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食品快速检测技术手段是什么?(1)免疫分析技术较好地测定有机磷类、氨基甲酸酯类等几十种农药,是国外发展的主流技术,特别是对于兽药残留的检测。免疫分析技术所用仪器和试剂盒(卡)一半以上依赖进口,价格较高,而国产产品的质量与价格都不具备明显优势,推广受到限制。该技术用于菌类的测定,包括侧流式免疫吸附法和ELISA,后者是国外的主流技术。菌类的快速检测技术在国内应用较少,非常有必要发展重要菌类的免疫分析技术。(2)生物化学快速检测技术主要用于大肠菌群的检测,应用领域涉及鲜乳中菌落总数快速测定、畜禽产品大肠菌群快速测定技术规范等。致病微生物快速检测的主流技术大多为国外技术。瘦肉精快速检测卡是采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术设计的一种快速检测试剂。贵州农残胶体金检测卡
胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性,如蛋白质、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的稳定效果。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。中国台湾林可霉素胶体金检测卡层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式。
抗体检测采用胶体金免疫技术,在结合垫处喷涂胶体金标记的重组病毒抗原和质控抗体金标记物;NC膜上包被两条检测线(G线和M线)和一条质控线(C线)。M线包被有鼠抗人IgM单抗,G线包被有鼠抗抗人IgG单抗,C线包被有质控抗体。样本加到加样孔中,该样本在层析作用下将沿检测卡向前移动,如果样本中含有病毒IgM抗体,则该抗体与胶体金标记病毒抗原结合,形成夹心复合物,将会呈现阳性结果。如果样本中含有病毒IgG抗体,则该抗体会与胶体金标记病毒抗原结合,形成夹心复合物,将会呈现阳性结果。该检测卡还包含一条质控线(C线),用于判断层析过程是否顺利。
制备高质量胶体金的注意事项是什么?(1)玻璃器皿必须彻底清洗,较好是经过硅化处理的玻璃器皿,或用第1次配制的胶体金稳定的玻璃器皿,再用双馏水冲洗后使用。否则影响生物大分子与金颗粒结合和活化后金颗粒的稳定性,不能获得预期大小的金颗粒。(2)试剂配制必须保持严格的纯净,所有试剂都必须使用双馏水或三馏水并去离子后配制,或者在临用前将配好的试剂经超滤或微孔滤膜(0.45mm)过滤,以除去其中的聚合物和其它可能混入的杂质。(3)配制胶体金溶液的pH以中性(pH7.2)较好。(4)氯金酸的质量要求上乘,杂质少。较好是进口的。(5)氯金酸配成1%水溶液在4℃可保持数月稳定,由于氯金酸易潮解,因此在配制时,较好将整个小包装一次性溶解。胶体金可以以液体状态稳定存在,通常为红色,并且在碱性条件下表面带负电。
胶体金快速检测卡是采用胶体金免疫层析技术研制而成的,此技术是90年代初在免疫渗透技术的基础上建立的一种快捷简单的免疫学检测技术,市场上一般用到的有双抗体夹心法、双抗原夹心法、小分子竞争法等等。胶体金是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,金离子还原后聚合成的一定大小的金颗粒,它由一个基础的晶核(11个金原子形成的二十面体)和包围在外的双离子层构成(内层为负离子层AuCl2-,外层是带正电荷的H+)。由于静电作用,金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,故称胶体金。 。质量差的溶液烧制后,液面有漂浮物,大小不一,形状各异。胶体金颗粒大小,决定了我们用肉眼观察到的胶体金溶液颜色,由红到紫色。胶体金检测卡使用时将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温平衡30 min以上,使用前均须摇匀。广州猪瘟胶体金检测卡
胶体金普遍地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。贵州农残胶体金检测卡
胶体金免疫层析法:将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条,使用十分方便。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。贵州农残胶体金检测卡
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