均匀后放入分光光度计中，反应10min后记录吸光值。以左旋肉碱标准工作液的浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标，制作标准曲线。

试样测定取2.0mL试样处理液按上述的步骤测定其吸光值。在标准曲线上查得试样待测液的浓度。

分析结果的表述试样中的左旋肉碱的含量X，以质量分数mg/100g表示7精密度在重复性条件下获得的两次**测定结果的***差值不应超过算术平均值的10%。

其他方法检出限0.6mg/100g，定量限为2mg/100g。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，让您满意，欢迎您的来电哦！咸阳左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法

该方法也有不足,由于DTNB 还能与待测样品中其他的硫醇类(-SH)物质起反应DTNB与CoASH不能完全反应,从而影响测定的准确度。因此为了消除-SH物质的干扰Marquis 在测定前将样品置于90CpH85的环境中处理5min;也有人用H20，化样品中含硫醇基的物质8(2)2-酮戊二酸脱酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)对原方法进行改进,在测定游离辅酶A时用2-  戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脱酶(OGDH)催化下与COASH反应生产珀酷辅酶A和还原型辅酶I(NADH)NADH在340m 处有强吸收。与原方法相比，OCDH与 COASH反应的专一性更强，反应更加完全,且不受其他-SH 的影响。该方法灵敏度高至nmol级，肉碱回收率在103%~115%之间适合低肉碱含量的样品。 陕西婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂硝基苯甲酸上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，欢迎您的来电！

一般描述乙酰辅酶A，三锂盐应用乙酰辅酶A用于使用放射性同位素测定细胞提取物中的CAT酶活性。细胞提取物中的CAT酶活性催化乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素。已经开发了许多测定来测量细胞提取物中的CAT活性。乙酰辅酶A也已用于测定柠檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰辅酶A（Ac-CoA）是糖酵解的**终产物，参与Ac-CoA途径，这是碳化合物的代谢途径。Ac-CoA在胆固醇合成中十分重要。它还参与脂肪酸的生物合成和多胺（如精胺和亚精胺）的分解代谢。低水平的Ac-CoA导致神经胶质细胞和神经元功能的丧失。酮体和甘油三酯在水解时产生Ac-CoA，这间接导致组蛋白乙酰化增加。制备说明工作溶液：比较好溶剂：具有弱酸性pH（4至5）的水或水溶液。储存条件（工作溶液）：-15至-25°C50mg/ml磷酸盐缓冲液，pH7，在-15至-25℃下，可稳定保存3周。未冻存的溶液应立即使用。其他说明*用于生命科学研究。不可用于诊断。

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法酶技术法是目前测定左旋肉碱较为常用的方法,主要包括酶技术的分光光度法、放射酶法、自动分析仪法、荧光光度法、酶循环法等。1.1(1)酶显色法。酶显色法也被称为2-基甲酸(DTNB)法，是目前测定左旋肉碱较为常用的方法。该方法**开始是由Marquis和Fritz于1964年建立,检测了小鼠组织中的游离肉碱后经进一步完善成为现在的方法。该方法的机理为:左旋肉碱与乙酷辅酶A(乙酷COA)在乙肉碱转移酶(CAT)的催化下反应生成乙酷肉碱和游离辅酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反应生成黄色物质其颜色深浅与COASH的含量成正比。因COASH与左旋肉碱是等摩尔反应关系,通过分光光度法测定COASH生成量即可间接测定左旋肉碱的含量。该方法操作经济、快捷，且该方法中催化全CAT酶对于左旋肉碱和乙酷辅酶A之间的反应具有专一性,从而可以排除右旋肉碱的干扰,故灵√下高检出限为0.6mg/100g重复性和回收率较收率在96.2%~104.7%之间口。而且与化学法(通过比色法测定肉碱和澳酚蓝反应生成的有色物质来测定肉碱)相比,此法不受样品中所含季胺类物质的影响。国家标准《GB29989婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中使用的便是此方法。 上海普誉科贸有限公司为您提供 左旋肉碱测定用。

GB29989

乙酰肉碱转移酶(CAT)溶液：吸取100µL乙酰肉碱转移酶悬浮液，经1500r/min离心10min，弃去上层清液，沉淀用2mL水溶解。临用时配制。

标准品左旋肉碱标准品（C7H15NO3）：纯度≥98%。

标准溶液配制

左旋肉碱标准储备液（80µg/mL）：准确称取20mg（精确0.0001g）于102℃±2℃烘箱中烘2h的左旋肉碱，用水定容至250mL容量瓶中。此液置于4℃冰箱中可保存1个月。

左旋肉碱标准工作液：分别吸取左旋肉碱标准储备液0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL于25mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。此溶液***于当天使用。

仪器和设备 分析天平：感量0.1mg。 pH计：精度0.01。 离心机：转速≥1500r/min。 恒温水浴锅：温度可控制在40℃±2℃。 分光光度计。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，欢迎新老客户来电！陕西婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂硝基苯甲酸

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乙酰辅酶A羧化酶（Acetyl-CoAcarboxylase，ACC）在生物体内催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酰辅酶A，是脂肪酸和许多次生代谢产物合成的关键酶。ACC的活性在一定程度上决定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。ACC能够催化乙酰辅酶A、NaHCO3和ATP生成丙二酰辅酶A、ADP和无机磷，钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定ACC活性。可见分光光度法

溶液的配制：试剂二：临用前将试剂二 B、试剂二 C 倒入试剂二 A，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂三：临用前加入 6 mL 双蒸水，充分溶解待用；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂四：临用前加入 15 mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周；试剂五：临用前加入 15 mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周；标准品：10 μmol/mL 标准磷贮备液；提取液的配制：按提取液一：提取液二=990：10（V：V）的比例配制，根据样本量现配现用，禁止将提取液二一次性全部加入提取液一混匀分装待用；工作液（定磷剂）的配制：按 H2O：试剂四：试剂五：试剂六=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液应为浅黄色；若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用； 咸阳左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

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