牛血清是细胞培养中用量的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到祛毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。血清,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用:1.血清提供:营养和能量来源;生长和粘附因子;肽和类固醇;载体蛋白。2.保护细胞:免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。富含一些可供贴壁细胞型细胞贴壁生长的基质成分。德州动物血清价格
血清在细胞培养中为细胞提供氨基酸,蛋白质,维生素(特别是脂溶性维生素如A,D,E,K),碳水化合物,脂肪,,生长因子,矿物质及微量元素。此外,血清还可以缓冲培养基,抑制蛋白水解酶,增加培养基的粘度,降低在移液或搅拌时造成的剪切力。血清的保质期是5年,储存温度-10~-30℃。血清长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,长期保存血清必须在-10℃以下储存,并避免反复冻融。山东鸡血清哪里有卖血清长时间储存在2-8℃时。
何谓热灭活一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和焕活。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。
去外泌体血清去除≥99%的胎牛血清内源外泌体,并与处理前的胎牛血清具有相同的细胞生长速率和形态。适用于收集细胞分泌的外泌体时使用。透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白均被移除。透析血清主要用在进行营养成分优化和标定特定成分进行研究的实验中。碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的亲脂类(lipophilic)物质,如某些、细胞因子、生长因子等,去除作用对分子量大小并无区分。碳吸附胎牛血清常用于体外培养研究验证的作用效果。低IgG血清用于研究抗体、病毒和病毒反应、细胞表面抗原表位。四环素调控胎牛血清应用于使用敏感四环素诱导表达系统的细胞培养(Tet-on, Tet-off),以及其它对四环素敏感的实验中。为实验室和疫苗、细胞医疗企业提供支原体预防、检测和祛除的完整解决方案--山东云海生物。
配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4°C下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合,用振荡器混匀成乳状,也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨,均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再继续研磨成乳剂,润十水水上10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原,亦可用一注射器装抗原液,另一注射器装佐剂,二者以聚乙烯塑料管连接,然后二者来回反复抽吸,约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原剂量,头次剂量为300~500ug,加强免疫的剂量约为头次剂量为1/4左右。每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂,头次免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必注射百日咳疫苗。在第2次加强免疫后2周,从耳缘静脉取2~3ml血,制备血清,检测抗体效价。如未达到预期效价,需再进行加强免疫,直到满意时为止。当抗体效价达到预期水平时,即可放血制备抗血清。将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。山东鸡血清哪里有卖
部分细胞原代提取时会使用20%血清,大部分细胞正常培养时会使用5%~10%的血清浓度。德州动物血清价格
马血清10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。猪血清猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。兔血清正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。羊血清用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。德州动物血清价格
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