浙江维生素BT测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

乙酰辅酶性质乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，**酸氧化脱羧，脂酸的β－氧化的产物。同时，它是脂酸合成，胆固醇合成和酮体生成的碳来源。三大营养物质的彻底氧化殊途同归，都会生成乙酰辅酶A以进入三羧酸循环。乙酰辅酶A是活化了的乙酸。基团（CH3CO-=乙酰基）与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。这其实是高能键硫酯键。它是脂肪酸的beta-氧化及糖酵解后产生的**酸氧化脱羧的产物。在三羧酸循环的第一步，乙酰基转移到草酰乙酸中，生成柠檬酸。循环也叫柠檬酸循环。上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，有需求可以来电咨询！浙江维生素BT测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

一般描述乙酰辅酶A，三锂盐应用乙酰辅酶A用于使用放射性同位素测定细胞提取物中的CAT酶活性。细胞提取物中的CAT酶活性催化乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素。已经开发了许多测定来测量细胞提取物中的CAT活性。乙酰辅酶A也已用于测定柠檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰辅酶A（Ac-CoA）是糖酵解的**终产物，参与Ac-CoA途径，这是碳化合物的代谢途径。Ac-CoA在胆固醇合成中十分重要。它还参与脂肪酸的生物合成和多胺（如精胺和亚精胺）的分解代谢。低水平的Ac-CoA导致神经胶质细胞和神经元功能的丧失。酮体和甘油三酯在水解时产生Ac-CoA，这间接导致组蛋白乙酰化增加。制备说明工作溶液：比较好溶剂：具有弱酸性pH（4至5）的水或水溶液。储存条件（工作溶液）：-15至-25°C50mg/ml磷酸盐缓冲液，pH7，在-15至-25℃下，可稳定保存3周。未冻存的溶液应立即使用。上海维生素BT测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A三锂盐上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，价格实惠，有需要可以联系我司哦！

乙酰辅酶A的提取1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。2、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。测定步骤1、分光光度计预热30min，用蒸馏水于340nm处调零。2、取920μL工作液和100μL样本至1mL石英比色皿，混匀，立即记录340nm处20s的吸光值A1和80s时的吸光值A2，计算ΔA=A2-A1

婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

分析过程1.4.1样品预处理在小烧杯中称取5g（精确至0.1mg）奶粉样品，用30mL、40℃的水溶解至100mL的容量瓶中。高氯酸溶液加10mL后，上下混合均匀，静置20min。用三级水定容后混匀，用定量滤纸过滤至100mL的三角瓶中。吸取20mL滤液于50mL的小烧杯中，用氢氧化钾溶液调节滤液的pH值，当pH值达到12.5～13.0，放入40℃水浴锅中60min。经冷却后，用高氯酸调节pH达到7.0～7.5。小心地转入50mL的容量瓶中，定容混匀，放入4℃的冰箱过夜。用时取出放置至室温后，用注射器吸取上清液用滤膜过滤待用。1.4.2绘制标准曲线在2个1cm的比色皿中分别吸取2.0mL的左旋肉碱标准工作液，分别加入0.8mL的显色工作液和100μL的CoA溶液混匀，放入分光光度仪中，在412nm的波长下5min后进行归零。在外槽的比色皿中加入100μL的CAT溶液混匀，反应10min后比色。制作標准曲线，横坐标为左旋肉碱标准工作液浓度，纵坐标为吸光度值[4]。1.4.3测定样品按照步骤“1.4.2”测定处理好的样液的吸光值，查得样液浓度。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，欢迎您的来电！

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法酶技术法是目前测定左旋肉碱较为常用的方法,主要包括酶技术的分光光度法、放射酶法、自动分析仪法、荧光光度法、酶循环法等。1.1(1)酶显色法。酶显色法也被称为2-基甲酸(DTNB)法，是目前测定左旋肉碱较为常用的方法。该方法**开始是由Marquis和Fritz于1964年建立,检测了小鼠组织中的游离肉碱后经进一步完善成为现在的方法。该方法的机理为:左旋肉碱与乙酷辅酶A(乙酷COA)在乙肉碱转移酶(CAT)的催化下反应生成乙酷肉碱和游离辅酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反应生成黄色物质其颜色深浅与COASH的含量成正比。因COASH与左旋肉碱是等摩尔反应关系,通过分光光度法测定COASH生成量即可间接测定左旋肉碱的含量。该方法操作经济、快捷，且该方法中催化全CAT酶对于左旋肉碱和乙酷辅酶A之间的反应具有专一性,从而可以排除右旋肉碱的干扰,故灵√下高检出限为0.6mg/100g重复性和回收率较收率在96.2%~104.7%之间口。而且与化学法(通过比色法测定肉碱和澳酚蓝反应生成的有色物质来测定肉碱)相比,此法不受样品中所含季胺类物质的影响。国家标准《GB29989婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中使用的便是此方法。 上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，欢迎新老客户来电！上海维生素BT测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A三锂盐

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精密度本实验进行精密度验证，选取1个婴幼儿配方奶粉样品进行7次重复性测定，结果见表3。结果表明：经重复性实验得到的相对标准偏差为1.77%，符合（GB/T27417—2017）的要求。2.4回收率本实验的回收率验证是通过将已知浓度的分析物加入样品中，使加标后样品中的左旋肉碱浓度分别处于标准曲线的低、中、高3个浓度，按照预定的分析方法进行检测，计算左旋肉碱的回收率[5]，但婴幼儿配方奶粉中左旋肉碱含量比较高，无法达到标准曲线低浓度范围，故加标样A将已知浓度的分析物加到空白中，加标样B、C加入同一样品中浙江维生素BT测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶