多克隆抗体可以采用以下各种方法之一进行免疫。淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);③必要时,14 天后,重复步骤②一次;④再过 7 天后,于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳静脉采集血。测定血清效价。抗体的作用不仅限于中和病原体,还可以启动其他免疫细胞,如巨噬细胞和NK细胞,促进病原体的去除。合肥IgA抗体公司排行
多克隆抗体免疫动物:抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于调理,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。抗体的特异性鉴定 抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。合肥IgA抗体公司排行特定的抗体可以用于制备特异性的试剂盒,用于检测特定病原体或标志物。
抗体木瓜蛋白酶水解片段:胃蛋白酶水解片段:胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连接的两条重链的近c端,水解Ig后可获得一个F(ab’)2片段和一些小片段pFc’。F(ab’)2是由两个Fab段及铰链区组成,由于Ig分子的两个臂仍由二硫键连接,因此F(ab’)2片段为双价,可同时结合两个抗原表位,与抗原结合可发生凝集反应和沉淀反应。由于F(ab’)2片段既保留了结合相应抗原的生物学活性,又避免了Fc段免疫原性可能引起的副作用,因而被普遍用于制备生物制品,如白喉抗有害素、破伤风抗有害素均是经胃蛋白酶消化后精制提纯的生物制品。胃蛋白酶水解Ig后所产生的pFc 7然后被降解,无生物学作用。
抗体的多样性:人血清中的抗体多种多样,B淋巴细胞可产生的抗体种类在108以上,可与众多不同抗原发生特异性结合。抗体多样性的原因主要有两方面:1.外源性因素环境中抗原种类甚多,每种大分子抗原又有多种抗原表位,每种抗原表位均可选择启动体内一个B细胞克隆,产生一种特异性抗体。2.内源性因素抗体多样性的另一个原因是由基因的结构及功能特征所决定的。编码人Ig重链及κ、λ型轻链的基因分别位于第14、2、22号染色体上。其中编码Ig重链的基因包括编码可变区的V、D、J及编码恒定区的C基因;编码Ig轻链的基因包括编码可变区的V、J及编码恒定区的C基因。抗体通过与细菌或病毒表面的抗原结合来阻止它们进一步侵袭机体。
抗体特性和功能:IgA分为两型:血清型为单体,主要存在于血清中,只占血清Ig总量的10%~15%;分泌型IgA(secretory IgA,SIgA)为二聚体,由J链连接,含内皮细胞合成的分泌片,经分泌性上皮细胞分泌至外分泌液中。SIgA合成和分泌的部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺,因此主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液。SIgA是外分泌液中主要的抗体类别,参与黏膜局部免疫,通过与相应病原微生物结合,阻止病原体黏附到细胞表面,在局部抗传染中发挥重要作用。SIgA在黏膜表面也有中和有害素的作用。新生儿易患呼吸道、胃肠道传染可能与IgA合成不足有关。婴儿可从母亲初乳中获得SIgA,这是一种重要的自然被动免疫过程。特定的抗体可以用于诊断某些疾病,如用于检测乙肝病毒传染的抗体。合肥IgA抗体公司排行
抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。合肥IgA抗体公司排行
由杂交瘤单细胞克隆所产生的单克隆抗体只能特异性地与抗原分子上的一个抗原决定簇结合,抗体成分均一,抗体的结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,且在培养过程中只要不发生变异,不同时间内分泌的抗体都能保持同样的结构和功能。用这种技术可按需要生产大量很纯的单一抗体,这些是用普通血清学方法所不能达到的。单克隆抗体的发展经历了鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体四个阶段。特别是全人源单克隆抗体,其可变区和恒定区都是人源的,这类抗体药物具有高亲和力、高特异性、几乎没有毒副作用等优点,克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点,成为调理性抗体药物发展的必然趋势。合肥IgA抗体公司排行