胸水外泌体示踪

外泌体在神经系统中与神经回路的控制相关，同时各种神经退行性疾病的致病蛋白还可以通过外泌体释放到细胞外并传递到其他细胞，与病情发展密切相关。病细胞释放的外泌体含有许多与血管新生和免疫逃逸相关的分子，构建适合病细胞生长的微环境，促进病细胞的发展。另外，病细胞来源的外泌体上粘着分子的表达形式决定着症状向身体部位的转移途径。近，有报告指出脂肪细胞释放的外泌体对肝脏的遗传基因表达有控制作用。许多病毒利用外泌体的产生路径传播细胞，受病毒传播的细菌和寄生虫通过外泌体控制其他受细胞传播的细菌、寄生虫的活动。来源于ai细胞的外泌体对自然杀伤细胞具有细胞毒性作用。胸水外泌体示踪

外泌体有很多潜在优势，但是外泌体在药物递送中的应用研究才刚刚起步，尚有许多问题需解决：如何修饰外泌体的靶向性：缺氧瘤细胞来源的外泌体倾向于向缺氧瘤组织内募集；此外，还可通过在外泌体膜表面设计与靶细胞特异性结合的抗体、配体或受体来实现。如何提高药物装载效率：目前主要有①前装载方法（首先将药物加载到母细胞中，随后外泌体形成并包裹药物分泌到细胞外，常用的方法如转染、共孵育等）；②后装载方法（直接将药物加载到外泌体中，例如孵育、电穿孔、超声、挤出、冻融循环等）；③其他装载方法（主要是通过生物工程修饰母细胞来实现）。如何实现外泌体的大量生产：目前大规模生产外泌体的方法主要是自发生产和非自发生产。杭州外泌体染色科学家也尝试利用外泌体的压制发病机制功能。

外泌体是细胞在特定条件下分泌的小囊泡，是细胞间传递信号，相互沟通和影响的重要工具，它可以直接进入受体细胞影响细胞功能。外泌体PK细胞因子：磷脂双层膜结构，可保护内容物，包含多种细胞因子可直接进入受体细胞。外泌体PK干细胞：无免疫排斥，体积小穿透力强，可避免伦理道德争议。年轻的脂肪组织中提取外泌体，在特定条件下扩大培养出具有调控毛发根部的囊干细胞功能的外泌体，包含多种细胞因子的外泌体直接进入毛发根部的囊细胞，恢复毛发根部的囊干细胞的正常功能。

多项研究表明中流细胞来源的外泌体能够抑制免疫相关的信号通路、阻碍机体对中流的免疫响应。Chen等研究发现黑色素瘤细胞、乳腺ai和肺ai细胞会产生携带程序性死亡分子1的配体(programmedcelldeath1ligand1，PD-L1)的外泌体，此类外泌体在血液中循环，通过表面PD-L1与T细胞结合，导致T细胞在到达中流细胞之前即受到抑制，达到远程干扰免疫细胞活性的效果。中流来源的外泌体能够抑制骨髓来源的抑制性细胞(该细胞是树突状细胞(dendriticcells，DCs)、巨噬细胞和(或)粒细胞的前体，具有抑制免疫细胞应答的能力)对中流的免疫监督。中流细胞来源的外泌体与巨噬细胞共孵育后，其内的miRNA-301a通过下调抑ai基因PTEN)，激huoPI3Kγ(phosphoinositide3-kinaseγ)信号分子，使巨噬细胞被“驯化”成为能参与抗yan反应、血管生成以及促进中流生长转移的M2型巨噬细胞。血液中的成纤维细胞所释放的外泌体，可以促进角质形成细胞的移动和增殖以及血管新生来促进伤口愈合。

外泌体可以由体内或体外培养的几乎所有类型的细胞分泌, 并广fan存在于血浆、胆汁、尿液、母乳、唾液、胸腔积液、淋巴、胃酸、支气管肺泡灌洗液、脑脊液、眼泪、滑膜液、羊水、腹水、鼻分泌物和子宫抽吸物液体等体液中。目前, 基于不同的分离原理, 研究者建立了五种主要的提取纯化技术, 分别为基于质量密度的超速离心技术、基于粒径大小的分离技术、基于溶解性质的聚合物沉淀技术、基于免疫亲和原理的分离技术和基于流体性质的微流控技术。外泌体复杂的内容物被认为是疾病诊断的无创或微创生物标志物。细胞外泌体摄取

中流外泌体内的lncRNA分子在一些中流相关疾病中具有重要的诊断应用价值。胸水外泌体示踪

外泌体基础医学和临床应用的探索和深入研究对如何准确及高纯度提取外泌体, 并完整保存提出了更高的技术要求。外泌体可通过差速超速离心在不同离心力下沉淀样品中不同的杂质组分, 并在100 000 ×g~200 000 ×g的转速下获取较纯的外泌体。差速超速离心技术被认为是外泌体分离的“金标准”, 也是目前常用的外泌体分离和浓缩方法。该方法可通过结合0.22 μm或0.45 μm孔径滤膜进行超滤来提高产物纯度减少外泌体的聚集, 其分离效率容易受到加速度、转子类型、旋转半径、沉降路径长度以及样品黏度等多种因素影响。胸水外泌体示踪