病毒是一种个体微小,结构简单,只含一种核酸(DNA或RNA),必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的生物。病毒是一种非细胞生命形态,它由一个核酸长链和蛋白质外壳构成,病毒没有自己的代谢机构,没有酶系统。病毒是颗粒很小、以纳米为测量单位、结构简单、寄生性严格,以复制进行繁殖的一类非细胞型微生物。病毒是比细菌还小、没有细胞结构、只能在细胞中增殖的微生物。病毒由蛋白质和核酸组成。一般,大部分病毒要用电子显微镜才能观察到。高通量测序技术对核酸进行测序是非特异的,因此,对一无所知的核酸也可以实现鉴别。北京新病原筛查服务公司
除了利用病毒的致病性定量检测病毒外,还可应用物理方法,如在电子显微镜下计数病毒颗粒,或用紫外分光光度计测定提纯病毒的蛋白和核酸量,这些方法所测得的数据包括了的病毒粒。植物病毒的培养和检测大都是在整株植物上进行的医学教育|网搜集整理。从捣碎的病叶汁中制备病毒,常用枯斑法检测。用手指蘸上混有金刚砂的稀释病毒在植物叶片上轩轻摩擦,经一定时间后出现单个分开的圆形坏死或退绿斑点,称为枯斑。病原微生物检测方法-高通量测序技术。随着技术飞速发展高通量测序技术,又称为新一代测序技术,相对应于以Sanger测序法为一代测序技术而得名。广东新病原检查诊断微生物检测方法中比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。
生物的个体在一生的生长繁殖过程中,经过不同的发育阶段。这种过程对特定的生物来讲是重复循环的,常称为该种生物的生活周期或生活史。各种生物都有自己的生活史。在分类鉴定中,生活史有时也是一项指标,如黏细菌就是以它的生活史作为分类鉴定的依据。很多细菌有十分相似的外表结构(如鞭毛)或有作用相同的酶(如乳酸杆菌属内各种细菌都有乳酸脱氢酶)。虽然它们的蛋白质分子结构各异,但在普通技术下(如电子显微镜或生化反应),仍无法分辨它们。然而利用抗原与抗体的高度敏感特异性反应,就可用来鉴定相似的菌种,或对同种微生物分型。用已知菌种、型或菌株制成的抗血清,与待鉴定的对象是否发生特异性的血清学反应来鉴定未知菌种、型或菌株。该法常用于肠道菌、噬菌体和病毒的分类鉴定。利用此法,已将伤寒杆菌、肺炎链球菌等菌分成数十种菌型。
微生物检测方法中比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。此法简便快捷,但只能检测含有大量细菌的悬浮液,得出相对的细菌数目,对颜色太深的样品,不能用此法测定。测定细胞重量法此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重;干重法系单位体积培养物经离心后,以清水洗净放人干燥器加热烘干,使之失去水分然后称重。此法适于菌体浓度较高的样品,是微生物检测的一种常用方法。微生物检测方法中常用的有平板菌落计数法,是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。
近年来药品不安全事故不断发生,并呈上升趋势。在药品质量事故的高发期,强化药品微生物鉴定工作显得尤为重要,尤其是无菌药品。在无菌药品的生产中,对原料、辅料、包装材料、生产场所、生产过程的微生物控制是保证药品质量的基础,所以利用微生物鉴定技术快速、准确地获得鉴定结果,对当前无菌药品微生物鉴定工作来说非常重要。PCR技术能够鉴定出药品中含有诊疗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及李斯特杆菌多种成分,相关**学者在还没有经过富集化培养就采用免疫磁珠并结合PCR技术,准确并快速对药品进行检测,确定了药品中含有李斯特菌和大肠埃希氏菌成分;还有有关**采用实时荧光定量PCR技术检测实验菌株,确定药品中多数菌株呈阴性,而有少量溶血弧菌呈阳性。未知病原微生物鉴定要注意什么事项?广东新病原检查诊断
传统的微生物鉴定方法依赖于表型鉴定。北京新病原筛查服务公司
微生物检测中含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(pureculture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50℃左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物。北京新病原筛查服务公司