液相色谱对于多数药研人来说是很好上手的仪器,但是就算是用过几年、经验丰富的分析员也会习惯于一些错误的操作,导致挺贵的机器没用几次就坏了。简化分析过程固然重要,但是为了省时间而忽略了一些必不可少的步骤,损坏了实验室物资遭到前辈的无情diss,就得不偿失了(尤其是借来的仪器,就更应该爱惜)。流动相不过滤:因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相比较好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。上海哪里有卖好的二手液相色谱?连云港置换二手液相色谱直销
气泡溢出:流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purge键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清理不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。 无锡进口二手液相色谱租赁上海人禾电子科技有限公司专业供应二手液相色谱。
进样系统:一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。输液系统:该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X10Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质(即使只有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。
流动相溶剂瓶的保养:清洗过滤:溶剂瓶里的过滤头,其作用是为了防止溶液瓶中的颗粒杂质进入到仪器的流路系统中,它的材质通常分为玻璃烧结石英和不锈钢,如果不慎堵塞会造成流动相吸液不畅,因此必须进行清洗,玻璃材质的通常是用稀硝酸泡,而不锈钢材质的可以直接进行超声清洗。流动相的脱气:脱气的目的是为了除去流动相中溶解的气体,使色谱泵的输液准确,保留时间和色谱峰面积再现性提高;使基线稳定,信噪比增加,防止气泡引起尖峰,从而提高检测器性能;减少死体积,防止填料氧化,从而保护色谱柱。目前常用的脱气方法有以下4种。(1)氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高;(2)加热回流法:效果较好,但操作复杂,且有毒性挥发污染;(3)真空脱气法:易抽走有机相;(4)超声脱气法:流动相放在超声波容器中,用超声波振荡10~15min,此方法效果较差,但操作简单。实际工作中,超声脱气法操作简单,仍被广泛应用,虽然此方法有时会引起气体溶解度的增加,但基本上能满足日常分析操作的要求。上海人禾电子科技有限公司专业提供二手液相色谱仪,欢迎来电。
对液相色谱仪的要求:长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如,甲醇等),因为,纯水易长霉。每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。C18柱不能进蛋白样品,血样、生物样品。堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗,清洗方法:以异丙醇作溶剂冲洗;放在异丙醇中间用超声波清洗;用10%稀硝酸清洗;气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。上海人禾专业供应二手液相色谱仪,欢迎来电咨询。赛默飞二手液相色谱
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进样器分手动和自动两大类,虽然两者工作模式不同,但使用的要点是基本一致的。1.防止交叉污染自动进样器较常见的问题是交叉污染,交叉污染产生的原因很直接,样品残留在进样针内外表面,并随下一次进样进入色谱系统。要解决交叉污染,主要靠清洗。自动进样器都会有洗针的功能,如果样品浓度较高或者是吸附性比较强,一定要打开此功能;如果未打开洗针功能,污染可能已经残留在了针座或流通阀上,那么这两个部件需及时超声清洗。出现在自动进样器上的另外一个问题是峰面积重现性差,考虑可能与自动进样器吸取样品有关。首先观察样品的液面是不是足够高,以保证进样器可以吸到样品。排除这个问题后,再察看自动进样器的设置,对于一些粘度大的样品,要降低自动进样器的吸取速度。2.精细操作手动进样器的操作要点大致相同,应使用液相色谱仪专门平头进样针,进样时插针应插到底,不使用时将针头留在进样器内,使用前后都要及时清洗。连云港置换二手液相色谱直销
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