PCR基本参数
  • 品牌
  • 巧亦捷,ingenova,翊新诊断,翊创生物,AccordQ
  • 型号
  • AQ1132
PCR企业商机

巧亦捷(ingeNova)是翊新诊断技术(苏州)有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌,以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测,非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测,牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测,人畜共患病核酸检测,以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台,巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。克服其他检测方法的缺点与目前临床上已有的大部分病原检测方法相比,巧亦捷核酸检测一体机都有其独特优势。苏州动物源PCR技术在动物疫病检测的应用

苏州动物源PCR技术在动物疫病检测的应用,PCR

目前市面上有很多PCR仪器,一时间让兽医师无从选择,但大多数都是PCR扩增仪,即需要人工进行核酸提取和纯化。他们都有以下痛点:1、核酸提取和纯化的操作麻烦并且需要专业的技术人员和场地,有些还需要配置高速离心机,人工核酸提取需要30~40分钟并容易导致污染。2、人工反复开盖加入或倒出试剂,容易导致人为和气溶胶污染,导致结果不准确。因此针对宠物医院来说,需要一台集核酸提取、纯化和扩增为一体的全自动核酸检测仪。能更好的控制人工成本及试剂成本。江苏便携式PCR技术传染性疾病在宠物中比较常见,由多种病原体如寄生虫,细菌,病毒等引起,且多具有传染性,死亡率也较高。

苏州动物源PCR技术在动物疫病检测的应用,PCR

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。

市面上一般的实时荧光PCR检测过程:待检样品通过DNA提取试剂盒提取DNA。样本制备完成后,进行荧光定量PCR扩增。Ct值由实时荧光PCR仪软件自动确定。此法需要配置实时荧光PCR仪,这对中小型宠物医院、兽医站等来说,是一笔不小的负担:且操作需要更专业的技术人员。巧亦捷针对此产品痛点特推出薄膜微流控核酸检测一体机,集核酸提取、PCR扩增为一体,无需专业实验室、无需专业检测人员,真正实现了“样本进,结果出”,大部分检测项目可在30~70分钟内完成,检测快速、结果准确。巧亦捷核酸一体机,给宠物医院、兽医站、养殖场等带来了更大“福利”,减少了诊断等候时间。

苏州动物源PCR技术在动物疫病检测的应用,PCR

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。传统的免疫学检测(如:荧光和胶体金)存在灵敏性和特异性的局限性。苏州动物源PCR技术在动物疫病检测的应用

巧亦捷是翊新诊断全力打造的、服务于动物体外诊断的产品品牌。苏州动物源PCR技术在动物疫病检测的应用

在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。两者的区别:胶体金是针对病毒蛋白质的检测,PCR检测是针对病毒核酸的检测。病毒蛋白质和病毒核酸对于病毒来说都是独特的,因此它们都可以确定病毒的身份。但目前医学上无法进行病毒蛋白质的扩增,因此当样本中病毒量少的情况下,就有可能无法找到病毒;而PCR病毒核酸检测的关键就在于可以将核酸进行不断地复制和扩增,所以PCR检测的灵敏度就更高,更容易在样本病毒量相对少的情况下更早地确认病毒。假设一个样本病毒量在10万以上,胶体金技术和PCR技术可以同时检测确诊阳性;但如果样本病毒量低于10万,则只能依靠PCR技术。苏州动物源PCR技术在动物疫病检测的应用

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