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何谓热灭活一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和焕活。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。血清在细胞培养中为细胞提供氨基酸,蛋白质,维生素(特别是脂溶性维生素如A,D,E,K)。南京动物血清价格

将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。如果在37℃或更高的温度解冻血清,血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶,但不改变血清的性能,同样血清热灭活也会导致沉淀的形成。浑浊和沉淀所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白,导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。如果想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装到无菌离心管中,以低速离心1~2min,上清液即可直接加入到培养基内使用。注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。南通牛血清采购平台部分细胞原代提取时会使用20%血清,大部分细胞正常培养时会使用5%~10%的血清浓度。

决定血清的颜色的因素胎牛血清的颜色会根据血红蛋白(鲜红色)、胆红素(黄色)含量的不同而表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色。因胎牛血清为动物来源,同一品牌的不同批次间的胎牛血清颜色也会因为血红蛋白、胆红素含量的不同而有差异。造成血清沉淀较多的原因:①对血清进行了热灭活处理;②血清反复冻融;③血清长期4℃储存;④室温或者37℃融化血清;⑤长期室温储存。有关血清批间差异的疑问血清来源于动物,其组成成分有1000多种,血清成分的组成及含量受供体动物年龄、生理条件、营养条件而有差别。每个批次的血清成分百分比含量是不确定的,批间差异是存在的。尤其是一些较为难培养的敏感细胞,批间差异会表现得较为明显。

马血清10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。猪血清猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。兔血清正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。羊血清用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。动物血清供应细胞生计和增殖所必需的生长调理因子。

不同类型血清比较的报道:2020年8月《生物学杂志》第4期刊登了一篇《不同类型牛血清对MDCK细胞培养效果研究》,研究了进口胎牛血清、国产胎牛血清、国产新生牛血清对MDCK细胞的促生长效果。作者在含10%不同类型牛血清的DMEM培养液中连续传代培养MDCK细胞,比较了三种血清培养MDCK细胞的传代稳定性、比较大増殖密度、倍增时间、比生长速率、贴壁率等指标。结果显示,在比较大增殖密度和倍增时间上,胎牛血清均优于新生牛血清。在贴壁率方面[贴壁率(%)=(所形成集落数/接种细胞数)×100%],进口胎牛血清略高于国产胎牛血清,差异明显;国产新生牛血清低于国产胎牛血清和进口胎牛血清,差异极明显。相同动物细胞代谢进程中有许多物质是动物细胞所必需而本身无法组成的的,例如碱基、氨基酸等微量物质。深圳牛血清厂家直销

长期保存血清必须在-10℃以下储存,并避免反复冻融。南京动物血清价格

1989年左右,也有国外学者建议用猪血清取代牛血清,用于培养制造非洲猪瘟病毒的细胞(见《动物检疫》1991年01期《猪血清中的牛血清白蛋白抗体引起非洲猪瘟血清学诊断的假阳性反应》),原因是牛血清中的白蛋白会干扰非洲猪瘟抗体的检测,造成假阳性反应。其他动物源血清兔血清:兔血清通常从六个月或更小的动物身上收集,可用于与BSA结合用作免疫细胞化学[1]和免疫组织化学中的封闭血清。山羊血清:多用做封闭液,也有一些研究人员发现,质量的山羊血清可用于某些细胞的培养。鸡血清:从屠宰供人类食用的健康鸡中收集的。有研究用于血清维生素B12的放射性同位素稀释测定 南京动物血清价格

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