血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。在细胞培养中的作用主要有以下几点:1.提供对维持细胞指数生长的激生素,特别是基础培养基中没有或量很少的营养物,还包括一些主要的低分子营养物;2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激生素等,能结合或调变它们所结合的物质活力;3.血清中含有一些微量元素,有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解放毒性作用;4.细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源;5.血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用;6.抑制蛋白酶的作用,在贴壁细胞传代时可将剩余胰蛋白酶失活,从而保护细胞。血清中的免疫球蛋白可以用于制作疫苗和抗体药物。杭州心肌细胞血清量身定制
血清的使用:1、血清的热灭活:用血清进行热灭活的目的是,利用较高的温度使补体失活。由于胎牛血清会严格控制取血时间为5-8月龄的胎牛,此时还未形成完整的补体系统,因此,合格的胎牛血清,是不需要灭活的。但是实验中如果需要新生牛血清、小牛血清、猪血清或马血清这些血清时,则需要根据实验要求而定。根据血清厂家多年来总结的经验,常规解冻后,40℃水浴加热20分钟即可,能够尽可能地保留营养成分。2、细胞培养的应用:对于新的细胞系或从无血清培养转变到胎牛血清培养的细胞系,需要进行适应期。在初始适应期,可以将血清浓度逐渐降低,直到细胞适应无血清培养为止。3、关注血清的批次:相同品牌的胎牛血清,在蛋白质含量等方面,可能会存在批次差异,因此在同一实验中尽量使用来自同一批次的血清,以减少变异性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,请进行验证实验以确保结果的可重复性。长沙小鼠血清量身定制血清的制备需要进行技术创新和研发,以满足不同领域的需求。
血清的长期储存:血清在生产制备完成后,通过质量检测,然后被运送至市场上销售。整个过程中,包括运输流程,储存温度应严格保证在-20℃,避免反复冻融影响血清活性。实验人员在收到血清,检查完好后,及时将血清送至-20℃冰箱中储存,用时再取出采用三步法解冻。在未解冻的情况下,血清可长期储存在在-20℃或-80℃环境中,只要是在保质期内,均能正常使用。储存过程中,需要定期监控储存血清的冰箱中,温度是否符合规定,保证冰箱制冷效果(-20℃)是否正常,尽量避免出现温度大幅度的波动的情况,防止血清因温度变化而反复冻融的情况出现。另外,尽量将血清单独存放于一定区域(恒温区域),避免反复开关冰箱门对储存温度造成影响。
血清出现沉淀或絮状物质的原因:1.2-8℃长时间储存。2.解冻过程中未混匀。3.γ-辐照:不会损害血清的理化特性或细胞培养性能。4.反复冻融:使血清脂蛋白发生变性造成浑浊。5.血清中残留的纤维蛋白原:残留的纤维蛋白原在解冻后会转化为纤维蛋白,过量的纤维蛋白在血清中表现为可见的絮状物质。去除方法:400 g离心。不建议直接过滤血清以去除絮状物质,因为过滤器可能会堵塞或者截留重要的蛋白质。6.磷酸钙:磷酸钙在血清中通常呈云状,并且在倒置显微镜下观察会看到可以自由移动的小黑点,因此磷酸钙沉淀通常被误认为是微生物污染物。血清是一种透明液体,由血液中去除红细胞和凝血因子后得到。
胎牛血清是一种常用的细胞培养基组分,它含有丰富的生长因子和营养物质,可以促进细胞的生长和增殖。然而,胎牛血清中也可能存在一些病原微生物,如病毒、细菌等,这些微生物可能会对细胞培养产生不良影响,甚至导致细胞培养失败。因此,为了保证细胞培养的质量和安全性,胎牛血清需要进行灭活处理。灭活处理是指通过物理或化学方法杀死病原微生物,使其失去活性。常用的灭活方法包括热处理、辐射处理、化学处理等。其中,热处理是更常用的方法,可以有效地杀死大部分病原微生物,但也可能会对一些生长因子和营养物质造成损失。因此,在进行灭活处理时,需要根据具体情况选择合适的方法,并进行严格的质量控制,以确保胎牛血清的质量和安全性。总之,胎牛血清需要进行灭活处理,以保证细胞培养的质量和安全性。在进行灭活处理时,需要选择合适的方法,并进行严格的质量控制。血清的来源包括动物血液和人类血液。深圳专业血清补给公司
血清可以用于实验室研究,帮助科学家了解疾病的发生机制和寻找新的医疗方法。杭州心肌细胞血清量身定制
血清出现沉淀是血清的正常特性,各大品牌的血清均有沉淀的出现,根据普诺赛多年细胞培养测试经验,血清沉淀的多少与血清的使用效果没有必然关系。建议更换新批次血清的时候,取少量细胞进行试培养,以确定是否影响后续细胞生长。如何避免沉淀出现?正确的解冻方法:1、2℃~8℃解冻;2、解冻的过程中间断摇匀(隔一段时间轻柔摇匀);3、室温或者水浴溶解均易造成沉淀增多。正确使用和保存:1、非必须不用热灭活(热灭活会使血清中部分蛋白质变性析出,影响血清品质);2、不宜37℃预热,血清和完全培养基通常室温预热即可;3、避免反复冻融;4、避免紫外线照射;5、避免2-8℃长期保存,分装后-20℃长期保存,按需溶解。杭州心肌细胞血清量身定制