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血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。在一些情况下,中和毒性物质维护细胞不受损害。南京牛血清批发

主要作用提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。●提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质(氢化可的松、)、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢中起重要作用,如SeO3,硒等江西猪血清采购平台真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂,一般表现出微红色或橘红色。

配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4°C下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合,用振荡器混匀成乳状,也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨,均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再继续研磨成乳剂,润十水水上10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原,亦可用一注射器装抗原液,另一注射器装佐剂,二者以聚乙烯塑料管连接,然后二者来回反复抽吸,约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原剂量,头次剂量为300~500ug,加强免疫的剂量约为头次剂量为1/4左右。每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂,头次免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必注射百日咳疫苗。在第2次加强免疫后2周,从耳缘静脉取2~3ml血,制备血清,检测抗体效价。如未达到预期效价,需再进行加强免疫,直到满意时为止。当抗体效价达到预期水平时,即可放血制备抗血清。

血清的分类根据取血年龄的不同,血清有以下分类:取血牛龄主要受当地畜牧业发展情况及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专为取血而养的牛。01胎牛血清(FetalBovineSerum,简称FBS)取自尚未出生,母牛剖腹心脏穿刺取血得到的血清。02国产胎牛血清(并无准确定义,但通常以此命名)出生4-6小时,未进行哺乳进食的新生牛,也有称作国产新生牛血清。03新生牛血清(NewbornCalfSeurm,简称NBCS)也有称作小牛血清,指的是出生14天-90天的进行取血的牛血清(也有说是指出生10天-90天)。04成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指取血时牛龄超过6个月的牛血清。在采集血过程中一定要注意如果用一次性真空管时血液应不间断地流入管中。

将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。如果在37℃或更高的温度解冻血清,血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶,但不改变血清的性能,同样血清热灭活也会导致沉淀的形成。浑浊和沉淀所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白,导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。如果想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装到无菌离心管中,以低速离心1~2min,上清液即可直接加入到培养基内使用。注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。原则上血清添加量不要太多,通常分为5%、10%、20%几档。辽宁牛血清采购平台

血清中供给了适量且份额适中的各式各样的激从来确保动物细胞离体后的正常代谢。南京牛血清批发

为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀?如何避免该现象?在2~8°C条件下存放,血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀,如血纤蛋白(fibrin),单体时处于溶解状态,在冻融过程中会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象,建议血清分装成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反复冻融和融化后的血清在2~8°C条件下长时间放置。南京牛血清批发

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