色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。买二手液相色谱请致电上海人禾。无锡常用二手液相色谱哪家好
峰分叉：⑴色谱柱被污染；⑵柱头填料塌陷。处理对于第一种情况，先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的长短由样品污染的情况而定），再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，然后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳，则考虑第二种情况。对于第二种情况，拧开柱头，检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分（污染的填料），装入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净，擦净柱外壁的填料，拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。深圳买二手液相色谱仪耗材买二手液相色谱请找上海人禾。
流动相脱气可以避免HPLC系统出问题，从而顺利得到理想的数据。HPLC系统内是不希望有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的力量，由于气体的压缩比与液体相比大的多，因而当气泡存在时，你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大，液相泵将不能输送任何溶剂，而且如果压力低于预先设定的压力低限，泵将停止工作。有些泵设计可以很好地排除气泡，而也有一些泵设计当气泡存在时将停止运转。当一个气泡通过输液泵时，由于系统压力大，气泡通常会溶解在流动相溶液中，随流动相通过柱子。
常见故障断定及解决方法：保留时间变化：1.柱温变化：柱恒温，必要时需配置恒温箱；2.等度与梯度间未能充分平衡：至少用10倍柱体积的流动相平衡柱；3.缓冲液容量不够：用》25mmol/L的缓冲液；4.柱污染：每天冲洗柱；5.柱内条件变化：稳定进样条件,调节流动相；6.柱快达到寿命：采用保护柱。保留时间缩短：1.流速增加：检查泵,重新设定流速；2.样品超载：降低样品量；3.键合相流失：流动相pH值保持在3~7.5检查柱的方向；4.流动相组成变化：防止流动相蒸发或沉淀；5.温度增加：柱恒温。购买二手液相色谱仪请找上海人禾。
色谱峰（peak）：组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种：前延峰（leadingpeak）和拖尾峰（tailingpeak）。前者少见。拖尾因子（tailingfactor,T）：用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子（symmetryfactor）或不对称因子（asymmetryfactor）。《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T<0.95为前延峰，T>1.05为拖尾峰。峰底：基线上峰的起点至终点的距离。峰高（peakheight,h）：峰的比较高点至峰底的距离。峰宽（peakwidth,W）：峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。半峰宽（peakwidthathalf-height,h/2）：峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ标准偏差（standarddeviation,σ）：正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。正常峰的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。峰面积（peakarea,A）：峰与峰底所包围的面积。购买二手液相色谱请找上海人禾。温州waters二手液相色谱仪维修
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常用的脱气方法：1.吹氦脱气法。利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性，在0.1MPa压力下，以约60mL/min流速通入流动相储液容器中10～15min，可以很有效地从流动相中排除溶解的空气，能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置，一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。这种脱气方法虽然好，但我们国内氦气价格较高，很少有实验室采用此方法。2.加热回流法。此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率，否则溶剂会丢失，混合流动相的比例会有变化。无锡常用二手液相色谱哪家好
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