评估疫苗免疫效果或康复者血清中和能力的关键是病毒中和抗体检测。传统的空斑减少中和试验(PRNT)耗时费力。基于假病毒系统的均相发光中和试验已成为高通量替代方案。将表达荧光素酶的报告基因包装进假病毒颗粒(携带目标病毒的囊膜蛋白)。当假病毒炎症细胞时,会驱动荧光素酶表达。如果样本中存在中和抗体,则会阻断炎症,导致荧光素酶信号下降。检测时只需在炎症后裂解细胞并加入发光底物,即可实现快速、定量、高通量的中和抗体滴度测定,在COVID-19等疫病中发挥了重要作用。均相化学发光的信号放大机制是怎样的?黑龙江化学发光均相发光免疫分析
GPCR是比较大的药物靶点家族,其功能研究涉及配体结合、第二信使产生、下游信号通路活化等多个层面。均相发光技术多方面渗透于此领域。对于配体结合竞争实验,可采用TR-FRET,将受体标记供体,配体标记受体。对于GPCR活化后比较关键的cAMP积累或IP3/DAG产生,均有成熟的均相检测试剂盒。例如,cAMP检测常采用基于抗体竞争原理的均相发光免疫分析。细胞裂解后,内源性cAMP与加入的标记cAMP竞争结合有限量的抗cAMP抗体。抗体结合事件通过FRET或Alpha技术被检测,信号强度与内源性cAMP浓度成反比。这类方法直接在细胞裂解液中进行,快速、灵敏,完美契合GPCR激动剂/拮抗剂的高通量筛选。天津均相化学发光均相发光优点均相化学发光对检测环境有什么特殊要求?
Alpha(Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay)技术是均相化学发光的典范。其供体珠中装载光敏剂,在680nm激光激发下,将周围环境中的氧分子转化为高能量、短寿命(约4微秒)的单线态氧。单线态氧在溶液中的扩散半径只约200纳米。受体珠中则装载了化学发光剂(通常是噻吩衍生物)和荧光接收体。当单线态氧扩散进入邻近的受体珠,会触发一系列级联反应:化学发光剂被氧化并发光,该能量随即传递给荧光接收体,比较终发射出波长更长(520-620nm)、特征更明显的荧光。这个能量转移和放大的过程,使得一个单线态氧分子能引发大量发光分子的发射,实现了信号的有效放大,因此灵敏度极高。
适配体是通过体外筛选得到的单链DNA/RNA分子,能特异性结合小分子、蛋白质甚至细胞。将适配体的高特异性与均相化学发光的高灵敏度结合,催生了新型生物传感器。设计策略包括:构象开关型:适配体与化学发光标记物(如吖啶酯)和淬灭基团相连,结合靶标后构象变化,改变发光效率。分裂型:将化学发光酶或催化其反应的组分分割,分别与分裂的适配体序列连接,靶标存在时适配体重组,恢复发光活性。邻近连接型:两个适配体分别结合靶标的不同部位,拉近其携带的化学发光反应组分(如供体/受体珠),触发信号。这些传感器在环境监测、食品安全和生物标志物检测中潜力巨大。均相化学发光在全球体外诊断市场的竞争态势如何?
外泌体等细胞外囊泡(EVs)是疾病诊断的潜在生物标志物来源。其分离和表征通常繁琐。均相化学发光技术提供了快速分析方案。利用EVs表面普遍或特异性表达的膜蛋白(如CD9、CD63、CD81或相关抗原),将针对不同蛋白的抗体分别偶联Alpha供体珠和受体珠。当EVs存在时,多个抗体结合到同一个EV上,拉近微珠产光信号,从而实现EVs的定量。通过使用不同抗体组合,还可以对EVs进行亚群分型分析。这种方法无需超速离心,操作简单,有望用于临床样本的快速筛查。均相化学发光的检测速度如何,能否满足快速诊断需求?均相化学发光均相发光技术
体外诊断新机遇!均相发光新产品,助您抢占先机!黑龙江化学发光均相发光免疫分析
在药物安全性评价早期,评估化合物的遗传毒性至关重要。传统的细菌回复突变试验(Ames试验)周期较长。一些基于哺乳动物细胞的均相化学发光遗传毒性筛选方法被开发出来。例如,使用工程细胞系,其中DNA损伤响应元件(如p53响应元件)调控着荧光素酶报告基因的表达。当化合物引起DNA损伤时,会活化报告基因,产生化学发光信号。这类方法能在几天内完成对大量化合物的初步遗传毒性风险评估,作为Ames试验的高通量预筛选工具,有助于早期淘汰有风险的候选分子,节约研发成本。黑龙江化学发光均相发光免疫分析
具有较佳的光泽度,具有不连续的粗纹。用于建筑内外装饰材料、电器产品及厨房设备等。细砂:用粒度150-180号研磨带研磨出来的产品。具有较佳的光泽度,具有不连续的粗纹,条纹比用于浴池、建筑内外装饰材料、电器产品、厨房设备及食品设备等。#320用320号研磨带研磨出来的产品。具有较佳的光泽度,具有不连续的粗纹,条纹比用于浴池、建筑内外装饰材料、电器产品、厨房设备及食品设备等。毛丝面HAIRLINE:HL经适当粒度抛光砂带的连续研磨生成研磨花纹的产品(细分150-320号)。主要用于建筑装饰,电梯,建筑物的门、面板等。亮面:BA经冷轧后施以光亮退火,并经过平整得到的产品。表面光泽度极...